圈养马来熊血清LH检测

（烟台市园林管理处南山公园，山东烟台 264000）

以烟台动物园饲养的两只育龄雌性马来熊为研究对象，检测其不同季节血清中LH（促黄体生成素）含量。

1 麻醉保定与复苏

供采精马来熊采精前禁食、禁水12 h，采用陆眠宁（长春生产，）进行麻醉，肌肉注射。供试的雄性成年马来熊体重均在70～80kg左右，按照2.2ml/100kg的麻醉剂量，陆眠灵平均每只用量1.8～2ml。20～35min后进入麻醉状态，采精成功后静注陆醒宁（拮抗剂）进行复苏，约4～6min即苏醒，意识和行动基本恢复。

2 血液样品采集

麻醉情况下，人工轻微保定，桡侧皮静脉采血。每只每次采血2mL，注入含凝血活酶促凝剂的真空采血管内，离心分离血清约0.5ml，置-20℃保存，待测。

两只雌熊在2015年1月到12月，采血12次，每个月15号采血。

3 试验方法

血清LH含量的测定：采用放射免疫分析法（RlA），计算4个季节的平均值和标准差，并利用SPSS程序进行t检验。血样检测由泰安市中心医院提供，药盒供应商：天津协和，仪器型号：DFM-96型10管放射免疫γ计数器。待测血清均在技术规定的时间范围内测定。

4 结果与分析

（1）一号雌性马来熊（大花）血液中LH、FSH、E2和P在不同季节的含量检测。

由表1可见，一号马来熊促黄体生成素（LH）春季含量稳定在极低水平，平均0.856 mIU/ml，夏季水平升高达到7月峰值43.023 mIU/ml，秋季降低，平均值5.780 mIU/ml，冬季又恢复到较低水平，平均值0.450 mIU/ml。

（2）二号马来熊（小花）血液中LH、FSH、E2和P在不同季节含量检测。

二号马来熊促黄体生成素（LH）春季含量稳定在极低水平，平均2.776 mIU/ml，夏季水平升高达到7月峰值75.015 mIU/ml，秋季降低，平均值4. 878 mIU/ml，冬季又恢复到较低水平，平均值1.539mIU/ml。

（3）两只雌性马来熊血液中性激素LH变化比较

由表3和图1可知，两只雌性马来熊4个季节血液中LH浓度变化趋势相似，个体2在4个季节中LH含量春秋两个季节高于个体1，差异不显著（P>0.05）；夏季个体2 LH含量高于个体1，且差异显著极显著（P＜0.01）；冬季，低于个体1，差异极显著（P＜0.01）。个体1在四个季节中LH含量夏季与春秋冬三个季节均差异显著（P＜0.05），夏季与秋季差异显著（P＜0.05），春季与冬季差异不显著（P>0.05）。个体2在四个季节中LH含量夏季与春秋冬三个季节均差异显著（P＜0.05），夏季与秋季差异显著（P＜0.05），春季与冬季差异不显著（P>0.05）。两只个体LH外周血浓度含量均在夏季达到峰值，根据经典的母羊卵巢切除并植入雌二醇的试验，LH在繁殖季节时维持在较高的水平，而在乏情季节时则保持在基础分泌水平。LH四季变化结果可以推测高浓度的LH对开启和维持马来熊的发情可能有一定的影响。

图1 1号马来熊和2号马来熊4个季节LH变化比较

5 讨论

LH是一种由腺垂体分泌的糖蛋白激素，在FSH协同作用下可以促进雌性动物卵泡成熟和排卵，刺激卵泡内膜细胞产生雄激素，促进排卵后颗粒细胞黄体化。根据P.Chemineau等研究报道，山羊中LH的浓度存在明显的季节变化，乏情期浓度较低，进入发情期时显著上升。有报道称绵羊在乏情季节，虽然LH脉冲释放系统仍具有功能，但由于GnRH的波动性释放受到抑制，因此LH的脉冲释放也受到抑制。本研究结果显示，圈养马来熊处于发情期时的LH浓度显著高于乏情期时的浓度，刚好与之一致。目前研究表明出现乏情期的主要原因可能是LH的基础分泌减低，不会出现LH排卵峰值，因此导致乏情季节的出现。结合本研究的结果，这提示，高浓度的LH对开启和维持马来熊的发情具有重要影响。

表1 一号马来熊（大花）4季血液中LH分泌量

表2 二号马来熊（小花）4季血液中LH分泌量

表3 一号马来熊4季血液中LH、FSH、E2和P的分泌量变化（平均值±标准误）

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