艾纳香乙酸乙酯部位抗菌活性成分研究

袁媛 庞玉新 元超

摘 要 本研究采用硅胶柱层析、ODS反相柱层析、sephadex LH-20分子筛技术分离纯化艾纳香乙酸乙酯，共获得7个化合物。采用波谱学技术进行结构鉴定，7个化合物分别为：3，3，5，7-四羟基-4-甲氧基-二氢黄酮（1），7-甲氧基紫衫叶素（padmatin）（2），木犀草素-7-甲醚（3），咖啡酸（4），北美圣草素（5），槲皮素（6）和木犀草素（7）。采用96孔板倍比稀释法，对单体化合物抗细菌活性进行评价，结果显示化合物2和3具有较好的抑制金黄色葡萄球菌活性，MIC值均为64 ?g/mL。化合物2和4均为首次从该植物中分离，化合物2和3可作为艾纳香抗菌活性先导化合物，为相关新药研发提供依据。

关键词 艾纳香；抗菌；化学成分；黄酮

中图分类号 R284 文献标识码 A

Antibacterial Constituents of Ethyl Acetate Extract from Blumea balsamifera （L.） DC.

YUAN Yuan1， PANG Yuxin2， 3 *， YUAN Chao3

1 Institute of Tropical Agriculture and Forestry， Hainan University， Haikou， Hainan 570228， China

2 National Resource Center for Chinese Materia Medica， CACMS， Beijing 100700， China

3 Tropical crops Genetic Resources Institute， CATAS， Danzhou， Hainan 571737， China

Abstract Seven pure compounds were isolated by repeated column chromatography of silica gel， sephadex LH-20 and ODS reverse phase silica gel from the EtOAc extract of Blumea balsamifera （L.） DC.. The structures were elucidated to be 3，3'，5，7-tetrahydroxy-4'-methoxyflavanone （1）， 7-O-methyltaxifolin （padmatin） （2）， luteolin 7-methyl ether （3）， caffeic acid （4）， eriodictyol （5）， quercetin （6） and luteolin （7） on the basis of detailed spectroscopic analysis in conjunction with the published data. These compounds were evaluated for antibacterial activities against three bacteria including Staphylococcus aureus subsp. aureus （DSM 799）， Escherichia coli （DSM 1116） and Bacillus subtilis （DSM 1088） by double dilution method. Bio-assay results showed that 2 and 3 exhibited inhibition against Staphylococcus aureus subsp. aureus （DSM 799） with MIC value of 64 ?g/mL， respectively. Compounds 2 and 4 were isolated from this plant for the first time， and compounds 2 and 3 could serve as a potential new drug.

Key words Blumea balsamifera （L.） DC.； antibacterial； chemical constituents； flavones

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2018.06.024

艾納香又名大风艾、冰片艾、大风叶等[1]，为菊科（Asteraceae）艾纳香属植物艾纳香 [Blumea balsamifera （L.） DC.]的新鲜或干燥地上部分，其味辛、微苦、性温、气香，有祛风消肿[2]，活血止痒的功效，能够治疗风湿关节炎，湿疹，皮肤瘙痒等症[3]。广泛分布于海南、云南、贵州等省区，是黎族、苗族等少数民族的重要民族药[4]。有关艾纳香化学成分研究已经有数篇相关报道，主要有广西师范大学的朱廷春[5]从艾纳香乙酸乙酯部位中共分离得到11个化合物，其中9个为黄酮类化合物，仅对3种成分在艾纳香中的含量进行了评价；上海交通大学的陈铭[6]从艾纳香中分离得到32个化合物，包括黄酮类化合物13个、萜类13个和6个其他成分，只对部分萜类化合物进行了抑制 RAW264.7巨噬细胞产生NO活性评价；严启新等[7]从艾纳香中分离得到12个黄酮类化合物；谭道鹏等[8]从艾纳香中分离鉴定出12个化合物，其中11个为黄酮类，包括3个黄酮苷类。但相关研究对艾纳香中的黄酮成分生物活性报道较少。

本课题组前期研究显示艾纳香乙酸乙酯部位具有较好的抗细菌活性[9]，综合考虑艾纳香在海南黎族民间用于治疗皮肤瘙痒以及热水煮汤用于妇女产后沐浴，可杀菌止痒，有效地减少妇女疾病的发生[10]等用途，为进一步研究艾纳香作为传统民族草药发挥抗菌作用的具体药效物质基础，本文对其乙酸乙酯部位进行进一步研究，并对其抗菌活性进行评价。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 材料与菌株 艾纳香叶片于2017年5月采自海南省儋州市宝岛新村，中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所艾纳香资源圃，经中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所庞玉新研究员鉴定为菊科艾纳香属植物艾纳香[Blumea balsamifera （L.） DC.]，标本保存于中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所南药室。供试细菌菌株Staphylococcus aureus subsp. aureus （DSM 799）、Escherichia coli （DSM 1116） 和 Bacillus subtilis （DSM 1088） 均由青岛大学药学院李刚老师提供。

1.1.2 仪器与试剂 核磁共振波谱仪（Bruker Avance-500MHz）；液质联用仪：SYNAPT G2 HDMS 超高效液相飞行时间高分辨质谱联用系统（Waters Corporation， Milford， MA， USA）；Waters 2489 半制备液相色谱系统（Waters Corporation， Milford， MA， USA）；XFS-280A手提式压力蒸汽灭菌锅（浙江新风医疗器械有限公司）；R206B旋转蒸发仪（上海申生科技有限公司）； DNP-9052BS-Ⅲ电热恒温培养箱（上海申苗医疗器械制造有限公司）；SW-CJ-1F超净工作台（苏州广源净化科技有限公司）。

sephadex LH-20葡聚糖凝胶（GE Healthcare Bio-Sciences AB， Sweden）；ODS-A反相键和硅胶（北京慧德易科技有限责任公司）；柱层析硅胶（100-200目）、GF254薄层硅胶板、石油醚、乙酸乙酯、氯仿、甲醇等试剂均为分析纯。

1.2 方法

1.2.1 提取与分离 艾纳香阴干叶片6 kg，揉碎，用95%甲醇回流提取，每次提取3 h，共提取2次，抽滤，合并滤液，减压浓缩至无醇味，用5倍体积的水悬浮，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取部分减压浓缩至干，得乙酸乙酯浸膏。

乙酸乙酯浸膏70 g，拌硅胶，上硅胶柱分离，依次用二氯甲烷/甲醇100/0、99/1、98/2、97/3、95/5、10/1、1/1、0/1梯度洗脱，根据薄层色谱检测，合并，获得9个组分，编号A、B、 C……I。组分D静置，瓶子底部出现大量黄色结晶性粉末，滤出后得化合物1；组分E静置，底部出现淡黄色粉末，滤出后，甲醇溶解，上sephadex LH-20柱层析，甲醇为洗脱剂，根据薄层色谱分析进行合并，得到化合物2和3；组分F用甲醇溶解，0.45微孔滤膜过滤，少量ODS-A拌样，上ODS-A反相柱层析分离，依次用90%甲醇洗脱，100%甲醇洗脱，其中90% 洗脱部分浓缩至干，甲醇溶解，上sephadexLH-20柱层析，甲醇洗脱，洗脱馏分静置，分别析出化合物4、5、6、7。

1.2.2 纯度检测和化合物结构确证方法 （1）纯度检测方法：获得的7个化合物，分别采用薄层色谱结合高效液相色谱仪分析的方法确认纯度，薄层色谱显示为单一斑点，并且高效液相色谱图上表现为单一色谱峰的，即可确认为纯化合物，可进一步用于结构测试。

薄层色谱条件：GF254薄层硅胶板，展开剂：二氯甲烷/甲醇10/1，显色剂：碘缸；

高效液相色谱条件：采用Waters 2489 半制备液相色谱系统，色谱柱为YMC ODS-A（250×10 mm， 粒径5 ?m），紫外检测器，柱温箱温度为35 ℃，采用梯度洗脱系统：50%甲醇/水保持2 min，然后50%～100%甲醇/水用30 min，流速为2 mL/min。

（2）化合物结构确证方法：单体化合物的结构鉴定方法采用核磁共振技术（1H NMR、13C NMR）结合质谱技术，并通过相关物理常数的测定，与已知文献数据的比对，对化合物进行结构确证。

1.2.3 化合物1～7的抑菌活性测定 -80 ℃保存的金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus subsp. Aureus），大肠杆菌（Escherichia coli）和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）菌株室温解冻后，接种到LB培养基上，37 ℃培养过夜。将菌悬液在振荡器上振荡，血细胞计数板计数，调整菌悬液浓度为1×106 CFU/mL。将其用MHB培养液（牛肉粉2 g，可溶性淀粉1.5 g，酸水解酪蛋白17.5 g，溶于1 L蒸馏水中，pH 7.4，高压蒸汽灭菌，即可）稀释菌液1 000倍至103 CFU/mL，作为供试菌悬液。采用微量倍比稀释法[11-12]测定化合物1～7对3株供试细菌的抑制活性，測定时每孔中最终菌悬液体积均为100 ?L，化合物1～7的浓度范围为128～8 ?g/mL，培养板置37 ℃温箱中培养过夜，观察结果，链霉素为阳性对照，所有试验重复3次，计算最低抑菌浓度（MIC）（表1）。

2 结果与分析

2.1 结构鉴定

化合物1，浅黄色粉末，mp 175-177 ℃，ESI-MS m/z 317 [M+H]+， 1H NMR （500MHz， DMSO-d6） δ：11.91 （1H， s， 5-OH）， 10.85 （1H， s， 7-OH）， 9.07 （1H， s， 3′-OH）， 6.95-6.89 （3H， m， H-2′， 5′， 6′）， 5.93 （1H， d， J=2.0 Hz， H-8 ）， 5.89 （1H， d， J=2.0 Hz， H-6）， 5.80 （1H， d， J=6.0 Hz， 3-OH）， 5.04 （1H， d， J=11.0 Hz， H-2）， 4.53 （1H， dd， J=11.0， 3.0 Hz， H-3）， 3.79 （3H， s， 4′-OCH3）. 13C NMR （125 MHz， DMSO-d6） δ： 198.1 （C-4）， 167.3 （C-5）， 163.8 （C-9）， 162.9（C-7）， 148.4（C-4′）， 146.7 （C-3′）， 130.2 （C-1′）， 119.7 （C-2′）， 115.6 （C-6′）， 112.2 （C-5′）， 100.9 （C-10）， 96.5 （C-8）， 95.5（C-6）， 83.3 （C-2）， 72.0 （C-3）， 56.1 （4′-OCH3）。 以上数据，与Pang等[13]报道基本一致，确定该化合物为3，3′，5，7-四羟基-4′-甲氧基-二氢黄酮（图1）。

化合物2，浅黄色粉末，EIMS m/z 318 [M]+， 1H NMR（500MHz， DMSO-d6） δ： 11.87 （1H， s， 5-OH）， 9.06 （1H， s， 3′-OH）， 8.99 （1H， s， 4′-OH）， 6.90 （1H， s， H-2′）， 6.75 （1H， s， H-5′， H-6′）， 6.11 （1H， d， J=2.5 Hz， H-6）， 6.08 （1H， d， J=2.0 Hz， H-8）， 5.82 （1H， d， J=6.5 Hz， 3-OH）， 5.03 （1H， d， J=11.5 Hz， H-2）， 4.56 （1H， dd， J=11.0， 6.0 Hz， H-3）， 3.79 （3H， s， 7-OCH3）. 13C NMR （125 MHz， DMSO-d6） δ： 198.9 （C-4）， 168.0 （C-7）， 163.5 （C-9）， 162.9 （C-5）， 146.3 （C-3′）， 145.4 （C-4′）， 128.3 （C-1′）， 119.9 （C-6′）， 115.8 （C-2′）， 115.6 （C-5′）， 101.8 （C-10）， 95.3 （C-6）， 94.2 （C-8）， 83.7 （C-2）， 72.1 （C-3）， 56.4 （7-OCH3）。以上数据与Ragaba等[14]基本一致，确定该化合物为7-甲氧基紫衫叶素（图1）。

化合物3，白色粉末，mp 203-205 ℃，ESI-MS显示分子离子峰 m/z 301 [M+H]+，1H NMR （500MHz， DMSO-d6） δ：12.99 （1H， s， 5-OH）， 7.46 （1H， d， J=2.5Hz， H-2′）， 7.44 （1H， dd， J=4.0， 2.0 Hz， H-6′）， 6.90 （1H， d， J=8.0Hz， H-5′）， 6.74 （1H， s， H-3）， 6.73 （1H， d， J=2.0 Hz， H-8）， 6.38 （1H， d， J=2.0 Hz， H-6）， 3.87 （3H， s， 3′-OCH3）. 13C NMR （125 MHz， DMSO-d6） δ： 182.3 （C-4）， 165.6 （C-2）， 164.7 （C-7）， 161.7 （C-5）， 157.7 （C-9）， 150.4 （C-4′）， 146.3 （C-3′）， 121.8 （C-1′）， 119.6 （C-6′）， 116.4 （C-5′）， 114.0 （C-2′）， 105.1 （C-10）， 103.5 （C-3）， 98.4 （C-6）， 93.0 （C-8）， 56.5（-OCH3）。以上数据与黄永林等[15]报道基本一致，确定该化合物为木犀草素-7-甲醚（图1）。

化合物4：白色粉末，mp 223-225 ℃，ESI-MS m/z 179 [M+H]+， 1H NMR （500MHz， DMSO-d6） δ： 7.43 （1H， d， J=15.5 Hz， H-7）， 7.05 （1H， d， J=1.5 Hz， H-2）， 6.97 （1H， dd， J=8.0， 1.5 Hz， H-6）， 6.78 （1H， d， J=7.5 Hz， H-5）， 6.20 （1H， d， J=16.0 Hz， H-8）. 13C NMR （125 MHz， DMSO-d6） δ： 168.5 （C-9）， 148.6 （C-4）， 146.0 （C-7）， 144.9 （C-3）， 126.2 （C-1）， 121.6 （C-6）， 116.2 （C-8）， 115.8 （C-5）， 115.1 （C-2）。以上数据与Nakazawa等[16]报道基本一致，确定该化合物为咖啡酸（图1）。

化合物5，无色针晶，mp 267-268 ℃，ESI-MS m/z 179 [M+H]+， 1H NMR（500MHz， DMSO-d6） δ： 12.15 （1H， s， 5-OH）， 6.89 （1H， s， H-2′）， 6.75 （2H， s， H-5′， 6′）， 5.88 （2H， d， J=1.5 Hz， H-6， 8）， 5.38 （1H， dd， J=12.5， 3.0 Hz， H-2）， 3.18 （1H， dd， J=17.0， 12.5， H-3b）， 2.68 （1H， dd， J=17.0， 3.0， H-3a）. 13C NMR （125 MHz， DMSO-d6） δ： 196.8 （C-4）， 167.1 （C-7）， 163.9 （C-5）， 163.3 （C-9）， 146.2 （C-4′）， 145.6 （C-3′）， 129.9 （C-1′）， 118.4 （C-6′）， 115.8 （C-5′）， 114.8 （C-2′）， 102.2 （C-10）， 96.2 （C-6）， 95.4 （C-8）， 78.9 （C-2）， 42.5 （C-3）。以上数据与Haraguchi等[17]报道基本一致，确定该化合物为北美圣草素（图1）。

化合物6，黄色粉末，mp：313-314 ℃，ESI-MS 显示分子离子峰 m/z 303 [M+H]+。1H NMR （500MHz， DMSO-d6） δ：12.5 （1H， s， 5′-OH）， 7.69 （1H， d， J=2.5 Hz， H-2′）， 7.55 （1H， dd， J=7.5， 2.0 Hz， H-6′）， 6.90 （1H， d， J = 7.5 Hz， H-5′）， 6.42 （1H， d， J =1.5 Hz， H-8）， 6.20 （1H， d， J = 2.0 Hz， H-6）。13C NMR （125 MHz， DMSO-d6） δ ：176.3 （C-4）， 164.3 （C-7）， 161.2 （C-9）， 156.6 （C-5），148.1 （C-4′）， 147.2 （C-2）， 145.5 （C-3′）， 136.2 （C-3）， 122.4 （C-10）， 120.4 （C-6′）， 116.1 （C-5′）， 115.5 （C-2′）， 103.5 （C-1′）， 98.6 （C-6）， 93.8 （C-8）。以上數据与Saewanl等[18-19]和Nessa等[19]报道数据一致，因此鉴定该化合物为槲皮素（图1）。

化合物7，白色粉末，mp：264-266 ℃，ESI-MS 显示分子离子峰 m/z 287 [M+H]+。1H NMR （500MHz， DMSO-d6） δ：12.99 （1H， s， 5-OH）， 7.44 （1H， d， J = 2.0 Hz， H-2′）， 7.41 （1H， dd， J =4.5， 2.0Hz， H-6′）， 6.91 （1H， d， J = 8.0 Hz， H-5′）， 6.68 （1H， s， H-3）， 6.46 （1H， d， J = 2.0 Hz， H-8）， 6.20 （1H， d， J = 2.0 Hz， H-6）. 13C NMR （125MHz， DMSO-d6）： δ 182.1 （C-4）， 164.6 （C-7）， 164.3（C-2）， 161.9 （C-9）， 157.7 （C-5）， 150.1 （C-4′）， 146.2 （C-3′）， 122.0 （C-1′）， 119.4 （C-6′）， 116.5 （C-5′）， 113.8 （C-2′）， 104.1 （C-10）， 103.3 （C-3）， 99.3 （C-6）， 94.3 （C-8）。以上数据，与梁会等[20]报道基本一致，鉴定该化合物为木犀草素（图1）。

2.2 对3株细菌的抑制活性

抑菌活性结果显示，化合物2和3对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus subsp. aureus （DSM 799）具有较强抑制活性，MIC值均为64 μg/mL，同时，对大肠杆菌Escherichia coli （DSM 1116）也具有一定抑制活性，MIC值为128 μg/mL。

3 讨论

艾纳香为传统黎族和苗族草药，具有悠久的用药历史[21- 22]。艾渣为艾纳香叶通过水蒸气蒸馏提取了挥发性的小分子成分后剩余的残渣。在贵州等艾纳香主产区，老百姓采用蒸馏法提取艾粉和艾油后产生的大量艾渣，丢弃在河边和田地，给生态环境带来严重影响。然而艾渣中富含大量黄酮类成分，目前未被开发利用[23]。王秋萍等[24]用60%乙醇、90 ℃提取艾渣中黄酮含量，可达到2.9%。为艾渣中大量黄酮提取利用奠定基础。黄酮类化合物作为天然产物中一大类重要成分，具有广泛的生物活性，如郭志红等[25]报道玉米须中的黄酮类成分具有调节血脂、 抗糖尿病、 抗心血管疾病、抗氧化活性、抗癌、抑菌、抗疲劳等广泛的药理活性；李聘等[26]报道益母草中黄酮类成分具有抗心肌缺血、促进心肌收缩、兴奋子宫、抗氧化及抑菌等作用。暗示了黄酮类化合物潜在的抗菌活性价值。

从传统中草药或药用植物中发现天然的抗菌物质，并应用于医药、食品、农业等各领域，也已成为一个大的发展趋势。杨秀芳等[27]从一种樟科调味品植物木姜子的枝叶中获得的一系列黄酮化合物，抗菌活性测试结果显示其中大部分黄酮类成分均具有较好的抗菌活性，松属素查儿酮对枯草芽孢杆菌和绿脓杆菌的MIC值均为12.5 ?g/mL，可用于食品的防腐储存；芹菜素、芹菜素7-O-β-D-葡萄糖苷和异槲皮素对苹果腐烂病菌、芍药炭疽病菌等病原真菌具有较强抑制活性，具有开发成植物源农药的前景。朱玥等[28]研究显示苦参总黄酮对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、柠檬色葡萄球菌、铜绿假单胞菌等均具有较好的抑制活性。很多黄酮化合物在在医药领域有很好应用，如高良姜中的黄酮类化合物高良姜素具有很好的逆转耐药菌株效果，Eumkeb等[29]报道高良姜素与头孢他啶联合用药，可对耐β-内酰胺类抗生素的金黄色酿脓葡萄菌产生协同抗菌作用，进一步的抗菌机制研究表明，高良姜素对耐药菌产生的青霉素酶和内酰胺酶有显著的抑制作用。

综上表明，植物源黄酮类成分是抗菌先导化合物发现的重要源泉。本研究从艾纳香乙酸乙酯萃取部位中分离并鉴定了7个单体化合物，6个为黄酮类成分，其中化合物2和4均为首次从该植物中分离获得。抑菌活性评价结果显示，化合物2和3具有较好的抑菌活性，对金黄色葡萄球菌的MIC值均为64 μg/mL，对大肠杆菌的MIC值为128 μg/mL。本研究有助于艾纳香这一传统黎族和苗族草药的现代化开发利用，为天然食品防腐剂和新药研发等提供重要的备选先导化合物，同时也为艾纳香产业中艾渣的再利用提供借鉴。

参考文献

[1] 中国科学院植物志编辑委员会. 中国植物志[M]. 北京： 科学出版社， 1988： 19-21.

[2] 赵金华， 康 晖， 姚光辉， 等. 艾纳香化学成分研究[J]. 中草药， 2007， 38（3）： 350-352.

[3] 韦睿斌， 庞玉新， 杨 全， 等. 艾纳香黄酮类化学成分研究进展[J]. 广东药学院学报， 2014， 30（1）： 123-127

[4] 官玲亮， 庞玉新， 王 丹， 等.中国民族特色药艾纳香研究进展[J]. 植物遗传资源学报， 2012， 13（4）： 695-698.

[5] 朱廷春. 艾纳香乙酸乙酯萃取部位的化学成分研究[D]. 桂林： 广西师范大学， 2007.

[6] 陈 铭. 艾纳香的活性成分研究[D]. 上海： 上海交通大学， 2009.

[7] 严启新， 谭道鹏， 康 晖， 等. 艾纳香中的黄酮类化学成分[J]. 中国实验方剂学杂志， 2012， 18（5）： 86-89.

[8] 谭道鹏， 严启新， 康 晖， 等. 艾纳香化学成分的研究[J]. 天然产物研究与开发， 2012， 24（6）： 718-721.

[9] 聞 庆， 庞玉新， 胡 璇， 等. 艾纳香残渣不同提取部位体外抑菌活性研究[J]. 广东药学院学报， 2015， 31（6）： 713-716.

[10] Boer H J D， Cotingting C. Medicinal plants for women's healthcare in southeast Asia： a meta-analysis of their traditional use， chemical constituents， and pharmacology[J]. Journal of Ethnopharmacology， 2014， 151 （2）： 747-767.

[11] 范 琳， 魏晓华. 一株地衣内生细菌的代谢产物[J]. 中国抗生素杂志， 2016， 41（7）： 520-523.

[12] Yuan C， WangH Y， Wu C S， et al. Austdiol， citromycetin and fulvic acid derivatives from an endolichenic fungus Myxotrichum sp.[J]. Phytochemistry Letters， 2013， 6（4）： 662-666.

[13] Pang Y， Wang D， Fan Z， et al. Blumea balsamifera - a phytochemical and pharmacological review[J]. Molecules， 2014， 19： 9 453-9 477.

[14] Ragaba E A， Raafat M. A new monoterpene glucoside and complete assignments of dihydroflavonols of Pulicaria jaubertii： potential cytotoxic and blood pressure lowering activity[J]. Natural Product Research， 2016， 30 （11）： 1 280-1 288.

[15] 黄永林， 朱廷春， 文永新， 等. 艾纳香化学成分的分离与鉴定[J]. 广西植物， 2010， 30（4）： 560-562， 567.

[16] Nakazawa T， Ohsawa K. Metabolism of rosmarinic acid in rats[J]， Journal of Natural Product， 1998， 61（8）： 993-996.

[17] Haraguchi H， Saito T， Ishikawa H， et al. Antiperoxidative components in Thymus vulgaris[J]. Planta Medica， 1996， 62（3）： 217-221.

[18] Saewan1 N， Koysomboon S， Chantrapromma K. Anti-tyrosinase and anti-cancer activities of flavonoids from Blumea balsamifera DC.[J]. Journal of Medicinal Plants Research， 2011， 5（6）： 1 018-1 025.

[19] Nessa F， Ismail Z， Karupiah S， et al. RP-HPLC method for the quantitative analysis of naturally occurring flavonoids in leaves of Blumea balsamifera DC[J]. J. Chromatogr. Sci.， 2005， 43： 416-420.

[20] 梁 會， 曹佩雪， 邱净英， 等. 艾纳香化学成分的研究[J]. 时珍国医国药， 2011， 22 （2）： 308-309.

[21] 甘炳春， 杨新全， 李榕涛. 黎族药用植物资源的利用及民间医药[J]. 琼州学院学报， 2008， 15（1）： 27， 17.

[22] 关亚丽， 潘 琴， 黄敏仁. 民族植物学与海南黎药资源开发[J]. 南京林业大学学报（自然科学版）， 2009， 33（4）： 145-149.

[23] 王秋萍， 何 珺， 陈 伟， 等. 艾渣中有效成分的定性检测及含量测定[J]. 云南农业大学学报（自然科学版）， 2016， 31（4）： 751-756.

[24] 王秋萍， 马海霞， 吴 竹， 等. 正交实验法优化艾纳香提取废渣中总黄酮提取工艺[J]. 广东农业科学， 2015， 42（18）： 93-97.

[25] 郭志红， 周鸿立. 玉米须黄酮类化学成分及药理作用研究进展[J]. 中国实验方剂学杂志，2015， 21（8）： 222-225.

[26] 李 聘， 陆治名， 张百霞. 益母草中黄酮类成分的研究进展[J]. 医学研究与教育， 2017， 34（4）： 63-68.

[27] 杨秀芳， 王 媛， 马养民， 等. 木姜子枝叶中化学成分活性的研究[J]. 陕西科技大学学报（自然科学版）， 2014， 32（06）： 78-81.

[28] 朱 玥. 苦参总黄酮的提取工艺优化及抗菌作用研究[D]. 哈尔滨： 哈尔滨商业大学， 2016.

[29] Eumkeb G， Sakdarat S， Siriwong S. Reversing β-lactam antibiotic resistance of Staphylococcus aureus with galangin from Alpinia officinarum Hance and synergism with ceftazidime[J]. Phytomedicine， 2010， 18（1）： 40-45.