中药渣滤液发酵制剂对肉鸡生长性能和免疫功能的影响

聂铭 胡留杰 孙志洪 陈霞 谢永红

摘   要   试验研究在肉鸡日粮添加中药渣滤液发酵液对肉鸡生长和免疫功能的影响，为开发利用中草药加工副产品及畜禽产品安全生产提供理论参考。将1 000只1日龄健康青脚麻肉鸡随机分成4组，每组5个重复，每个重复50只鸡，分别饲喂每1 kg基础饲料加吉他霉素10 mg、恩拉霉素10 mg、硫酸粘杆菌素10 mg和每1 kg基础饲料分别添加1%、2%、3%的中药渣滤液发酵液的NRC（1994）的日粮，采样并测定肉鸡的生长性能、屠宰性能、机体抗氧化指标和免疫指标。结果表明，日粮不同水平中药渣滤液发酵液显著影响肉鸡平均日增量，但对平均日采食量的影响不显著，其中，添加3%中药渣滤液发酵液的生产性能最佳;日粮不同水平中药渣滤液发酵液显著提高肉鸡腿肌率、胸腺指数。在肉鸡生产中添加该药渣滤液发酵液能够替代抗生素，且添加量为3%时效果最好。

关键词   中药渣滤液;发酵液;肉鸡;生长性能;免疫功能

中图分类号：S831    文献标志码：A    DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2018.34.004

近年来，随着家禽养殖规模的不断扩大，抗生素等药物饲料添加剂的应用越来越广泛。抗生素的过量使用一方面使得动物产生耐药性，同时造成抗生素在动物体内的大量残留，并通過食物链危及人类健康，引起致癌、致畸和致突变。因此，寻找抗生索替代品刻不容缓。本试验旨在探讨中药渣滤液发酵液对肉鸡生长性能和免疫功能的影响，为开发利用中草药加工副产品及畜禽产品安全生产提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 试验设计

在四川巨星企业集团饲料有限公司动物试验基地（四川乐山）进行，将1 000只1日龄健康青脚麻肉鸡随机分为4组，每组5个重复，每重复50只。对照组每1 kg基础饲料加吉他霉素10 mg、恩拉霉素10 mg、硫酸粘杆菌素10 mg;试验组为无抗生素组，组I、组II、组III每1 kg基础饲料分别添加1%、2%、3%的中药渣滤液发酵液。试验期为42 d，分为肉小鸡、肉中鸡2个阶段饲养。日粮配方参照NRC鸡营养需要（1994）进行设计。

1.2 饲养管理

试验鸡采用笼养结合地面平养模式，料桶、饮水器充足，自由采食及饮水，23 h光照，按常规免疫程序进行疫苗接种。

1.3 样品采集与指标测定

于肉鸡42日龄从每个重复随机选取4只大小适中者进行心脏采血10 mL，2 mL肝素钠抗凝，分离血浆离心（3 700 r·min-1，7 min），于-80 ℃下贮存，备用。

于肉鸡42日龄进行屠宰试验。屠宰时，每重复选取1只接近平均体重的肉鸡，称量，颈部放血宰杀。每只鸡取脾脏、胸腺和法氏囊，仔细剥离其周围的脂肪和其他组织，用生理盐水洗干净后称量，用于计算免疫器官指数。

1.3.1 生长性能和饲料利用

分别于第1天、第21天、第42天对每个重复单独进行空腹称重（称重前一天晚上8点断料，正常饮水），第7天、第14天、第2l天、第28天、第35天、第42天称取每个重复的周耗料量。

1.3.2 血样

试剂盒测定血浆中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总抗氧化能力（T-AOC）、过氧化氢酶（CAT）、总蛋白、白蛋白、免疫球蛋白A、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M，试剂盒购自南京建成生物工程研究所及北京诚林生物有限公司。

1.3.3 免疫性能

免疫器官指数=免疫器官重量/活重

1.3.4 屠宰性能

屠体重：指禽体放血、拔毛后的重量。

半净膛重：指屠体重去食道、气管、嗉囊、胰腺、脾脏、肠和生殖器官，留下心、肝（去胆）、肺、肾、腺胃、肌胃（去除内容物及角质膜）和腹脂的重量。

全净膛重：指半净膛重去心、肝、肺、肌胃、腺胃、腹脂和头脚后的重量。去头时，在第一颈椎骨与头部交界处连皮切开;去脚时，沿跗关节处切开。

腿肌重：指禽体腿部去骨、去皮的肌肉重量。

胸肌重：指屠体剥离下的胸肌的重量。

腹脂重：指腹部和肌胃周围的脂肪重。

屠宰性能指标计算：全净膛屠宰率（PE）=全净膛重/活重×100%，半净膛屠宰率（PHE）=半净膛重/活重×100%，胸肌率（PBM）=胸肌重/全净膛重×100%，腿肌率（PLM）=腿肌重/全净膛重×100%，腹脂率（PAF）=腹脂重/全净膛重×100%。

1.3.5 肝脏抗氧化指标

试剂盒测定肝脏超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总抗氧化能力（T-AOC）、过氧化氢酶（CAT），试剂盒购自南京建成生物工程研究所;提取十二指肠和盲肠内容物DNA，用于测定肠道微生物区系，进行其DNA测序。测肠绒毛高度、绒毛宽度和隐窝深度。

1.4 数据处理与分析

数据经过Excel 2010初步处理后，采用SAS 9.0统计软件进行单因素方差分析（one-way ANOVA）进行显著性检验，Duncans进行多重比较。

2 结果与分析

2.1 日粮添加中药渣滤液发酵液对肉鸡生长性能的影响

由表1可知，日粮添加中药渣滤液发酵液对肉鸡末重的影响与对照组相比无显著影响，但试验组末重在数值上均高于对照组（P>0.05）。试验1～21 d，试验III组平均日采食量显著高于对照组和试验II组（P<0.05），试验I、II组平均日采食量与对照组相比无显著差异（P>0.05），试验组平均日增重均显著高于对照组（P<0.05）。试验22～42 d，试验组平均日采食量和平均日增重在数值上均高于对照组，但差异不显著（P>0.05）。试验1～42 d，试验I、III组平均日采食量显著高于对照组（P<0.05），试验II组日采食量与对照组相比无显著差异（P>0.05）;试验组平均日增重均显著高于对照组（P<0.05）;试验II组料重比显著低于对照组，试验I、III组料重比与对照组相比无显著差异（P>0.05）;试验组存活率与对照组相比无显著差异（P>0.05）。

2.2 日粮添加中药渣滤液发酵液对肉鸡屠宰性能的影响

由不同处理肉鸡屠宰试验结果（见表2）可知，试验I-III组腿肌率均显著高于对照组（P<0.05）;试验II、III组腹脂率显著低于对照组（P<0.05），试验I组腹脂率与对照组相比无显著差异（P>0.05）;试验I-III组半净膛率、全净膛率、胸肌率，与对照组相比均无显著差异（P>0.05）。

2.3 日粮添加中药渣滤液发酵液对肉鸡器官指数的影响

由表3可知，试验I-III组胸腺指数均显著高于对照组（P<0.05）;试验I-III组脾脏指数在数值上均高于对照组，但差异不显著（P>0.05）;试验III组法氏囊指数显著高于对照组和试验I组（P<0.05），试验I、II组法式囊指数与对照组相比无显著差异（P>0.05）。

2.4 日粮添加中药渣滤液发酵液对肉鸡腹泻率的影响

对1～21日龄肉鸡腹泻调查（见表4）可知，试验1～21 d，试验I-III组腹泻率均低于对照组，但与对照组相比无显著性差异（P>0.05）。

2.5 日粮添加中药渣滤液发酵液对肉鸡血浆抗氧化功能的影响

不同处理饲喂肉鸡血浆抗氧化性酶活性和抗氧化能力测试结果（见表5）表明，试验III组超氧化物歧化酶活性显著高于对照组（P<0.05），试验I、II组超氧化物歧化酶活性与对照组相比无显著差异（P>0.05）;试验II、III组谷胱甘肽过氧化物酶活力显著高于对照组（P<0.05），试验I组谷胱甘肽过氧化物酶活力与对照组相比无显著差异（P>0.05）;试验I-III组总抗氧化能力、过氧化氢酶活性、丙二醛含量，与对照组相比均无显著差异（P>0.05）。

2.6 日粮添加中药渣滤液发酵液对肉鸡血浆免疫指标的影响

由表6可知，II、III组免疫球蛋白G含量显著高于对照组（P<0.05），试验I组免疫球蛋白G含量与对照组相比无显著差异（P>0.05）;试验I-III组总蛋白含量、白蛋白含量、球蛋白含量、白球比、免疫球蛋白A含量、免疫球蛋白M含量，与对照组相比均无显著差异（P>0.05）。

2.7 日粮添加中药渣滤液发酵液对肉鸡肝脏抗氧化功能的影响

由表7可知，试验II组总抗氧化能力显著高于对照组（P<0.05），试验I、III组总抗氧化能力与对照组相比无显著差异（P>0.05）;试验I-III组过氧化氢酶活性均显著高于对照组（P<0.05）;试验I-III组超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、谷胱甘肽过氧化物酶活性，与对照组相比均无显著差异（P>0.05）。

2.8 日粮添加中药渣滤液发酵液对肉鸡肠道微生物区系的影响

根据样品分类学分析结果，可以得到多个样本在属水平上的分类学比较情况。由本试验结果分析可知，试验II组和试验III组拟杆菌门的丰度高于对照组;厚壁菌门的丰度试验组低于对照组;试验组变形杆菌门和放线菌门的丰度都随着中草药药渣发酵液添加水平的增加而降低;试验II组梭杆菌门丰度与对照组一致。

由表8可见，对照组PD指数显著高于试验I组和试验II组（P<0.05），与试验III组基本一致;对照组Chaol、Shannon、Simpson指数总体都稍高于试验组，但差异不显著（P>0.05）。

由图1可知，对照组、试验I组、试验II组和试验III组肉鸡盲肠微生物中包含约84.6%的共有菌种，主要有拟杆菌门、厚壁菌门、变形杆菌门、放线菌门。

2.9 日粮添加中药渣滤液发酵液对肉鸡肠道粘膜形态结构的影响

由表9可知，对照组空肠绒毛高度与试验II组、试验III组差异显著（P<0.05），对照组空肠绒毛高度与试验II组无显著性差异（P>0.05）;对照组空肠隐窝深度与试验组比较差异不显著（P>0.05）;对照组VH/CD与试验I、II、III组无显著性差异，但在数值上小于各試验组。

3 结论

在肉鸡日粮中添加药渣滤液发酵液，能够提高肉鸡平均日采食量、平均日增重和存活率，降低料重比等，改善生产性能;对肉鸡胸腺指数和法氏囊指数有显著影响，提高免疫器官指数;随着中药渣滤液发酵液添加比例的增加而提高肉鸡血浆免疫指标，机体抗氧化能力明显改善;显著提高肉鸡空肠绒毛高度和VH/CD，改善青脚麻肉鸡肠道菌群结构，维持肠道微生物区系的多样性，保证肠道微生态平衡。综合本试验结果认为，在肉鸡生产中添加该药渣滤液微生物发酵液能够替代抗生素，且添加量为3%时效果最好。