程镜霖
摘 要:农药残留快速检测仪与气相色谱法比较虽然只能做定性分析,但由于其操作简单、成本较低、检测速率远远高于气相色谱法等优点,而得到广泛应用。同时此方法可对蔬菜和水果进行粗筛,从而保障人们食菜安全。本文主要介绍GDYN-106SD农药残毒快速检测仪的原理及操作过程。
关键词:农药残留;快速检测
一、农药快速检测原理
如果蔬果中没有农药或者残留量低,乙酰胆碱酶活性不被抑制[1]可与乙酰硫代胆碱水解成硫代胆碱和乙酸,其与二硫双对硝基苯甲酸产生显色反应,使溶液呈黄色。酶活性被抑制的程度即抑制率,就是通过颜色变化来体现的。我们检测的就是这个黄色的变化,从而确定蔬果中农药残留情况。
二、农药残留快速检测仪
采用吉大小天鹅GDYN-106SD农药残毒快速检测仪,为测量波长在407~413nm之间的分光光度计,反应后的浅黄色溶液在410nm处有最大的吸收峰。
三、检测试剂
使用上海瑞鑫农药残留试剂盒,生产批号2017-4-11,包含试剂如下:
提取液:pH为8的磷酸溶液,加入510ml蒸馏水。
酶液:胆碱酯酶,加入3.1ml提取液。
显色剂:二硫双对硝基苯甲酸,在棕色瓶中加入32ml提取液。
底物:乙酰硫代胆碱,加入3.1ml蒸馏水。
四、校准及空白测量
选择校准菜单,按确认键。用移液器提取1.0ml提取液到比色瓶中,再用微量移液器取50ul酶液和50ul显色剂到比色瓶中,盖好瓶塞后摇匀,将比色瓶插入1号比色槽中放置3min,按↑键进行校准。按↓进行空白测量,当仪器显示“请加试剂4”,取出校准后的比色瓶,加入50ul底物,盖上瓶塞摇匀,将其放入1号比色槽内按确认键,倒计时3min,空白测量结束吸光度A1=0.042、A2=0.449,?A=0.407≧0.1。若?A<0.1说明酶活性不够,需要配制新的酶液重新校准及空白测量。
五、实验步骤
1、取样:用取樣器分别扎取生菜、油麦菜和小白菜叶片1.0g于提取瓶中,将豆角、青茄子和苹果切成1cm左右,称取1.0g于提取瓶中。
2、浸提:在提取瓶中加入5ml提取液,超声提取3min。
3、测量:分别取1ml提取液于6个连体比色瓶中,各加入50μl酶液与50μl显色剂,37℃培养15min,取出比色瓶,各加入50μl底物进行测量,3min后显示测量结果。一台仪器每组可进行6个样品检测。
六、检测结果的判定
1、初次检测结果≦50%为合格样品[2]。
2、检测结果﹥50%的样品,需要复检2次以上,检测结果﹥50%且重复率≧80%的样品判定为不合格,重复率<80%判定为合格。
根据检测结果判定,以上6个样品的农药残留为合格。
参考文献
[1]中华人民共和国农业行业标准.SY/T488-2001蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法、
[2]中华人民共和国国家标准.GB/T5009.199.2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测、
(作者单位:辽宁省沈阳)