金标法与酶联免疫法在抗-HIV测定中的应用

于福荣

（辽阳市第五人民医院检验科，辽宁 辽阳 111000）

艾滋病作为一种综合征，主要是因为机体感染人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）后引发的免疫缺陷，进而导致相关感染，甚至会引发死亡[1]。现阶段，全球有大于二百多个国家与地区已经有艾滋病的报道，此病已经成为世界性的医学难题与政治性问题[2]。因为艾滋病的广泛流行性与病情的严重性，致使患病后的病死率比较高。所以，倘若可及时、有效的诊断艾滋病，对携带HIV患者及时筛选，针对艾滋病的转播和发展具有控制效果[3]。为了探究在抗-HIV测定中采用金标法与酶联免疫法的应用效果，本研究选取于本院2014年4月至2016年10月收治的980例患者，选取患者的血液样本都在其空腹的状态才采集5 mL的血液样本，采血过程中都严格按照无菌标准实施操作，分别采用金标法与酶联免疫法予以检测，并对不同方法的检测结果予以分析，报道如下。

表1 分析不同检测方法对血样抗-HIV的检测结果

1 资料与方法

1.1 一般资料：纳入于本院2014年4月至2016年10月收治的980例患者，其中有男性患者710例，所占比例72.45%，女性患者270例，所占比例27.55%，最小年龄20岁，最大年龄54岁，平均年龄（32.45±18.12）岁。选取患者的血液样本都在其空腹的状态才采集5 mL的血液样本，血样检测前全部血样都没有被污染，也未出现溶血情况；采血过程中都严格按照无菌标准实施操作。

1.2 方法

1.2.1 金标法：利用金标法试剂加入25 μL血清后再加入缓冲液一滴，放置20 min，利用肉眼观察，倘若试纸上产生两条红线，可把此次血样检测确定是阳性，如果产生一条红线，则把此次血样检测确定是阴性，并对产生红线时间准确记录。

1.2.2 酶联免疫法：采用酶联免疫试剂与配套仪器，根据说明书标准开展操作，检测结果采用酶标仪予以判定，检测标准a值：检测波长与参考波长分别为450 nm、630 nm，在a值超过1时，表示血样检测为阳性，反之，a值＜1时，表示血样检测为阴性。

不同检测方法中初次检验确定为阳性的血样，需要再次检查，实施确认试验，把确认试验确定是阳性血样送到疾病控制中心实施免疫印迹检测；酶联免疫对血样检测的过程中，所有试验仪器与操作过程等都需要根据相关标准实施操作，且由相同的检测人员在相同检测室内对所有血样进行检测。

1.3 统计学分析：通过SPSS19.0软件分析计数资料，其用百分率%表示，检查选择χ2，P＜0.05，为有统计学意义。

2 结 果

见表1。金标法与酶联免疫法确诊血样阳性率分别为1.12%、0.31%，免疫印迹确诊阳性例数为10例，全部血样中的阳性血样所占比例为1.02%（10/980），金标法的假阳性率为0.10%（1/980）、0.71%（7/980），两种检测方法假阳性率的对比差异有统计学意义（χ2=4.5184，P＜0.05）。

3 讨 论

艾滋病主要是因为感染HIV导致的一种严重的传染病，症状表现为持续发热与盗汗等，在中青年人群中十分常见，主要传播途径为性接触、血液以及母婴[4]。因此，对潜伏于人体的艾滋病毒及时检测，对于艾滋病的传播与发展的控制具有积极影响[5]。目前，临床对艾滋病常用的诊断方法为抗体检测。在人体感染HIV时，机体会快速出现免疫反应与抵抗性抗体，这些抗体对病毒的入侵、寄生虫的入侵以及病原体的入侵等具有控制效果[6]。

金标法是一种较为先进的体外诊断手段，其具有较高的灵敏性与特异性，操作简便、快捷，检测准确率较高[7]。其只根据特制的检验盒于较短时间内就可以获得检测结果，主要操作步骤为抽血以后滴在试纸上，放置20 min后对此试纸是否有颜色变化予以认真观察，倘若存在颜色变化，初步检测为阳性。此种检测方法在医院或多数患者均较适用，具有操作方便、快捷的特点，检测结果快速、准确。酶联法就是按照酶免疫测定原理改良的新型技术，其主要分为双抗原夹心法、间接法以及抗体竞争法三类[8]。现阶段，国内与国外通常采用第3代双抗原夹心法试剂。主要检测流程为：将加入酶反应的底物后，底物受到酶催化转变为有色产物，产物和标本中受检物质的量具有密切联系，因此，可以按照颜色反应深浅予以刊物定性或定量分析。因为酶催化频率相对较高，因此，可使反应效果显著放大，进而促使检测方法的敏感度明显提高[9]。

本研究选取患者的血液样本都在其空腹的状态才采集5 mL的血液样本，采血过程中都严格按照无菌标准实施操作，分别采用金标法与酶联免疫法予以检测，并对不同方法的检测结果予以分析，结果显示：金标法与酶联免疫法确诊血样阳性率分别为1.12%、0.31%，免疫印迹确诊阳性例数为10例，全部血样中的阳性血样所占比例为1.02%，金标法的假阳性率为0.10%、0.71%，两种检测方法假阳性率的对比差异有统计学意义（χ2=4.5184，P＜0.05），说明金标法应用于HIV抗体检测具有较高的灵敏度，酶联免疫法的特异度较高。不同血液中的HIV抗体检测手段，在检测原理至操作过程中存在一定的不同，金标法的反应速度较快，不需要采用特殊的仪器与花费大量时间获得检测结果。针对病情紧急者，倘若利用酶联免疫法检测血液，会对患者的病情造成延误，倘若在检测血液前没有确诊，且在临床主治医师不知情的情况下，手术治疗会使艾滋病的传播风险明显增加，因此，利用金标法能够将急诊中遇到的此种情况有效解决，使治疗医师对患者的病情充分掌握。但是酶联免疫对艾滋病患者的监测精准度高于金标法，误差比较小，虽然操作相对较复杂，在非紧急情况下比较适用[10]。

总而言之，金标法与酶联免疫法在抗-HIV测定中都有一定效果，因此在具体检测过程中，应该按照实际情况合理的选择检测方法。

[1] 宋丽娟,侯志敏,张巧云.用于无偿献血初筛的最佳HBsAg/TP联合检测金标试纸条的筛选及意义[J].宁夏医学杂志,2017,39(6):532-534.

[2] 陈娜云,姚仁南,马继慧.核酸扩增及微流芯片法检测HCV-Ab临界值附近标本的结果探讨[J].中华全科医学,2016,14(4):639-642.

[3] 张克传.金标法、间接血凝法与酶联免疫法检测弓形虫IgG抗体的对比研究[J].中国社区医师,2017,33(1):5-5.

[4] 何英爱,姚叶林.ELISA法和GIGA法测定乙型肝炎病毒血清标志物的比较研究[J].中国当代医药,2017,24(9):135-137.

[5] 孟宪婷.酶联免疫法筛查HIV抗体的艾滋病诊断研究[J].大家健康旬刊,2017,11(1):53-53.

[6] 陆卫英.金标法与酶联免疫法测定抗-HIV的效果研究[J].医学美学美容旬刊,2015,24(6):711-711.

[7] 魏学锋.酶联免疫吸附法检测乙型肝炎病毒表面抗原假阳性的影响因素分析[J].中国医药指南,2016,14(23):113-114.

[8] 李红.金标法与酶联免疫法测定抗-HIV的效果分析[J].中国冶金工业医学杂志,2017,34(4):487-488.

[9] 陈同庆.36854例普通住院患者梅毒血清学抗体阳性率及其分布状况调查[J].标记免疫分析与临床,2015,22(4):306-309.

[10] 邢朝富,刘艳芳,朱小进.血浆D-二聚体在上消化道出血中的研究分析[J].中国医药指南,2016,14(3):136-137.