胃癌患者血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平及临床意义

王静，王亚明，田云霄，吴士茜，孙颖，袁艳龙，张桂东，王海红，王杰，霍双

（邯郸市中心医院a.病理科，b.普外一科，c.普外科，d.泌尿外科，e.科教科，河北 邯郸 056001）

在世界范围内，胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，调查显示其发病率居第4位，病死率位列癌症死因的第2位［1］，在中国等发展中国家约有70%的胃癌新发病例和死亡病例［2］。临床资料显示，胃癌的早期确诊率很低，大部分患者在诊时已处于中晚期，近80%的患者存在局部淋巴结转移，提示探寻胃癌特异性的血清肿瘤标志具有重要临床价值。E-钙黏蛋白是一种介导细胞-细胞间黏附的钙依赖性跨膜蛋白，黏附下降是引起肿瘤发生发展的重要因素之一，提示其有作为胃癌早期标志的可能［3］。膜联蛋白A7属膜联蛋白家族成员，具有典型的磷脂结合特性、Ca2＋通道形成特性，在细胞生长调节、分化、凋亡、膜转运及钙离子信号转导等方面起到重要作用［4-5］。本研究通过检测96例胃癌患者及60例正常人血清中E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平，旨在分析其与胃癌临床病理特征间的相关性以及对胃癌预后评估临床应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取邯郸市中心医院肿瘤科2014年5月—2015年1月收治并确诊的胃癌患者96例，其中男性61例，女性35例；年龄54～71岁，Ⅰ期17例，Ⅱ期20例，Ⅲ期40例，Ⅳ期19例。Ⅰ期和Ⅱ期为胃癌早期组，Ⅲ期和Ⅳ期为胃癌晚期组。收集同期在邯郸市中心医院体检健康者60例作为对照组，其中男性39例，女性21例；年龄50～75岁，平均（64.17±8.95）岁。两组基本资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 诊断标准 患者采取胃镜和病理检查进行确诊。胃癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移等根据国际抗癌联盟（2002年）相关标准制定［6］。

1.3 入选标准 （1）符合胃癌相关标准；（2）年龄20～75岁；（3）首次确诊者；（4）进行本研究前未接受放化疗等相关治疗；（5）患者或患者近亲属知情，且签署知情协议书。

1.4 排除标准 （1）伴有心、脑、肝等脏器严重障碍者；（2）生存期预计少于1年者；（3）不能配合随访者；（4）同时有其他类型肿瘤者。

1.5 实验方法

1.5.1 指标检测 所有研究对象静脉血采集均在晨起空腹进行，约3 mL，血样室温离心，血清置于-70℃下保存。E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7测定采取酶联免疫吸附法（ELISA），检测均使用同一批次试剂。检测所有患者肿瘤灶直径。

1.5.2 分析指标 （1）比较对照组健康体检者和胃癌组患者血清中E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平；（2）分析血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平与患者的性别、年龄和肿瘤的位置、大小、分化程度、TNM分期、淋巴结转移间的相关性；（3）随访结果：所有患者予1年化疗后随访，记录死亡例数，比较生存病例和死亡病例在入院时血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平。

1.6 统计学方法 采用SPSS 17.0软件包对数据进行统计分析，计量数据用表示，采用独立样本t检验或t′检验比较组间差异；计数资料以频数表示，用χ2检验比较组间差异，所有检验均为双侧检验，p＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平比较 与对照组比较，胃癌组患者血清E-钙黏蛋白显著降低，膜联蛋白A7显著提高，比较差异有统计学意义（p＜0.01），见表1。

表1 两组血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平比较／（μg·L-1

表1 两组血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平比较／（μg·L-1

组别 例数 E-钙黏蛋白 膜联蛋白A7对照组60 15.13±1.87 10.22±1.31胃癌组 96 2.27±0.29 27.06±2.97 t值52.873 48.515 P值 ＜0.001 ＜0.001

2.2 胃癌临床病理参数对血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平的影响 不同年龄、性别以及胃癌的大小、肿瘤位置的患者血清中E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平差异无统计学意义（P＞0.05）；不同分化程度、TNM分期、淋巴结转移的患者血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平差异有统计学意义（p＜0.01），见表2。

2.3 胃癌患者中死亡和存活患者血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平比较 1年期随访发现30例死亡，66例存活。死亡胃癌患者在入院时血清E-钙黏蛋白水平显著低于存活患者，膜联蛋白A7水平显著高于存活患者，比较差异有统计学意义（p＜0.01），见表 3。

表3 胃癌患者血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白 A7水平比较／（μg·L-1

表3 胃癌患者血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白 A7水平比较／（μg·L-1

类别 例数 E-钙黏蛋白 膜联蛋白A7死亡患者30 1.72±0.23 33.41±3.93存活患者 66 2.82±0.39 22.71±2.86 t值17.247 13.388 P值 ＜0.001 ＜0.001

3 讨论

采取肿瘤标志物筛查已成为胃癌早期诊断重要方式之一。血清生物学标志物是近年临床常用于肿瘤诊断的手段，具有敏感性好、操作便捷等优点［7］。近年来验证的血清标志物如癌胚抗原［8］、多种糖类抗原［9］等。但是以上血清标志物仅仅能表示胃癌发病机制中的某一方面，要达到对胃癌进行早期更好地、全面地确诊，探寻提取新的特异性更高、敏感性更好的胃癌血清标志物仍是当前临床面临的重要科学问题。

表2 血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平与胃癌临床病理特征的相关性／（μg·L-1）

表2 血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平与胃癌临床病理特征的相关性／（μg·L-1）

病理因素 例数 E-钙黏蛋白 t值P值 膜联蛋白A7 t值P值年龄1.534 0.128 0.446 0.657＜60岁 46 2.18±0.60 27.75±6.92≥60岁 50 2.36±0.55 28.37±6.71性别 1.125 0.263 0.044 0.965男61 2.21±0.51 28.09±6.41女35 2.33±0.49 28.03±6.56大小 1.077 0.284 0.553 0.581＜5 cm 40 2.35±0.67 28.44±6.72≥5 cm 56 2.19±0.75 27.68±6.57肿瘤位置 0.473 0.637 0.584 0.561胃体 33 2.30±0.61 27.63±6.81贲门或幽门 63 2.24±0.58 28.49±6.88 TNM分期 14.648 ＜0.001 8.224 ＜0.001Ⅰ＋Ⅱ 37 2.73±0.34 25.18±2.97Ⅲ＋Ⅳ 59 1.81±0.22 30.94±3.55分化程度 13.475 ＜0.001 9.223 ＜0.001高、中分化 36 2.69±0.32 24.90±2.83低分化 60 1.85±0.25 31.22±3.85淋巴结转移 12.965 ＜0.001 8.370 ＜0.001未见转移 35 2.64±0.30 24.99±3.05有转移61 1.90±0.25 31.13±3.671

E-钙黏蛋白为Ⅰ型跨膜糖蛋白，存在于人体上皮细胞膜，作为细胞黏附分子在维持上皮细胞极性和细胞紧密连接中发挥了关键性作用［10］。研究发现E-钙黏蛋白在人类很多恶性肿瘤中相对于正常组织呈现异常表达或低表达，且与肿瘤分化程度、淋巴结转移等临床病理参数密切相关［11］。研究发现，E-钙黏蛋白在胃癌组织中呈低表达，且与肿瘤分化、淋巴结转移、临床分期等呈明显相关［3，12］。本组结果显示，胃癌组患者血清E-钙黏蛋白显著降低（p＜0.01），血清E-钙黏蛋白水平与胃癌患者的年龄、性别以及胃癌的大小、位置差异无统计学意义（P＞0.05），与分化程度、TNM分期及淋巴结转移呈明显相关（p＜0.01），死亡组患者入院时血清E-钙黏蛋白水平显著低于存活组（p＜0.01）。提示了血清E-钙黏蛋白水平可能与胃癌发生和病情恶化联系密切，有可能成为评估胃癌治疗预后的重要临床指标之一。

膜联蛋白A7属钙依赖性磷脂结合蛋白。研究发现，敲除小鼠膜联蛋白A7基因后，23%小鼠产生自发性肿瘤，提示膜联蛋白A7基因表达异常参与了肿瘤的发生发展过程［13］。随后多项研究证实，膜联蛋白A7在前列腺癌和胶质母细胞瘤组织中较正常组织中表达明显降低［4，13］。其他研究发现，膜联蛋白A7乳腺癌和胃癌组织中表现明显升高［13-14］。本组结果显示，胃癌组患者血清膜联蛋白A7水平明显升高（p＜0.01），血清膜联蛋白A7水平与胃癌患者的年龄、性别以及胃癌的大小、位置无明显相关（P＞0.05），与胃癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移呈明显相关（p＜0.01），死亡组患者入院时血清膜联蛋白A7水平显著高于存活组（p＜0.01）。提示了血清膜联蛋白A7水平可能与胃癌的发生发展联系密切，有望成为评估预后的重要临床指标之一。

综上，胃癌患者血清E-钙黏蛋白水平显著低于对照组，而膜联蛋白A7水平明显升高，且两者的血清学水平与胃癌的临床病理特征如分化程度、TNM分期、淋巴结转移呈明显相关，可作为胃癌的早期诊断的备选标志物之一，有待于大样本、多中心胃癌血清样品的验证。

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