勃起功能障碍药物治疗的研究现状

龚知城，左 翼，钟义洋，，赵善超南方医科大学南方医院泌尿外科，广东 广州 5055；广州番禺第六人民医院泌尿外科，广东 广州 54

勃起功能障碍（ED）是指男性不能持续获得和维持足够的阴茎勃起以完成满意的性生活。其他类型的性功能障碍，如早泄和低性欲有时会发生，然而，男性中最常见和最具破坏性的问题是ED。马萨诸塞州男性衰老研究发现，40～70岁的男性中有52%报告有某种形式的ED[1]。大于40岁的中国男性，ED的患病率估计为40.56%[2]。ED患病率随年龄增加而升高。许多因素可能导致男性性功能障碍，包括身体和心理状况，合并症和使用的药物。生活方式和行为以及雄激素缺乏症（通常是睾丸激素水平下降）也可能影响性功能。一项对30～79岁男性的研究显示，24%的男性睾酮水平低于300 ng/dL[3]。高血压、糖尿病和心血管疾病等疾病以及抑郁和焦虑等心理疾病也导致中老年男性性功能障碍。心血管疾病和高血压导致动脉狭窄和硬化，导致阴茎血流量减少，影响勃起功能。糖尿病是性功能障碍的常见病因，因为它可以影响阴茎的血管和神经。男性糖尿病患者出现ED的可能性比未患糖尿病人群高4倍，患病时间平均提前15年[4]。肥胖也与几种性功能障碍的发展相关，包括性欲减少和ED发作增加[5]。有数百种药物有ED的副作用[6]。采用根治性前列腺切除术、放射疗法或使用性激素疗法等治疗方法治疗前列腺癌的男性，可能会伴随出现ED[7]。吸烟、过度饮酒和违法药物也与ED有关[8]。

口服磷酸二酯酶-5（PDE5）抑制剂通常被认为是治疗ED的有效疗法。睾酮水平较低的ED患者，雄激素治疗能改善对PDE5 抑制剂无反应患者的勃起功能，与PDE5抑制剂合用可能有协同效应[9]。但是糖尿病合并ED或根治性前列腺切除术的ED患者对这些药物反应不佳[10]。因此，需要寻找克服当前可用的口服药物缺陷的新治疗策略。许多研究人员试图开发靶向中枢和外周不同分子途径的新药。对靶向多巴胺和黑皮质素受体的中枢作用模式的治疗剂，在其临床前模型中对阴茎勃起的有效性进行了深入研究。同时，还研究了多种具有外周作用模式的药物，靶向可溶性鸟苷酸环化酶，Rho激酶途径等。生物疗法通过恢复或再生海绵状血管内皮细胞，海绵体神经或抑制继发于神经血管功能障碍的组织缺氧的组织纤维化来恢复NO生物利用度，对ED来说是一种有希望的治疗方法。已经报道了血管生成、神经再生以及抗纤维化的各种临床前试验。本文回顾了PDE5抑制剂治疗、雄激素治疗，介绍了临床或临床前研究中ED的治疗方法，包括靶向药物疗法，蛋白质疗法和基因疗法。

1 PDE5抑制剂治疗

阴茎海绵体中的PDE5能水解环磷酸鸟苷（cGMP），使其浓度降低，抑制阴茎海绵体平滑肌松弛。PDE5抑制剂可减少cGMP的降解而提高其浓度，促使海绵体平滑肌舒张从而增加阴茎动脉血流，阴茎海绵窦充血、膨胀，促进阴茎勃起[11]。目前，口服PDE5抑制剂已成为ED治疗的首选方式，并且因其使用方便、安全、有效，也易被多数患者接受。目前国内常用的PDE5抑制剂包括西地那非、他达拉非和伐地那非，这3种PDE5抑制剂的药理作用机制相似，口服后在性刺激状态下能诱发有效勃起，对ED患者总体有效率80%左右。

服用PDE5抑制剂的方法包括按需治疗和规律治疗。可以根据需要使用，在性接触前1 h左右服用。西地那非按需治疗的推荐剂量分别是50、100 mg，其对一般ED人群的治疗有效率分别为77%和84%[12]，他达拉非按需治疗的推荐剂量为10、20 mg，其对一般ED人群的治疗有效率分别为67%和81%[13]，伐地那非治疗的推荐剂量为10、20 mg，其对一般ED人群的治疗有效率分别为76%和80%[14]，治疗过程中可根据疗效与不良反应调整剂量。规律治疗是另一种可供选择的方式。小样本的临床研究显示每日连续服用西地那非50 mg，4周可改善海绵体动脉血流及血管内皮功能，且停药后血管内皮功能仍有改善[15-16]。研究发现心血管风险升高的ED患者隔天1次服用20 mg他达拉非，4周后血管内皮功能有显著改善，且停药2周后效果仍持续[17]。也有研究发现2次/d服用伐地那非10 mg，连续6月后，可改善糖尿病ED患者的勃起功能及血管内皮功能[18]。西地那非与伐地那非两种药物半衰期较短，规律治疗是否较按需治疗更有优势，仍需更多的循证医学证据。他达拉非具有半衰期长（17.5 h）及有效浓度可维持36 h的特点，小剂量每日服用已广泛应用于临床。他达拉非每日剂量为2.5～5 mg /d，也已被FDA批准用于治疗BPH症状[19]。

迄今为止，还没有多中心双盲或三盲的研究比较上述3种PDE5抑制剂的疗效。治疗时应让患者了解各种PDE5抑制剂的药物特点和可能出现的副作用，特别是它们不会立即引起勃起，需要在性刺激的情况下才会引起勃起的事实。部分患者，特别是糖尿病合并ED或根治性前列腺切除术的ED患者对这些药物反应不佳。严重的内皮功能障碍和海绵体神经损伤是主要原因[20-21]。由于PDE5抑制剂的作用依赖于内源性NO形成，如果内源性生物可利用的NO由于严重的内皮功能障碍或神经损伤而不足，则PDE5抑制剂可能不足以将cGMP的水平提高到必要阈值以上。此外，PDE5抑制剂不能逆转与ED相关的潜在血管或神经功能障碍。由于全身性血管舒张和严重低血压的风险，PDE5抑制剂禁止与硝酸盐联用[22]。

2 雄激素治疗

如同人体中大多数其他器官系统一样，功能的改变和减退是衰老过程的正常结果。内分泌系统也是如此，特别是睾丸产生睾酮的水平。睾酮的减少会伴随而来阴茎勃起功能障碍，也会导致阴茎血流供应的减少。除此之外，心血管疾病风险的增加、肌肉萎缩、骨密度和性欲降低，所有这些因素都与睾酮代谢相互作用[9]。雄激素通过四种主要机制在维持勃起功能方面发挥关键作用：NO合酶释放受损；PDE5表达和活性改变；海绵体神经功能受损；阴茎静脉闭塞性疾病[23]。雄激素对海绵体中平滑肌组织的功能具有显着影响[24]。研究表明睾酮和ED之间有密切的关系，并且表明睾酮治疗对于越来越多的受影响的男性而言可能是有价值的选择。

睾酮水平较低的ED患者，雄激素治疗，也称睾酮替代疗法能改善对PDE5 抑制剂无反应患者的勃起功能，与PDE5抑制剂合用可能有协同效应[9]。雄激素补充治疗睾酮水平低下的ED患者是安全的，但对于前列腺癌或前列腺癌转移患者，补充雄激素可能会刺激癌症进展[25]，可以视为禁忌症。对于睾酮水平正常的ED患者，睾酮补充治疗是否能改善勃起功能则缺乏循证医学证据。目前用于ED治疗的口服雄激素主要是十一酸睾酮胶囊。

3 靶向药物疗法

虽然口服PDE5抑制剂在大多数患者中有效，但对于所有患有ED的男性来说，它们并不令人满意。因此，随着阿扑吗啡批准上市用于治疗ED,许多研究人员试图开发靶向中枢和外周不同分子途径的新药。靶向中枢的包括黑皮质素受体激动剂、多巴胺能激动剂、克拉维酸（紫杉醇）。靶向外周的包括可溶性鸟苷酸环化酶活化剂和Rho激酶抑制剂。

黑皮质素受体激动剂，例如黑素Ⅱ和布美诺肽，其有效性和安全性已经在ED患者中得到了评估。20名男性心理性或器质性性ED患者中。在没有性刺激的情况下，黑素Ⅱ导致其中17人阴茎勃起。然而，相当一部分患者出现严重恶心和打哈欠等不良事件[26]。布美诺肽鼻内给药可显着改善糖尿病ED患者或PDE5抑制剂治疗无效患者的勃起功能[27-28]。常见的副作用包括恶心和高血压。此外，完成了两项针对女性性功能障碍的布美诺肽III期临床试验[29]。

ABT-724是一种选择性多巴胺D4受体激动剂，它在大鼠模型中成功诱导阴茎勃起，且没有如恶心和呕吐的副作用[30]。ABT-670相较于ABT-724具有相似的功效，而且有更好的口服生物利用度[31]。但是目前仍没有进一步的临床试验。克拉维酸通过血清素和多巴胺的上调而在大鼠模型中诱导阴茎勃起，刺激雄性大鼠的性行为[32]。在一项IIb期临床试验中，克拉维酸改善了39例ED患者的勃起功能[33]。可溶性鸟苷酸环化酶活化剂和Rho激酶抑制剂已在部分临床试验中被证明可以改善勃起功能[34]。但是，由于没有显示出优于目前可用的口服PDE5抑制剂，所以停止了进一步的研发。

4 蛋白质疗法和基因疗法

在ED患者的阴茎组织中的蛋白质可能无法正常起作用，替换这些蛋白质可能会改善勃起功能。蛋白质疗法和基因疗法旨在提供正确的蛋白质或生成蛋白质及相关产物的基因。实验动物模型证明勃起功能有所改善。人体研究也部分证实了这种疗法的成功。

4.1 血管生成

阴茎是血管丰富的器官，血管内皮在调节血管张力和血流中起重要作用。ED通常与内皮功能障碍直接相关。内皮细胞可以通过各种机制受损，其中大多数机制会导致组织的氧化应激。导致氧化应激的许多原因与导致高血压、糖尿病和血脂异常的生活方式有关。内皮细胞功能障碍导致内皮依赖性血管舒张的减少以及白细胞对内皮的粘附增加。内皮细胞损伤导致各种后遗症，包括ED，其他类型的血管收缩，动脉粥样硬化和血栓形成[35]。因此，重新建立阴茎组织的微血管系统，恢复内皮功能，可能可以治疗ED的潜在病症并克服口服PDE5抑制剂的局限性。

许多研究者报道了血管生长因子治疗的临床前期结果，如血管内皮生长因子（VEGF），血管生成素和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）。在这些生长因子中，VEGF和血管生成素是最广泛研究的。在去势、糖尿病、血脂异常诱发的ED的大鼠模型中，VEGF基因或蛋白质在海绵体内的作用可以诱导恢复勃起功能[36-38]。然而，据报道VEGF的不受调节的连续表达会促进形成渗漏、不稳定的血管，与内皮细胞衍生的壁血管肿瘤的形成有关[39]。这限制了VEGF的治疗效用。相比之下，血管生成素-1在可以促进生成无渗漏、稳定、成熟的血管。血管生成素-1和血管内皮生长因子的共同作用增强了侧支血管形成[40]。在糖尿病性ED和血脂异常ED的小鼠模型中，单次注射腺病毒介导的合成血管生成素-1基因，或两次注射海绵体内合成的血管生成素-1蛋白，都可以显着增加海绵体内皮细胞增殖，内皮型一氧化氮合酶磷酸化和cGMP表达，并降低活性氧的产生[41-42]。尽管前景值得关注，大规模生产重组蛋白的困难限制了该疗法的临床应用。

血管生成素-4也在血管生成中起关键作用。血管生成素-4蛋白的局部递送通过海绵状血管内皮细胞的再生和活性氧生成的抑制来恢复内源性Akt-NO途径，诱导糖尿病小鼠勃起功能的恢复。然而，血管生成素-4蛋白对糖尿病引起的ED的作用有限，勃起功能恢复的持续时间相对较短[43]。apelin是G蛋白偶联的APJ受体的内源性配体，apelin及其受体在许多组织中表达，特别是在心脏和血管的内皮细胞和平滑肌细胞中。在将apelin蛋白注射入高胆固醇血症小鼠的阴茎1 d后观察到勃起功能显着恢复，此后勃起功能返回到基线值。apelin对勃起功能的有益作用主要是通过内皮型一氧化氮合酶的活化和减少活性氧介导的内皮细胞凋亡。需要进一步的研究来开发APJ的有效激动剂并确定apelin重复给药对勃起功能长期恢复的作用[44]。

bFGF是一种血管生长因子，皮下注射水凝胶介导的bFGF蛋白可以预防平滑肌萎缩，增加海绵体内压力，并改善海绵体神经损伤小鼠的勃起功能[45]。肾上腺髓质素是一种具有血管舒张和促血管生成活性的血管活性肽。腺病毒介导的肾上腺髓质素的过度表达显着改善了糖尿病大鼠的勃起功能。其过度表达与血管内皮细胞钙粘蛋白和内皮型一氧化氮合酶的表达增加有关[46]。

4.2 神经再生

海绵体神经是阴茎主要的自主神经支配。海绵体神经损伤（CNI）是根治性前列腺切除术后ED的主要原因，即使采取双侧保留神经的方法和微创方法治疗，一定程度的CNI是不可避免的。海绵体神经功能的恢复是神经保护或再生策略的最终目标。神经营养因子是诱导神经元存活，发育和功能的蛋白质家族。神经营养因子包括脑源性神经生长因子，神经营养因子-3，神经胶质细胞系源性神经营养因子和生长分化因子-5在ED动物模型中通过海绵体神经的保护或神经再生部分恢复了勃起功能[47-49]。SHH在神经损伤后在成熟细胞中上调，因此被认为在神经再生中起作用。人研究将SHH应用于具有ED的CNI动物模型，并证实了海绵体神经再生，抑制了阴茎凋亡并改善了勃起功能[50]。随访研究证实了这些结果，并采用了纳米纤维水凝胶递送等技术延长海绵体神经中SHH的存活时间[51]。

神经损伤诱导蛋白1与胚胎发育期间的血管退化有关，具有炎症特性，已被作为与CNI有关的ED的治疗靶点被研究。用单克隆中和抗体局部治疗可增加阴茎nNOS，减少内皮细胞凋亡，促进海绵体内皮细胞增殖并诱导阴茎内内皮型一氧化氮合酶和PKB的磷酸化。与对照组相比，高剂量单克隆中和抗体治疗的CNI大鼠模型的勃起功能恢复率高于90%[52]。在糖尿病大鼠ED模型中，神经损伤诱导蛋白1阻断促进阴茎血管生成和神经再生，最终导致勃起功能恢复。神经胶质细胞生长因子-2是神经生长因子家族成员之一，具有神经保护和神经修复特性。神经胶质细胞生长因子-2在海绵体神经损伤引起的勃起功能障碍的大鼠模型中具有神经保护作用，同时保留无髓鞘的海绵体神经纤维[53]。免疫因子FK506对阴茎神经具有神经保护作用。在广泛海绵体神经损伤后可保留海绵状组织结构并促进大鼠勃起功能恢复[54]。

4.3 抗纤维化

促纤维化因子增加、海绵体纤维化是ED的重要原因之一。在各种促纤维化因子中，转化生长因子-β（TGF-β）被认为是最相关的成纤维细胞因子。TGF-β1在STZ诱导的糖尿病大鼠的阴茎海绵体组织和CNI小鼠中表达上调。TGF-β1通过激活受体相关的Smads（包括Smad2和Smad3）来介导其纤维化作用[55]。TGF-β-Smad2 / 3信号通路介导平滑肌细胞凋亡并抑制内皮细胞增殖[56]。血管紧张素II活化可能通过Smad和非Smad途径参与海绵体细胞凋亡和纤维化从而导致ED。单独使用血管紧张素II拮抗剂能改善组织学和分子变化，但其对勃起反应的影响较小[57]。抑制TGF-β信号传导途径可能对ED的治疗更有效。

Smad7是一种抑制性Smad蛋白，通过负反馈环路阻断TGF-β1信号传导。最近报道，将编码Smad7基因的腺病毒单次注射到CNI小鼠的阴茎海绵体中显着降低了细胞外基质蛋白（包括PAI-1，纤连蛋白，I型胶原和IV型胶原）的产生并诱导内皮一氧化氮合酶磷酸化，通过增强内皮细胞功能和抗纤维化作用成功地恢复了勃起功能[58]。P144是一种TGF-β1拮抗剂肽，与西地那非协同作用，可以通过改善糖尿病大鼠的海绵体纤维化来增强勃起反应[59]。

5 结论

PDE5抑制剂和雄激素治疗ED是目前临床上常见的药物治疗方法，但是部分患者对这些药物反应不佳。因此，需要克服当前可用的口服药物缺陷的新治疗策略。许多靶向中枢通路（黑皮质素或多巴胺受体激动剂）或外周途径（可溶性鸟苷酸环化酶激活剂，Rho激酶抑制剂）的临床试验显示，其功效、副作用相对于PDE5抑制剂缺乏明显优势，未得到进一步的临床应用。

各种以蛋白质疗法、基因疗法为主的临床前研究已经表明通过再生海绵状血管内皮细胞和海绵体神经、抑制海绵体纤维化有希望恢复勃起功能。但因为蛋白质工程和基因工程的复杂性，目前还没有进入临床试验阶段。ED具有多种致病机制，多种药物治疗策略的联合应用可能可以获得更好的结果。目前的临床前数据也为将来更有效的药物疗法打下了坚实的基础。

参考文献：

[1]Feldman H,Goldstein I,Hatzichristou DG,et al.Impotence and its medical and psychosocial correlates:results of the massachusetts male aging study[J].J Urol,1994,(151): 54-61.

[2]Zhang X,Yang B,Li N,et al.Risk factors for erectile dysfunction in Chinese adult males[J].J Sex Med,2017,14(10): 1201-8.

[3]Araujo AB, Esche GR, Kupelian V, et al. Prevalence of symptomatic androgen deficiency in men[J].J Clin Endocrinol Metab,2007,120(92): 1245-2007.

[4]Klein R,Klein BE,Ke LE,et al.Prevalence of self-reported erectile dysfunction in People with long-term IDDM[J].Diabetes Care,1996,36(19): 135-41.

[5]Larsen SH, Wagner G, Heitmann BL. Sexual function and obesity[J].Int J Obes,2007,45(31): 1189-98.

[6]Mcwaine DE,Procci WR.Drug-induced sexual dysfunction[J].Med Toxicol Adverse Drug Exp,1988,14(3): 289-306.

[7]Kumar RJ ,Barqawi A ,Crawford ED.Adverse events associated with hormonal therapy for prostate cancer[J].Rev Urol,2005,7(5): 37-43.

[8]Aksam A,Yassin A ,Saad F.Testosterone and erectile dysfunction[J].J Andrology,2008,29(4): 16-23.

[9]Yassin A,Saad F.erectile D.Testosterone and erectile dysfunction[J].J Androl,2008,29(6): 593-604.

[10]Martínez-Jabaloyas JM,Gil-Salom M, Villamón-Fort R, et al.Prognostic factors for response to sildenafil in patients with erectile dysfunction[J].Eur Urol,2001,(40): 641-6.

[11]Tom F,Lue M.Physiology of penile erection and pathophysiology of erectile dysfunction[C]//Campbell-walsh urology 10th,2011:688-720.

[12]Morgentaler A,Goldstein I.Oral sildenafil in the treatment of erectile dysfunction[J].J Sex Med,2014,11(2,SI): 117-9.

[13]Curran M.Tadalafil[J].Drugs,2003,63(11): 2203-12.

[14]Keating GM,Scott LJ.Vardenafil - A review of its use in erectile dysfunction[J].Drugs,2003,63(23): 2673-703.

[15]Mathers MJ,Klotz T,Brandt AS,et al.Long-term treatment of erectile dysfunction with a phosphodiesterase-5 inhibitor and dose optimization based on nocturnal penile tumescence[J].BJU Int,2008,101(9): 1129-34.

[16]Vardi Y,Appel B,Ofer Y,et al.Effect of chronic sildenafil treatment on penile endothelial function: a randomized,doubleblind,placebo controlled study[J].J Urol,2009,182(6): 2850-5.

[17]Rosano GM,Aversa A,Vitale C,et al.Chronic treatment with tadalafil improves endothelial function in men with increased cardiovascular risk[J].Eur Urol,2005,47(2): 214-20; discussion 220-2.

[18]Santi D, Granata AR, Guidi AA, et al. Six months of daily treatment with vardenafil improves parameters of endothelial inflammation and of hypogonadism in male patients with type 2 diabetes and erectile dysfunction: a randomized, double-blind,prospective trial[J].Eur J Endocrinol,2016,174(4): 513-22.

[19]Wrishko R,Sorsaburu S,Wong DA,et al.Safety,efficacy,and pharmacokinetic overview of Low-Dose daily administration of tadalafil[J].J Sex Med,2009,6(7): 2039-48.

[20]Musicki B,Burnett AL.Endothelial dysfunction in diabetic erectile dysfunction[J].Int J Impot Res,2007,31(19): 129-38.

[21]Angulo J, González-Corrochano R, Cuevas P, et al. Diabetes exacerbates the functional deficiency of NO/cGMP pathway associated with erectile dysfunction in human corpus cavernosum and penile arteries[J].J Sex Med,2010,7(2 Pt 1): 758-68.

[22]Webb DJ, Gj M, Wulff M. Sildenafil citrate potentiates the hypotensive effects of nitric oxide donor drugs in male patients with stable angina[J].J Am Coll Cardiol,2000,(1): 701-5.

[23]Androgens KM.Androgens and erectile function:a case for early androgen use in postprostatectomy hypogonadal men[J].J Sex Med,2009,23(5): 1743-6109.

[24]Aversa A,Isidori AM,De Martino MU,et al.Androgens and penile erection: evidence for a direct relationship between free testosterone and cavernous vasodilation in men with erectile dysfunction[J].Clin Endocrinol (Oxf),2000,53(4): 517-22.

[25]Bassil N, Alkaade S, Morley JE. The benefits and risks of testosterone replacement therapy: a review[J]. Ther Clin Risk Manag,2009,5(3): 427-48.

[26]Wessells H,Levine N,Hadley ME,et al.Melanocortin receptor agonists,penile erection,and sexual motivation:human studies with Melanotan II[J].Int J Impot Res,2000,(12): S74-9.

[27]Hellstrom W,Gittelman M,Zinner N,et al.Randomized,doubleblind,placebo-controlled,at-home study to evaluate the efficacy and safety of intranasal bremelanotide in men with erectile dysfunction with and without diabetes mellitus[J].J Sex Med,2006,28(3):117-25.

[28]Safarinejad MR,Hosseini SY.Salvage of sildenafil failures with bremelanotide: A randomized,double-blind,placebo controlled study[J].J Urol,2008,179(3): 1066-71.

[29]Both S.Recent developments in Psychopharmaceutical approaches to treating female sexual interest and arousal disorder[J].Curr Sex Health Rep,2017,9(4):192-9.

[30]Cowart M,Latshaw SP,Bhatia P,et al.Discovery of 2-(4-pyridin-2-ylpiperazin-1-ylmethyl)-1H-benzimidazole (ABT-724),a dopaminergic agent with a novel mode of action for the potential treatment of erectile dysfunction[J].J Med Chem,2004,47(15):3853-64.

[31]Patel MV,Kolasa T,Mortell KA,et al.Discovery of 3-methyl-N-(1-oxy-3 `,4 `,5 `,6 `-tetrahydro-2 ` H-{[}2,4 `-bipyridine]-1 `-ylmethyl)benzamide (ABT-670),an orally bioavailable dopamine D-4 agonist for the treatment of erectile dysfunction[J].J Med Chem,2006,49(25): 7450-65.

[32]Chan JS,Kim DJ,Ahn CH,et al.Clavulanic acid stimulates sexual behaviour in male rats[J].Eur J Pharmacol,2009,(609): 69-73.

[33]Pharmaceuticals R, Inc. Efficacy study of RX-10100 to treat erectile dysfunction(ED)[EB/OL].[2009-05-05].Clinical Trials gov identifier:NCT00693056.

[34]Clinicaltrails Gov.Clinical proof-of-concept study for the combination BAY60-4552/Vardenafil for the treatment of erectile Dysfuntion not sufficiently responsive to standard therapy with PDE5 inhibitors[EB/OL].[2014-11-04].Clinical Trails gov Identifier:NCT01168817.

[35]Feldman H,Johannes CB,Derby CA,et al.Erectile dysfunction and coronary risk factors:prospective results from the Massachusetts male aging study[J].Prev Med,2000,43(30): 328-38.

[36]Rogers RS,Graziottin T,Lin CS,et al.Intracavernosal vascular endothelial growth factor (VEGF) injection and adeno-associated virus-mediated VEGF gene therapy prevent and reverse venogenic erectile dysfunction in rats[J].Int J Impot Res,2003,15(1): 26-37.

[37]Dall'era JE,Meacham RB,Mills JN,et al.Vascular endothelial growth factor (VEGF) gene therapy using a nonviral gene delivery system improves erectile function in a diabetic rat model[J].Int J Impot Res,2008,20(3): 307-14.

[38]Gholami SS,Rogers R,Chang J,et al.The effect of vascular endothelial growth factor and adeno-associated virus mediated brain derived neurotrophic factor on neurogenic and vasculogenic erectile dysfunction induced by hyperlipidemia[J].J Urol,2003,169(5): 1577-81.

[39]Lee RJ,Springer ML,Blanco-Bose WE,et al.VEGF gene delivery to myocardium:deleterious effects of unregulated expression[J].Circulation,2000,(102): 898-901.

[40]Chae JK,Kim I,Lim ST,et al.Coadministration of angiopoietin-1 and vascular endothelial growth factor enhances collateral vascularization[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol,2000,20(12):2573-8.

[41]Ryu JK, Kim WJ, Koh YJ, et al. Designed angiopoietin-1 variant,COMP-angiopoietin-1,rescues erectile function through healthy cavernous angiogenesis in a hypercholesterolemic mouse[J].Sci Rep,2015,12(5): 922-8.

[42]Jin HR,Kim WJ,Song JS,et al. Intracavernous delivery of synthetic angiopoietin-1 protein as a novel therapeutic strategy for erectile dysfunction in the type II diabetic db/db mouse[J].J Sex Med,2010,7(11): 3635-46.

[43]Kwon MH,Ryu JK,Kim WJ,et al.Effect of intracavernous administration of angiopoietin-4 on erectile function in the Streptozotocin-Induced diabetic mouse[J]. J Sex Med, 2013,10(12): 2912-27.

[44]Kwon MH,Tuvshintur B,Kim WJ,et al.Expression of the Apelin-APJ pathway and effects on erectile function in a mouse model of vasculogenic erectile dysfunction[J].J Sex Med,2013,10(12):2928-41.

[45]Bae JH, Shrestha KR, Park YH, et al. Comparison between subcutaneous injection of basic fibroblast growth Factor-Hydrogel and intracavernous injection of adipose-derived stem cells in a rat model of cavernous nerve injury[J].Urology,2014,84(5): e1-7.

[46]Nishimatsu H, Suzuki E, Kumano S, et al. Adrenomedullin mediates adipose tissue-derived stem cell-induced restoration of erectile function in diabetic rats[J].J Sex Med,2012,9(1): 482-93.

[47]Bennett NE,Kim JH,Wolfe DP,et al.Improvement in erectile dysfunction after neurotrophic factor gene therapy in diabetic rats[J].J Urol,2005,17(3): 1820-4.

[48]Chen KC,Minor TX,Rahman NU,et al.The additive erectile recovery effect of brain-derived neurotrophic factor combined with vascular endothelial growth factor in a rat model of neurogenic impotence[J].BJU Int,2005,(95): 1077-80.

[49]Bakircioglu ME,Lin CS,Fan P,et al.The effect of adenoassociated virus mediated brain derived neurotrophic factor in an animal model of neurogenic impotence[J].J Urol,2001,165(05):66301-2.

[50]Angeloni NL,Bond CW, Tang Y,et al.Regeneration of the cavernous nerve by Sonic hedgehog using aligned peptide amphiphile nanofibers[J].Biomaterials,2010,(32): 1091-101.

[51]Choe S,Veliceasa D,Bond CW,et al.Sonic hedgehog delivery from self-assembled nanofiber hydrogels reduces the fibrotic response in models of erectile dysfunction[J].Acta Biomater,2016,32(32): 89-99.

[52]Yin GN,Choi MJ,Kim WJ,et al.Inhibition of ninjurin 1 restores erectile function through dual angiogenic and neurotrophic effects in the diabetic mouse[C]//Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,2014: E2731-40.

[53]Burnett AL,Sezen SF,Hoke A,et al.GGF2 is neuroprotective in a rat model of cavernous nerve Injury-Induced erectile dysfunction[J].J Sex Med,2015,12(4): 897-905.

[54]Burnett AL,Becker RE.Immunophilin ligands promote penile neurogenesis and erection recovery after cavernous nerve injury[J].J Urol,2004,17(1): 495-500.

[55]Massagué J,Chen YG.Controlling TGF-beta signaling[J].Genes Dev,2000,(14): 627-44.

[56]Jin HR,Chung YG,Kim WJ,et al.A mouse model of cavernous nerve Injury-Induced erectile dysfunction: functional and morphological characterization of the corpus cavernosum[J].J Sex Med,2010,7(10): 3351-64.

[57]Li WJ,Xu MX,Gu M,et al.Losartan preserves erectile function by suppression of apoptosis and fibrosis of corpus cavernosum and corporal Veno-Occlusive dysfunction in diabetic rats[J]. Cell Physiol Biochem,2017,42(1): 333-45.

[58]Song KM, Chung JS, Choi MJ, et al. Effectiveness of intracavernous delivery of adenovirus encoding Smad7 gene on erectile function in a mouse model of cavernous nerve injury[J].J Sex Med,2014,11(1): 51-63.

[59]Li WJ,Wang H,Zhou J,et al.P144,a TGF-beta 1 antagonist peptide,synergizes with sildenafil and enhances erectile response via amelioration of cavernosal fibrosis in diabetic rats[J].J Sex Med,2013,10(12): 2942-51.