KiSS1蛋白和MMP-2在宫颈癌组织中的表达及诊断价值

李 颖,王 瑚

(锦州市中心医院 妇产科,辽宁 锦州121000)

宫颈癌(ICC)是女性常见的生殖道恶性肿瘤，随着人们生活方式的改变及人口的高龄化，发病率明显上升，且日趋年轻化。早期ICC无明显症状，术后易复发和转移，早期诊断能够明显提高治愈率[1]，降低死亡率。临床亟待寻找敏感性高、特异性强的检测方法，以早期诊断，提高治愈率，提高患者的生活质量。本文检测宫颈组织(NCE)、宫颈上皮内瘤变(CIN)及ICC组织中的KiSS1和MMP-2的表达，以便指导临床诊疗。

1 材料与方法

1.1标本选取2016年3月-6月我院治疗存档的宫颈组织蜡块78例，宫颈癌38例，平均年龄(45.61±4.27)岁，根据2003年FIGO标准，Ia期14例，Ib期12例，Ⅱ期12例；22例深层浸润，16例浅层浸润；淋巴转移8例，无淋巴转移30例；29例分化为中、低级，9例分化为高级。同期22例行切除术CIN患者，平均年龄(44.73±4.55)岁。同期行子宫肌瘤切除术的NCE患者18例，平均年龄(45.39±4.53)岁。

1.2免疫组化试剂[2]南京德泰生物科技公司生产的MMP-2多克隆抗体、KiSS1蛋白兔抗人单克隆抗体，武汉默沙克生物科技有限公司生产的SP试剂盒。

1.3方法采用免疫组化SP法,宫颈组织的存档蜡块78例，38例ICC、22例CIN，18例NCE。石蜡包埋，每隔100 μm切取4 μm切片2张，分别用抗KiSS1蛋白抗体及抗MMP-2抗体染色，一抗阴性对照为PBS液。

1.4结果判定[3]由两名病理科医师采用盲法观察。(A)染色强度评分：强染色为3分，中等染色为2分，无色为0分，弱染色为1分；(B)染色阳性细胞比例评分：<5%为0分，5%-25%为1分，26%-50%为2分，>50%为3分；阳性表达为总分(A+B)≥3分，阴性表达<3分。

1.5统计学分析应用SPSS11.0软件分析，分析KiSS1蛋白和MMP-2在宫颈癌组织中的诊断价值，均数比较采用t检验，采用Fisher精确检验，统计阳性率，差异有统计学意义时P<0.05。

2 结果

2.1KiSS1、MMP-2表达KiSS1在NCE、CIN、ICC的阳性表达率依次降低(86.36%vs77.78%vs44.74%)，差异具有统计学意义(P<0.05)。MMP-2在NCE、CIN、ICC的阳性表达率依次升高(16.67%vs31.82%vs63.16%)，差异具有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.2KiSS1、MMP-2与ICC病理相关性KiSS1蛋白与MMP-2的阳性表达率与ICC浸润深度、组织学分级、临床分期密切相关(P<0.05)。见表2。

表1 KiSS1蛋白和MMP-2在NCE、CIN及ICC中的表达

表2 ICC中二者的表达与病理相关性

3 讨论

KiSS1属于单纤丝蛋白，与GPR54受体结合后降低基质金属蛋白酶活性，上调钙离子水平，抑制肿瘤细胞的趋化、增殖、转移[4]。KiSS1在正常组织中高表达，在癌细胞中往往表达过低或缺失，临床较常用的检测微转移非侵入性的标记物，对于早期诊断ICC具有重要临床价值。本研究中KiSS1蛋白在ICC组织中的阳性率44.74%，明显低于其余二种组织的阳性表达，提示可能是ICC发生初期，随着疾病的恶化程度加大下降更加明显。ICC进展中的浸润深度、组织学分级及临床分期与其表达水平具有相关性，随着病情程度加深表达下降[5]。表明KiSS1蛋白的低表达发生在癌变早期阶段，其低水平表达促进了ICC的发生、发展、转移，发挥类似癌基因样作用，提示可将KiSS1蛋白的表达情况作为ICC的临床分期指标，并用于判断预后[6]。

MMP-2是一种非糖化的明胶酶，癌细胞要穿越基底膜侵入周围组织，MMP-2在机体内降解细胞外基质(ECM)中Ⅳ型胶原，在肿瘤的侵润、转移中作用重大[7]。在ICC的发生发展过程中，促进癌细胞大量增殖，导致肿瘤发生，最终患者死亡，MMP-2高表达能够促进肿瘤形成新生血管，降解ECM速度加快，癌细胞顺利穿越基底膜向远处侵袭、转移[8]。MMP-2在各种肿瘤中的异常表达及其分子机制逐渐被阐释，肿瘤的侵袭和转移需要蛋白酶类降解ECM，破坏基底膜的完整性，提供侵袭“通道”[9]。MMP-2表达率可以区分正常细胞和肿瘤细胞，评估癌细胞增殖、侵袭程度，已作为一种特异的肿瘤标志物应用于临床，可以作为判定癌浸润及转移的重要指标。临床治疗采取对MMP-2的降解功能进行阻断，使其减少对ECM的降解，抑制肿瘤穿越基底膜进行转移[10]。

本研究中发现ICC组织中MMP-2的阳性率明显高其它组织，随着临床分期、肿瘤分级、浸润深度的加深而增加，这表明MMP-2参与了恶性肿瘤的生长和转移[11]，MMP-2的高表达促进了恶性肿瘤的发生进展，其还预示着患者预后不良[12]，检测MMP-2的表达水平可做为高风险肿瘤的标志物，有效评估患者的预后[13]。

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