EDTA依赖性血小板假性减少的分析与处理探讨

杨婷

【摘要】目的：分析EDTA依赖性血小板假性减少的原因，总结处理经验。方法：回顾性分析93198例患者，其中56例确诊为EDTA依赖性PTCP。对诊断为EDTA-PTCP的患者重新抽取外周血，分别采用EDTA抗凝、柠檬酸钠抗凝，在采血后重复计数。并检测ALT、AST、ALP、UA等指标，进行相关性分析。结果：EDTA、柠檬酸钠抗凝检测，0、15、30、60、120、18 0min血小板计数呈逐渐下降趋势，下降速度减缓，最后趋于平稳。15、30、60、120、180min，EDTA抗凝血小板计数低于柠檬酸钠抗凝患者。EDTA-PTCP的患者采用EDTA抗凝后，镜下有明显的聚集，随着时间的推移，可见的聚集明显增多。男性的EDTA-PTCP检出率高于女性，不同年龄EDTA-PTCP检出率存在差异（P<0.05）。相关性分析显示，PLT与ALT、AST、ALP、UA存在相关性（r=0.451、0.530、0.384、0.508，P

【关键词】血小板假性减少;EDTA抗凝剂;检验质量管理

血小板检测被广泛用于血栓性疾病、血液病等疾病的诊断和疗效评估。传统的血小板手工计数法己被分析仪代替，仪器检测具有快速、准确、随机误差小、测试项目多等优点。但是仪器检测常会出现假性血小板减少（PTCP）的现象。导致PTCP发生的影响因素较多，包括EDTA-K2、冷凝集素、卫星现象、药物以及采血操作不当等[1]。本文采用实验研究和回顾性分析相结合的方法，分析在2016年1月～2017年12月期间诊断为EDTA依赖性血小板假性减少的56例患者，讨论EDTA对血小板计数的影响，并总结处理对策。

1 材料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2016年1月～2017年12月期间93198例门诊、住院患者，其中56例确诊为EDTA依赖性PTCP，男性40例、女性16例，年龄分布在24～71岁，平均年龄（50.3±8.4）岁。

1.2 仪器与试剂

主要包括贝克曼LH750全自动血细胞分析仪、日立7600全自动生化分析仪、奥林巴斯显微镜、柠檬酸钠抗凝管与EDTA-K2抗凝管，所有试剂、校准品、质控品等均为原装配套试剂。

1.3 方法

对诊断为EDTA-PTCP的患者重新抽取外周血，分別采用EDTA和柠檬酸钠抗凝。分别在采血后O、15、30、60、120、180min重复计数，同时进行手工瑞氏染色血涂片检查，显微镜下观察是否出现聚集，记录未校正以及校正后的指标。

对于EDTA-PTCP的患者，同时进行ALT、AST、ALP、UA等常规生化检验，并进行相关性分析。

1.4 统计学处理

采用SPSS20.0软件进行统计学分析，血小板计数水平不服从正态分布，采用中位数与四分位距M（P25-P75）表示，非参数检验。性别比、不同年龄EDTA-PTCP检出率采用X2检验比较，相关性分析采用Spearman相关性分析，以P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不同抗凝方法不同时间血小板计数以及显微镜下表现

EDTA、柠檬酸钠抗凝血小板计数，Omin检测差异无统计学意义（P>0.05）。15、30、60、120、180min血小板计数呈逐渐下降趋势，下降速度减缓，最后趋于平稳。15、30、60、120、180min，EDTA抗凝血小板计数EDTA低于柠檬酸钠抗凝患者，差异具有统计学意义（P<0.05）（见表1）。EDTA-PTCP的患者采用EDTA抗凝后，镜下有明显的聚集，随着时间的推移，可见的聚集明显增多，至120min后几乎覆盖在整个显微镜视野内。

2.2 因素分析

男性的EDTA-PTCP检出率高于女性，差异具有统计学意义（P<0.05），不同年龄EDTA-PTCP检出率差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.3 相关性分析

相关性分析显示，PLT与ALT、AST、ALP、UA存在相关性（r=0.451、0.530、0.3 84、0.508，P<0.05）。

3 讨论

本次研究中，2016-2017年的ED TA-PTCP检出率约为0.06%，处于正常水平，与其它文献报道的结果基本相符.发生率约为0.05%～0.2%不等[2-3]。本次研究显示，EDTA-PTCP采用柠檬酸钠抗凝可以有效的避免PLT因EDTA作用下降。同时研究显示随着时间的推移，两种抗凝结果都会显著下降，所以无论采用何种抗凝，都提倡及早送检，避免因等待时间过长，导致PLT假性偏低。在实际检测过程中，PLT偏低与送检时间过长等原因有关，可能会掩盖EDTA-PTCP，实际上EDTA-PTCP高于统计的结果。

相关性分析显示，PLT与ALT、AST、ALP、UA存在相关性（r=0.451、0.530、0.3 84、0.508，P<0.05）， 反 映EDTA-PTCP可能与肝功能异常、高尿酸有关。这可能与机体在病理状态下产生导致EDTA-PTCP的特殊蛋白、纤维蛋白原受体、糖蛋白（glycoprotein，GP）a II b、β IIIa有关。肝功能的变化对PLT活性影响较大，肝功能受损，患者更容易出现胆汁淤积，诱导肝脏内的P选择素介导血小板聚集与凝集。血尿酸与心血管疾病、糖尿病关系密切，而这两种疾病均与血小板假性降低有关，可能与心血管疾病、糖尿病所致的炎症引起血小板表面蛋白变化有关。

有报道显示[4]，在某些骨髓增殖性疾病疾病中，异常的功能的PLT在EDTA存在情况下也更容易出现血小板聚集。血小板凝集通常发生在血标本与EDTA抗凝剂接触的几分钟之内，血液分析仪难以对血凝块进行分类鉴别，仪器会进行报警。但是在实践过程中，有部分血凝并不明显，报警可能并不准确，白细胞直方因为血小扳凝集团生成一个特定的信号，但这种信号并不完全准确，有部分患者EDTA-PTCP被忽视。

4 小结

EDTA依赖性血小板假性减少多见于50岁以上男性;对于血小板偏低的患者，首先血涂片显微镜下镜检，发现凝集者需要采用柠檬酸钠抗凝重测，以判断是否为EDTA依赖性PTCP，并采用多种方法进行纠正。

参考文献

[1]杨江民.XS-5001全自动血细胞分析仪测定血小板假性减少原因分析及纠正方法探讨[J].青海医药杂志，2017，47 （11）： 41-42.

[2]郭谦，王晓健，曹荣，等.对EDTA-K2依赖性假性血小板减少不同检测方法结果的比较[J].山西职工医学院学报，2018，28 （01）： 17-20.

[3]罗磊，朱建锋，王蓓丽，等.震荡法在纠正EDTA依赖的假性血小板减少中的应用[J].中国临床医学，2018， 25 （01）： 100-102.

[4]余海涛。浅谈EDTA-K2依赖性假性血小板减少症对血小板计数的影响[J].医药前沿，2017，7 （06）：218-219.