牛羊布鲁氏菌病临床样品的采集与送检技术要点

袁江平 （河南省西峡县动物卫生监督所 474500）



牛羊布鲁氏菌病临床样品的采集与送检技术要点

袁江平 （河南省西峡县动物卫生监督所 474500）

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌属细菌引起牛、羊等动物和人类共患的一种传染病，属国家二类动物疫病。以妊娠动物流产和雄性动物睾丸炎为主要特征；人感染此病则表现为发热、多汗、关节疼痛等症状，俗称“懒汉病”，不仅严重影响畜牧业生产，也严重危及人民群众身体健康和公共卫生安全。切实加强兽医实验室检测对于布鲁氏菌病诊断、防止其扩散和蔓延极为重要。同时，对牛、羊养殖场实施定期疫病和免疫水平监测，是减少牛、羊布鲁氏菌病发生、流行和蔓延，降低经济损失，确保畜牧业又好又快、持续健康发展的必要手段。

牛、羊布鲁氏菌病样品的采集和送检是保证兽医实验室各项检测结果可靠性和准确性的前提和基础，兽医临床样品送检过程中的规范性也直接关系到兽医实验室各项检测结果的可靠性和准确性。下面就牛、羊布鲁氏菌病临床样品的采集、保存和送检技术要点做简要介绍：

1 采样前的准备

1.1 采样人员

采样人员应具备相关专业知识和熟练的采样技能，可正确使用采样器械；明确采样目的、样品类型和数量。

1.2 采样物品和器具

1.2.1 防护物品 一次性PE手套、乳胶手套、防护帽、护目镜、防护口罩、防护服、胶靴等。

1.2.2 采样器具 （1）血液样品：10ml一次性采血注射器、75%酒精及棉球、碘酒棉、试管架、剃毛器具等。（2）乳汁样品：10ml灭菌试管或离心管、试管架、新洁尔灭等消毒药。（3）流产胎儿及流产物：无菌镊子、剪刀、解剖刀、无菌平皿、无菌棉拭子、75%酒精及棉球、酒精灯等。

1.2.3 其他物品 采样单、签字笔、记号笔、保温箱或保温瓶、易封口样品袋、塑料包装袋、胶带、封口膜、封条、冰袋、不干胶标签等。

2 临床样品采集

2.1 全血样品的采集

自颈静脉/尾静脉(牛)采血。用注射器吸5%枸橼酸钠溶液0.5~1ml(0.1ml的枸橼酸钠溶液溶液可抗1ml血液)，注入灭菌离心管中。无菌采血5~10ml加入离心管混匀，盖紧离心管盖，做好标记。

2.2 血清样品的采集

用10ml一次性注射器自颈静脉/尾静脉(牛)无菌采血3~5ml，置无菌试管中摆成斜面，待血液充分凝固后可竖起。待血清充分析出后或离心分离血清后，用无菌注射器吸出血清注入无菌离心管中，盖紧离心管盖，做好标记。

2.3 乳汁样品的采集

取乳者手部用新洁尔灭清洗消毒，同时对被取乳动物的乳房、乳头进行消毒，并把乳房附近的毛刷湿。弃去最初挤出的乳汁，然后采乳10~20ml注入灭菌试管或离心管中，做好标记。乳汁样品不应冻结、加热或强烈震动。

2.4 流产胎儿及流产物样品的采集

取样者手部用新洁尔灭清洗消毒，无菌采集流产胎衣、绒毛膜水肿液、肝、脾、淋巴结、胎儿胃内容物等组织样品、置于无菌样品袋或平皿中，做好样品的无菌包装，做好标记。

2.5 采样单及标签的填写

逐项填写采样单、样品标签，并将采样单装入塑料包装袋中，随样品送至兽医实验室。

2.5.1 样品的标记 （1）样品采集后，应在包装袋上标明样品编号，避免不同样品混淆。（2）送检人应认真详实填写“客户送样登记表”或“样品送检单”。标明送检单位信息，如养殖场名称、送检人姓名、动物品种、日龄及数量等，还应填写清楚动物临床表现情况，如发病率、死亡率、临床表现、病理变化、免疫程序和用药情况等。将登记纸张与病料一同送至实验室。

2.5.2 采样单填写注意事项（1）联系方式应填写准 确、详尽，实验室将建立客户信息档案，以方便客户进 行回溯性追踪检测结果。（2）表格中填写的样品数量与 样品编号应与送检的样品数量和编号一致，且样品尽可 能使用唯一性编号，以防止样品混淆。（3）检测项目一 栏为送检人根据临床情况和剖检情况进行有针对性的检 测要求，兽医实验室也可根据临床情况描述或剖检情况 向客户推荐合适的检测项目。（4）表格填写完整后，可 随样品一起送至兽医实验室，也可通过电子邮件的方式 发送至兽医实验室邮箱。（5）临床剖检时，应尽量拍照 记录剖检时的组织脏器病理变化，剖检照片可发送电子 版表格至兽医实验室电子邮箱，以辅助诊断分析。

3 样品包装

（1）血清样品和乳样装于塑料离心管中，置于试管架上，装入包装袋内。（2）组织样品应分别包装，在样品袋或平皿外面贴上标签，标签注明样品名称、样品编号、采样日期等。再将各个样品放到塑料包装袋中。（3）包装袋外应标明采样人、采样日期、样品放置方向。

4 样品的保存和运输

4.1 样品的保存

（1）血液样品应置于3~7℃低温环境中冷藏保存，避免冻结失效，活组织取出后，需置于室温中进行降温，再放入冰箱或冰盒中，不要直接放入冷冻环境。

4.2 样品的运输

（1）牛、羊组织样品取样后，应尽快送到兽医实验室进行检测，短时间内不能送到实验室的样品，应放置于冷冻环境后，再加足冰块，放入保温泡沫箱中运输。（2）样品运输应提前和动物疫病诊断室沟通，采用最快的途径进行运输，防止运输时间过长造成样品腐败。（3）样品运输方法：放入泡沫保温箱中运输。视气温情况和运输时间长短加入足够冰袋，最好在24h内送至实验室，越快越好，一般不超过48h。（4）各种样品到达实验室后，若暂时不进行处理，组织样品和奶样应置于2~80C 冷藏保存，血清样品冷冻保存，避免反复冻融。

5 注意事项

采样过程中要严格落实生物安全防护措施，避免造成人员感染、样品和环境污染。

（2018–03–22）

S851.34

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1007-1733(2018)06-0056-02