广西牛羊主要呼吸道疫病的血清学调查

韩林梅 ，吴翠兰 ，李 军 ⋆，余艳娟 ，潘 艳 ，李常挺 ，陶 立 ，曾 芸 ⋆

（1.广西大学动物科学技术学院 530004；2.广西兽医研究所 广西兽医生物技术重点实验室 530001；3.桂林市水产畜牧兽医局 541199）

牛呼吸道疫病综合征是由传染性牛鼻气管炎病毒、牛支原体等病原与宿主自身应激相互作用形成的一种呼吸系统疫病[1]。该病是欧洲的三大牛病之一；在澳大利亚的中大型肉牛场，有70%以上的临床疫病和50%的死亡率是由呼吸道疫病引起[2]；美国全国牛场主协会也将牛呼吸道疫病综合征列为养牛业的头等大病。在我国，随着“北牛南育”模式的不断发展，牛呼吸道疫病综合征的发病率也在不断上升，对我国养牛业造成了严重的经济损失。

羊呼吸道疫病主要是由绵羊肺炎支原体、溶血曼氏杆菌和化脓隐秘杆菌等呼吸道条件性致病菌引起，通常是由天气、生理压力和细菌的联合作用等不利因素共同作用的结果，仅通过临床症状观察，很难确定具体的感染病原。

近年来，随着广西农业供给侧结构性改革的深入，部分地市为了实现当地畜牧业增效和养殖农民增收，出台了牛羊养殖业发展扶持政策，牛羊养殖规模得到迅速发展，但随之而来的是牛羊疫病也逐年增加，尤其是以呼吸道症状为主要特征的疫病给养殖户造成严重的经济损失。为此，本研究针对危害牛羊养殖业最严重的呼吸道疫病—传染性牛鼻气管炎，牛支原体，绵羊肺炎支原体进行血清学调查，从血清学方面调查了其感染情况，为上述疫病的防控提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品来源

样品来自广西6个牛羊养殖重点城市的牛羊血清。每个城市每年采集200份，2016年和2017年两年共采集2400份牛血清和2400份羊血清。采样的牛场均未进行传染性牛鼻气管炎和牛支原体的疫苗免疫。采样的羊场未进行羊支原体肺炎疫苗的免疫。

1.1.2 主要仪器与试剂

酶标仪SPARK 10M购自澳大利亚SPARK公司；离心机购自德国 eppendorf公司；移液器(单道、8道、12道）购自德国 eppendorf公司；4℃医用冰箱购自中科美菱；-20℃冷冻冰柜购自澳柯玛股份公司；纯水仪购自北京卓信博澳公司；传染性牛鼻气管炎病毒gE抗体检测试剂盒购自美国IDEXX公司；牛支原体肺炎抗体检测试剂盒购自加拿大Biovet公司；绵羊肺炎支原体抗体检测试剂盒购自美国KERNEL公司。

1.2 方法

分别按照各抗体检测试剂盒的使用说明书进行传染性牛鼻气管炎病毒抗体、牛支原体抗体和绵羊肺炎支原体抗体的检测，按说明书进行检测结果的判断。

2 结果

2.1 传染性牛鼻气管炎的抗体检测结果

广西6市2016年和2017年传染性牛鼻气管炎的检测结果显示，广西6个市2400份血清的传染性牛鼻气管炎抗体个体平均阳性率为36.45%（875/2400），场群平均阳性率为72.18%（96/133）。2016年和2017年广西6市牛血清的传染性牛鼻气管炎个体阳性率分别为 27.33%(328/1200)，45.58%(547/1200)；群体阳性率分别为 58.93%(33/56)，81.82%(63/77)（表 1）。经 t检验，2017 年传染性牛鼻气管炎的个体阳性率和群体阳性率均高于2016年，呈差异显著和差异极显著。

表1 2016年～2017年广西6市传染性牛鼻气管炎的检测结果

图1 2016年～2017年广西6市IBRV的感染趋势

2016年～2017年广西6个市传染性牛鼻气管炎的感染趋势，总体呈现出不同程度的上升（图1），6个市中，以BS市在的传染性牛鼻气管炎感染最为严重。对2017年和2016年的传染性牛鼻气管炎感染率进行t检验，BS市差异极显著（P＜0.01）；GG市、HZ 市、LZ 市、NN 市差异显著（P＜0.05）；LB 市差异不显著(P＞0.05)。

2.2 牛支原体的抗体检测结果

广西6市2016年～2017年牛支原体检测结果显示，个体抗体阳性率为 30.92%（742/2400），群体阳性率为 67.18%（86/128）。2016年和2017年广西6市牛支原体抗体个体阳性率分别为23.33%（280/1200），38.5%（462/1200），群体阳性率分别为 59.2%（36/61），74.62%（50/67）（表 2）。 经 t检验，2017 年牛支原体的个体阳性率和群体阳性率均高于2016年，呈差异显著和差异极显著。

表2 2016年～2017年广西6市牛支原体的抗体检测结果

2016年～2017年广西6个市牛支原体的感染趋势，总体呈现出的是不同程度的上升（图2），HZ市在6个市中的牛支原体感染最高，LZ市在6个市中的牛支原体感染最低。对2017年和2016年的牛支原体感染率进行t检验，HZ市、GG市、HZ市、LB市、NN 市差异显著（P＜0.05）,LZ 市差异不显著(P＞0.05)。

图2 2016年～2017年广西6市牛支原体的感染趋势

对2016年～2017年采集的2400份牛血清进行传染性牛鼻气管炎抗体和牛支原体抗体的双阳性结果统计结果显示，其双重感染率为12.21%（293/2400）（表3）。其中，在传染性牛鼻气管炎抗体阳性的牛血清中，牛支原体抗体也为阳性的比率为33.48%(293/875)；而在牛支原体抗体阳性的牛血清中，传染性牛鼻气管炎抗体也为阳性的比率为39.48%(293/742)。经t检验，两者差异不显著。

2.3 绵羊肺炎支原体的抗体检测结果

广西6市2016年和2017年绵羊肺炎支原体的检测结果显示，广西6个市2400份血清的绵羊肺炎支原体抗体个体阳性率为 40.66%（976/2400），场群阳性率为 77.14%（81/105）（表 3）。2016年和2017年广西6市羊血清的绵羊肺炎支原体个体阳性率分别为 32.2%（386/1200）和 49.2%（590/1200）；群体阳性率分别为72.88%(43/59)和82.61%(38/64)。经t检验，2017年绵羊肺炎支原体的个体阳性率和群体阳性率均高于2016年，呈差异极显著和不显著。

表3 2016年～2017年广西绵羊肺炎支原体的抗体检测结果

2016年～2017年广西6个市绵羊肺炎支原体的感染趋势，总体呈现出的是不同程度的上升（图3）。GG市在6个市中的绵羊肺炎支原体感染最为严重，LZ市感染最低。对2017年和2016年的绵羊肺炎支原体感染率进行t检验，BS市、GG市、HZ市、LZ市、LB 市、NN 市差异均不显著（P＞0.05）。

图3 广西2016年～2017绵羊肺炎支原体的感染趋势

3 讨论

近年来，广西牛羊养殖业得到政府的大力扶持，但是在规模和数量上远不及北方地区。由于广西本地牛羊良种有限，不足以满足自身需求，需要从周边省份或者内蒙、山东、吉林、新疆等牛羊养殖大省引进牛羊。本研究结果显示，2016年～2017年广西传染性牛鼻气管炎的平均个体抗体阳性率为36.45%，其抗体阳性率虽较北方低[3]，但是2017年广西6市传染性牛鼻气管炎的抗体阳性率与2016年相比，同比增长66.77%，说明传染性牛鼻气管炎已经严重感染广西养牛业。究其原因可能有以下两点：其一，养殖户从外地引进的牛在混群前未做传染性牛鼻气管炎的感染检测，致使携带传染性牛鼻气管炎病毒的牛在本场传播病毒；其二，可能运输工具未经消毒又继续运输牛群，导致病毒引入本地牛场。传染性牛鼻气管炎主要感染肉牛，以犊牛最为易感，若牛受到传染性牛鼻气管炎感染将会长期或终身带毒，对牛场构成持续性威胁。本研究结果显示，传染性牛鼻气管炎已在广西广泛流行，需要引起相关部门对该病的预防工作的重视。

广西兽医生物技术重点实验室于2013年首次分离到广西地区牛支原体，并证实牛支原体已经成为导致广西肉牛引种回来后爆发牛呼吸道疫病综合征的主要病原[4,5]。Fu等[6]报道2011年广西奶牛牛支原体的感染阳性率在3.3%～14.89%之间，而本研究结果显示，2016年～2017年其阳性率分别为23.33%和38.5%，这表明牛支原体在广西地区呈地方性流行，感染强度较2011年增加。

绵羊肺炎支原体在世界各国都普遍存在，特别是养羊业发达的澳大利亚、以及欧美等国家。本研究结果显示，2016年～2017年广西的绵羊肺炎支原体抗体阳性率总体为40.6%，远高于广西兽医生物技术重点实验室在2010年的检测数据（抗体阳性率18.89%）[7]。出现这种情况可能主要有以下几点原因：其一，广西区内缺乏优良品种，需要大批引种；其二，频繁的市场贸易；其三，饲养管理水平低以及养殖户缺乏相关的专业知识。由于广西肉羊养殖业处于发展阶段，必需加强对该病的防控。

2016年～2017年广西6市传染性牛鼻气管炎、牛支原体、绵羊肺炎支原体的群体感染率和个体感染率每年都均以不同程度的速度上升，侧面反映出广西牛羊养殖的发展，不仅给广西地区带来了机遇，还带来了挑战。为此，解决好广西养殖业发展带来的问题仍需各相关部门共同努力。