1136例胃癌活检组织HER-2蛋白的表达及其意义

刘志良 高 玟 黄传生 罗庆丰 蔡 勇 邹弯弯

中国胃癌每年新发病例数十万，居消化道肿瘤发病率的第1位，死亡率占癌症致死率的第2位[1]。 我国半数以上的患者在确诊时已经处于中晚期，手术和化疗不能明显延长此类患者的生存时间，分子靶向治疗正成为此类患者的新选择。TOGA研究是胃癌治疗的一个里程碑，其确立了曲妥珠单抗在胃癌HER-2阳性患者中的治疗地位[2]。胃癌中HER-2状态的准确评估是提高靶向治疗疗效的关键，免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)法是最常用的检测方法。本研究应用IHC法检测胃镜活检肿瘤组织HER-2蛋白的表达，并观察其表达与胃癌患者生物学行为的关系。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集2013年12月至2016年8月江西省肿瘤医院病理科存档资料完整的胃癌活检标本1136例，其中男性850例，女性286例；年龄20～90岁，<60岁者457例，≥60岁者679例；所有患者胃镜活检前均未行放化疗及生物治疗。所有肿瘤活检组织经10%中性缓冲福尔马林固定6～48 h后石蜡包埋切片。

1.2 检测方法

标本均采用IHC法染色，一抗及二抗均购自福州迈新生物技术有限公司，一抗为鼠抗人单克隆抗体CerbB-2(克隆号：EP3)，试剂盒采用 EnVision 两步法。检测仪器：石蜡切片机(型号：Leica RM2235)，显微镜(型号：OLYMPUS BX51)等。

石蜡组织切片常规脱蜡和水化，加3%过氧化氢溶液室温孵育10 min以阻断内源性过氧化物酶；高温高压抗原修复；PBS缓冲液冲洗3×3 min；滴加一抗(鼠抗人单隆抗体CerbB-2)，4 ℃冰箱过夜；室温下孵育20 min，PBS缓冲液冲洗3×3 min，滴加二抗(生物素化山羊抗小鼠IgG)，室温孵育20 min；PBS缓冲液冲洗3×3 min，滴加新配制的DAB显色液，显微镜下观察，阳性为棕黄色颗粒状、定位于细胞膜；自来水冲洗，苏木精复染，脱水透明，封片、观察结果。

1.3 结果判读

无反应或任何肿瘤细胞无膜染色为0；肿瘤细胞团微弱或隐约可见膜染色(无论染色的肿瘤细胞比例多少)为1+；肿瘤细胞团有弱～中度的基侧膜、侧膜或完全膜染色(无论染色的肿瘤细胞比例多少)为2+；肿瘤细胞的基侧膜、侧膜或完全膜的强染色(无论染色的肿瘤细胞比例多少)为3+。0和1+为HER-2阴性，3+为HER-2阳性，2+为HER-2不确定。内镜活检胃癌标本虽不存在肿瘤细胞百分比界值，但要求至少含有5个阳性细胞的细胞簇。

1.4 统计学方法

所有数据使用SPSS 22.0统计软件进行统计学分析。组间比较用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HER-2蛋白的表达

HER-2蛋白IHC 3+为13.2%(150/1136)，IHC 2+为18.8%(214/1136)，IHC 1+为8.0%(91/1136)，IHC 0为60.0%(681/1136)。

2.2 HER-2蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系

HER-2蛋白的表达与患者的性别、患病年龄和病变部位无关，与胃癌的分化程度和Lauren分型相关。见表1。

3 讨论

中国两项大型多中心研究数据显示，中国胃癌患者的HER-2阳性率为12%～13%[3-4],本研究中HER-2的阳性率为13.2%，略高于多中心研究的数据。有研究认为胃癌HER-2蛋白过表达与胃癌的病理类型和分化程度密切相关[5]，本研究结果显示胃癌活检组织HER-2蛋白表达与肿瘤分化程度和Lauren分型密切相关，在分化好的胃癌组织中阳性率高于分化差的，在Lauren分型中，肠型胃癌HER-2蛋白的表达要显著高于弥漫型和混合型。已有多项研究数据表明，在肠型胃癌和胃食管结合部腺癌中，HER2的阳性率较高[6-8]，本研究中胃食管结合部腺癌HER-2蛋白的阳性率(15.0%)高于其他部位，但差异无统计学意义，可能和肿瘤的异质性有关。胃癌的肿瘤异质性比乳腺癌更常见，5%～30%的胃癌出现肿瘤异质性[9],为避免肿瘤的异质性对结果的影响，要求活检时尽可能多点取材、必要时可再次检测。