周 明,赵 杰
(1上海市浦东新区农业服务中心宣桥站,上海201314;2上海市浦东新区农业技术推广中心,上海201201)
朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus Boisduval)是甜瓜、西瓜、黄瓜、茄子、草莓、玉米等作物上的主要害虫(螨),受害植物长势衰弱;如防治不当,严重影响寄主植物产量和品质,甚至导致寄主植株死亡[1-3]。当前生产上主要依靠化学防治措施,但化学农药的长期使用导致抗药性的产生[4],同时对人和环境带来了负面影响。为此,传统的植物源农药以其低毒、易分解等优点,日益受到农业科技工作者的关注。贾福丽等[5]研究发现侧地锦和侧柏叶对朱砂叶螨有很高的触杀活性,且具有一定的杀卵、抑制雌成螨产卵和趋避作用;申照静等[6]研究报道了牵牛种子石油醚、氯仿提取物和皂角种子氯仿提取物对朱砂叶螨具有很好的触杀作用;程作慧等[7]报道了鱼腥草、使君子、辣蓼、喜树叶、地榆和陈皮等6种植物的乙醇提取物对朱砂叶螨的生物触杀活性;袁文金等[8]从新疆23种植物提取物中筛选出14种对朱砂叶螨具有触杀活性的植物提取物;徐雪莲等[9]筛选了31种热带植物对朱砂叶螨的生物活性,发现大山芝麻、蜂巢草、仔榄树和许树乙醇提取物对朱砂叶螨具有明显的触杀作用,牛筋果、云南野桐、多花瓜腹木、黄椿木姜、酒饼簕和毛瓣鸡血藤提取物对成螨驱避作用明显且较为稳定。笔者通过对15种植物不同部位乙醇提取物的杀螨活性进行了初步测定,筛选出对朱砂叶螨具有较高触杀活性的植物提取物,并对龙葵植物提取物的活性成分进行了初步萃取分离和盆栽试验,以期为利用龙葵提取物防治朱砂叶螨提供参考。
供试植物共15种(表1),于2015年5月至7月从上海浦东新区田间采集植物的不同部位,经整理、35℃干燥、粉碎后备用。
表1 供试植物材料Table 1 Tested p lantmaterials
朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus Boisduval)于2015年5月从浦东新区甜瓜上采集,再经室内玉姑甜瓜苗上饲养繁殖后,选取3—5 d龄期的雌成螨供试。
1.3.1 植物提取液的制备
以95%乙醇为提取溶剂(分析纯,杭州高晶精细化工有限公司),采用室温浸渍法提取[10],将提取物用蒸馏水稀释5倍,配制成浓度为200 mg/mL的提取液备用。生物测定时以蒸馏水为对照。
1.3.2 龙葵根提取物不同萃取液的杀螨效果测定
将杀虫活性较高的龙葵根提取物,依次用石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取[10],分别获得石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水的4个提取物;石油醚和乙酸乙酯提取物用10%丙酮配制成200 mg/mL、100 mg/mL、50 mg/mL、25 mg/mL和12.5 mg/mL的溶液,正丁醇和水提取物用蒸馏水配制成以上浓度溶液,生物测定时分别以10%丙酮和蒸馏水为对照。
1.3.3 生物测定方法
采用国际粮农组织(FAO)推荐的玻片浸渍法[11]。将双面胶带帖在载玻片一面,用小毛笔选取健康雌成螨30头,将其背面粘帖在胶带上,放置2—3 h,检查并弃去不正常个体,补足螨数。处理时将粘有雌螨的一面浸于提取液中5 s,用虑纸吸去多余提取液,将玻片放于培养皿内,于(25±1)℃、相对湿度(60±10)%、每天光照12 h的光照培养箱内培养24 h,以浸渍蒸馏水为对照,检查死亡情况并计算防效。死亡标准以小毛笔触动螨足或口器,无任何反应视为死亡。
1.3.4 室内盆栽试验
取三叶一心玉菇瓜苗6株,去除心叶,每株接健康雌成螨30头,用小型喷雾器将浓度为200 mg/mL的乙醇提取液均匀喷洒于3株瓜苗叶片正反面,直到提取液均匀布满叶片,于(25±2)℃、相对湿度(40±10)%、每天光照12 h的培养室内培养48 h,以喷洒蒸馏水为对照,记录死亡情况并计算防效。
15种植物不同部位的乙醇提取物对朱砂叶螨的杀虫活性测定结果表明,浓度为200 mg/mL时,龙葵根和泽漆根提取液对朱砂叶螨具有显著的杀虫活性,其中以龙葵根提取液效果最好,防效达95.5%;其余提取物均无明显杀虫效果(表2)。
表2 龙葵根和泽漆根提取物对朱砂叶螨的杀虫作用Table 2 K illing effects of extracts from black nightshade and sun spurge roots on T.cinnabarinus
龙葵根和泽漆根提取液的盆栽试验结果表明,龙葵根提取液对朱砂叶螨具有很高的防效(90.2%),泽漆提取液也有一定的防效(52.4%)(表3)。
表3 两种植物根提取液的盆栽试验Table 3 Pot test for effects of two extracts on T.cinnabarinus
对杀螨活性较高的龙葵根提取物用不同溶剂萃取获得相应萃取物,经杀螨活性测定,正丁醇萃取物对朱砂叶螨有很高的杀虫活性,计算所得萃取物浓度与防效的毒力回归方程为Y=33.9494+0.3304x(r=0.9440);石油醚、乙酸乙酯和水萃取物没有明显活性(表4)。
表4 龙葵根正丁醇萃取物对朱砂叶螨的杀虫作用Table 4 Killing effect of n-butyl alcohol extract from black nightshade roots on T.cinnabarinus
15种不同植物乙醇提取液的杀螨试验表明,龙葵根和泽漆根提取液对朱砂叶螨具有显著杀虫活性,盆栽试验进一步确定了2种植物提取液的防治效果。有研究发现羊蹄跟[5]、辣蓼[7]对朱砂叶螨具有触杀活性,而本研究未发现以上2种植物的杀螨活性,可能是不同地区植物的成分存在差异;陈新华等[12]研究表明,龙葵茎叶提取物对柑橘红蜘蛛具有活性,而本试验未发现龙葵茎叶提取物具有活性,可能是相同植物的提取物对不同螨类有严格的选择性或相同植物不同部位成分存在差异。龙葵根提取物经不同溶剂萃取后进行杀螨活性测定,结果表明活性成分存在于正丁醇中。作者曾采用甲醇为溶剂,研究了龙葵根对小菜蛾的拒食活性,且主要活性成分也存在于正丁醇中[13],表明龙葵根中可能存在不同作用机理的活性成分;作者还研究过龙葵根拒食活性成分的稳定性,结果表明温度和pH对活性成分影响较小,但对光照极为敏感[14],至于对朱砂叶螨的活性成分种类、稳定性、田间应用方式和效果还有待继续研究。
[1]吕佩珂,苏慧兰,高振江.西瓜甜瓜病虫害诊治原色图签[M].北京:化学工业出版社,2013:163-164.
[2]吕佩珂,苏慧兰,庞震,等.中国现代果树病虫原色图签[M].北京:化学工业出版社,2013:413.
[3]石洁,王振营.玉米病虫害防治彩色图谱[M].北京:中国农业出版社,2011:32-33.
[4]陈秋双,赵舒,邹晶,等.朱砂叶螨抗药性监测[J].应用昆虫学报,2012,49(2):364-369.
[5]贾福丽,陈义娟,陈佳,等.8种植物提取物对朱砂叶螨生物活性筛选及其研究[J].中国农学通报,2011,27(24):286-291.
[6]申照静,王海香,师光禄,等.三种植物提取物对朱砂叶螨生物活性的影响[J].北京农学院学报,2008,23(1):22-24.
[7]程作慧,刘耀华,曹挥,等.六种植物提取物对朱砂叶螨生物活性的影响[J].山西农业大学学报(自然科学版),2014,34(5):403-406.
[8]袁文金,马德英,姜运涛,等.新疆植物活性物质对朱砂叶螨的活性及天敌安全性测试[J].新疆农业大学学报,2007,30(4):80-83.
[9]徐雪莲,刘寿柏,卢芙萍,等.31种热带植物乙醇提取物对朱砂叶螨的生物活性研究[J].热带作物学报,2011,32(10):1951-1956.
[10]赵杰,庄隽怡,顾振芳.植物提取液对甜瓜枯萎病的抑菌活性及种子萌发的影响[J].上海交通大学学学报(农业科学版),2009,27(4):412-417.
[11]张宗炳.杀虫药剂的毒力测定(原理·方法·应用)[M].北京:科学出版社,1988:284.
[12]陈新华,邓业成,朱燕红.46种植物提取物对柑橘红蜘蛛的杀螨活性[J].广西师范大学学报(自然科学版),2006,24(1):94-97.
[13]秦智敏,赵杰.龙葵根萃取物对小菜蛾的拒食作用初探[J].上海农业科技,2013(1):135.
[14]倪秀红,赵杰,代光辉.龙葵根拒食活性成分的稳定性研究[J].中国园艺文摘,2016,32(1):23-24.?