1例急诊冷凝集致血型鉴定和交叉配血困难的处理

王加勇，陆紫敏，方 琦，刘承重，李雪晨，徐 华

(同济大学附属同济医院输血科，上海 200065)

输血治疗在临床抢救危重患者的过程中发挥着不可替代的作用，而输血前的血型鉴定及交叉配血试验是保障临床输血安全的重要措施。正常情况下，人血清中含有少量冷抗体，通常没有活性，不会与自身细胞产生反应[1]。但高效价的冷反应抗体会干扰血型鉴定和交叉配血试验，给临床诊断和治疗带来困难[2]。现报道1例急诊冷凝集致血型鉴定和交叉配血困难的处理。

1 资料与方法

1.1 一般资料 患者，女，41岁，因发现双下肢瘀斑伴牙龈出血3 d，畏寒、发热加重1 d，于2016年12月29日夜间到本院急诊内科就诊。既往有系统性红斑狼疮病史12年，急性重病容，睑结膜苍白，牙龈处可见活动性出血，双下肢可见散在陈旧性瘀斑，两肺呼吸音粗，两肺底可闻及少许湿性啰音，心腹查体无其他特殊，急诊血常规检查情况见表1，行胸部CT检查提示两肺感染并少量胸腔积液。因患者血红蛋白过低，夜班医师申请红细胞悬液2 U。

1.2 仪器与试剂 Diamed-ID定速离心机为瑞士达亚美公司生产，三用电热恒温水箱为常州翔天实验仪器厂生产，2420型离心机为日本久保田生产；凝聚胺试剂为珠海贝索公司产品，ABO、RhD血型定型检测卡、不规则抗体筛检卡均为美国伯乐公司产品，抗A抗B血型定型试剂、RhD(IgM)血型定型试剂、人球蛋白抗体(抗IgG，C3d)检测试剂、人ABO血型反定型用红细胞试剂、不规则抗体检测试剂(人红细胞)均为上海血液生物有限责任公司产品，用于配制红细胞悬液的生理盐水为山东华鲁制药有限公司产品。

表1 患者急诊血常规检查结果

1.3 方法

1.3.1 冷抗体吸收试验 将患者红细胞用37 ℃生理盐水洗涤3次，取1例洗涤红细胞和1例患者血清，混匀置入4 ℃冰箱30 min，每隔10 min摇动1次，使其充分吸收。离心吸取出血清，再与1例洗涤红细胞混匀置入4 ℃冰箱，重复上述步骤2次，取末次吸附后的血清待用。

1.3.2 ABO血型鉴定 正定型采用微柱凝胶法，反定型采用试管法；交叉配血试验联合采用盐水法、凝聚胺法和微柱凝胶法。

1.3.3 抗体筛查试验 试验操作步骤严格按照《全国临床检验操作规程》执行[3]。血型不规则抗体筛查试验，前面3孔依次加入抗体筛选细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号细胞，自身对照孔加人患者经37 ℃加温盐水3次洗涤的红细胞，37 ℃孵育15 min，离心观察结果。直接球蛋白试验阳性对照为IgG型抗D致敏的5% RhD阳性红细胞生理盐水悬液，阴性对照为健康人5%红细胞生理盐水悬液。

2 结 果

2.1 患者血型鉴定结果 在室温下鉴定，患者血型正定型是AB型、反定型是O型，RhD阳性，正反定型检测结果不一致，自身对照为阳性。采用37 ℃加温盐水3次洗涤的红细胞和37 ℃水浴10 min后的血清做血型鉴定，正定型是AB型、反定型是O型，RhD阳性，正反定型检测结果仍然不一致，自身对照为弱阳性。采用37 ℃加温盐水3次洗涤的红细胞和4 ℃冷抗体吸收后血清再次做血型鉴定，患者血型为是AB型、RhD阳性，正反定型一致，自身对照为阴性。

2.2 患者血型不规则抗体筛选试验结果 患者血型不规则抗体筛选试验阴性，直接球蛋白试验阳性，冷凝集素效价为512。

2.3 交叉配血试验结果 采用37 ℃加温盐水3次洗涤的红细胞和4 ℃冷抗体吸收后血清，与AB型RhD阳性同型红细胞进行交叉配血试验，主侧、次侧和自身对照在盐水、凝聚胺和人球蛋白抗体3种介质中无聚集，无溶血现象，联合交叉配血结果相合。

3 讨 论

冷凝集是由冷抗体(冷凝集素)引起的红细胞低温环境下凝集现象。冷抗体在低温(0～4 ℃)时作用最强，红细胞凝集显著，但此种凝集反应可逆。随温度的升高，复合物逐渐解离，凝块消失。部分健康人或婴儿可存在低滴度的冷抗体，其效价多低于1∶16，一般情况下没有活性。当患者发生某些疾病，如支原体感染、自身免疫性疾病、传染性单核细胞增多症、原发性冷凝集素综合征等时，会出现较高效价的冷抗体，其能与自身红细胞反应，干扰血型鉴定和交叉配血试验，给输血带来困难[4-5]。

此例患者在血型鉴定过程中，出现正反定型不一致，在排除人为操作和试剂因素后，发现反定型时Al红细胞(Alc)、B红细胞(Bc)、O红细胞(Oc)和自身对照均出现凝集现象，患者血型不规则抗体筛选试验阴性，直接球蛋白试验阳性，结合患者异常血常规结果经温育稀释后被SYSMEX XN9000血细胞分析仪纠正情况，提示患者存在冷抗体。采用37 ℃加温盐水3次洗涤的红细胞及37 ℃水浴血清后，反定型Alc、Bc、Oc和自身对照凝集减弱但并未完全消失，交叉配血试验主侧和自身对照在盐水和凝聚胺介质中聚集减弱，考虑患者存在高效价冷抗体。患者血清稀释后，与标准红细胞在室温时测得患者冷凝集素效价为512。高效价冷抗体没有对微柱凝胶法产生影响，是因为微柱凝胶法在交叉配血和血型不规则抗体筛查时都需在37 ℃孵育器内孵育15 min，使冷凝集素暂时失去活性。患者红细胞经37 ℃加温盐水3次洗涤，交叉配血次侧没有受到影响[1]。采用冷抗体吸收后的血清鉴定血型，Alc、Bc、Oc和自身对照均凝集消失，联合交叉配血结果相合。

高效价的冷凝集患者，临床必须输血时需输注同型洗涤红细胞[6]。该患者是夜间急诊抢救用血，实际工作中，可发给临床2单位复温至接近人体正常温度的去白红细胞悬液，并嘱临床调高室内温度至20～30 ℃，缓慢输注，密切观察，保证输血安全。

[1]陈德智,申卫和,沈道全.1例冷凝集造成ABO血型鉴定及配血困难的处理[J].中国医药导报,2012,9(1):118-119.

[2]李英,夏伟红.高效价自身冷抗体致血型鉴定和交叉配血困难的有效处理[J].临床研究,2016,24(2):192-192.

[3]尚红,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].4版.北京:人民卫生出版社,2014:127-129.

[4]唐友云,桂满元.冷凝集素对血常规的影响及不同处理方法的分析[J].国际检验医学杂志,2014,35(17):2401-2403.

[5]胡晓玲,汪新明,邓淑芬,等.脾亢患者冷凝集素干扰致交叉配血不合的处理1例[J].西南国防医药,2015,25(12):1380-1381.