以黄芩苷含量控制舒心颗粒质量的研究

关晓清，邓毅峰，于秀华*

（1. 中国人民解放军第208医院，长春 130061；2. 长春中医药大学，长春 130117）

舒心颗粒由人参、柴胡、黄芩、法半夏、桂枝等十几味药材组成，常用于治疗气滞血瘀型冠心病，心律不齐，心绞痛，胸闷心悸，气短腹胀[1]。黄芩中的黄芩苷具有抑菌、抗炎、抗病毒等作用[2]。为了有效确保产品质量，本文采用HPLC法对舒心颗粒中黄芩苷进行含量测定，以保证和控制产品质量稳定性。

1 材料

1.1 仪器 LC-2010A型高效液相色谱仪（日本岛津），

SPD-10AVP检测器，十八烷基硅烷键合硅胶（C18）色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），日本岛津电子分析天平（AMW220D型），CAMAG型薄层色谱成像仪（瑞士CAMAG公司）。

1.2 药品 黄芩苷对照品（批号：110715-201117）；甲醇为色谱纯；本实验中所用对照药材、黄芩苷对照品采购于中国药品生物制品检定研究院；乙醇为分析纯；水为超纯水；舒心颗粒为自制。

2 方法

2.1 色谱条件 色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：甲醇-水-磷酸（ 45 : 55 : 0. 2）；检测波长：280 nm；柱温：室温[3-4]。

2.2 溶液的制备

2.2.1 供试品溶液 取舒心颗粒适量，研细，样品取样量约0.5 g，溶剂加入量为100 mL，提取方法为超声处理（功率250 W，频率40 kHz），30 min。取续滤液，即得[5]。

2.2.2 对照品溶液 取黄芩苷对照品约10 mg，精密称定，加甲醇溶解，用0.45 μm滤膜过滤，取续滤液，作为对照品溶液。

2.2.3 阴性样品溶液 按照处方、制法、供试品溶液制备方法制成不含黄芩药材的阴性样品溶液。

3 结果

3.1 专属性考查 按照预实验摸索的色谱条件测定供试品溶液、对照品溶液、阴性对照品溶液，测得色谱图，结果表明，阴性对照液色谱在与黄芩苷对照品峰相应的保留时间处无色谱峰，表明无干扰，方法可行[6-7]。3.2 检测波长的确定 根据紫外吸收图的最大吸收峰以及现行版《中国药典》和有关文献，确定检测波长为280 nm[8]。

3.3 系统适用性验证 应用预选高效液相色谱测定时的流动性比例、测定波长等条件，对对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液进行实验，其理论板数、分离度、保留时间、拖尾因子均符合要求，表明此色谱条件可行[9]。

3.4 方法学考察

3.4.1 标准曲线的制备 按照系统适用性实验条件，分别设定对照品溶液进样体积为2.0、4.0、8.0、10.0、12.0、15.0、20.0 μL，测定，根据峰面积积分值及对照品浓度进行回归方程计算[10-11]。黄芩苷回归方程：Y = 3 278 245.86X+20 911.02，r2= 0.999 9，线性范围：0.188 ～ 1.880 μg。

3.4.2 中间精密度试验 取配置好的黄芩苷对照品溶液，按照系统适用性实验条件，设定进样量10 μL，分别用2名实验人员操作测定、在2台不同高效液相色谱仪、同一人不同时间测定[12]，计算峰面积积分值的偏差，结果RSD为0.37%。试验结果表明，精密度较好。3.4.3 稳定性试验 取同一批样品，按照供试品溶液制备方法制成待测溶液，测定，第1针进样时间设定为0 h，然后与第1针相隔2、4、8、12、24 h分别进样[13-14]，进样量10 μL，依法测定，RSD为0.42%。

3.4.4 重现性试验 取样品测定6次[15]，结果样品中黄芩苷的含量分别为 20.75、21.74 、20.79 、21.03 、21.21 、20.99 mg，RSD为1.72%。

3.4.5 回收率试验 取已知含量（21.085 mg/g）的样品粉末0.25 g，6份，精密称定，加入对照品溶液15 mL（浓度分别为18.4、145.1 μg /mL），计算回收率[16-18]，结果见表1。

表1 回收率测定结果

试验结果表明：平均回收率为97.34%，标准偏差为1.97%，证明舒心颗粒含量测定时采用此方法可行。

4 小结

本制剂处方在临床应用多年，具有一定的临床疗效及理论基础。黄芩为方中主药之一，在本制剂的临床疗效中起着重要作用。本文利用HPLC法测定舒心颗粒中黄芩苷的含量，方法简便、专属性强。本方法的建立，提高了检测灵敏度，有效地确保了产品质量，精确地控制了产品的稳定性，为其内在质量的控制提供了科学依据。

[1]庄洁.冠心病心绞痛的中医症状病机研究[D].济南:山东中医药大学, 2013.

[2]熊英,傅颖媛,况南珍,等.黄芩苷抗白念珠菌作用及机制研究[J].中国药理学通报, 2004, 20(12):1404-1407.

[3]陈旭,赵春宝,张玉玺,等. HPLC法测定干姜芩连人参煎膏剂中黄芩苷的含量[J].中国现代药物应用, 2015,9(24):286-287.

[4]黄道秋,贺钢民,李柏群,等.芩术四物汤中黄芩苷和芍药苷的含量测定[J].成都中医药大学学报, 2012, 35(3):45-47.

[5]宁科贤,黄燕萍.高效液相色谱法同时测定炎热清片中栀子苷、黄芩苷和汉黄芩素含量[J].中国药业, 2015,24(16):89-91.

[6]翟媛媛,师永清. HPLC法同时测定清心明目上清片中栀子苷、连翘苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的含量[J].西北民族大学学报(自然科学版), 2016, 36(1):13-17.

[7]宋淑亮,褚福龙,刘钊,等. 一种褐藻多糖含量测定方法及其专属性研究[C]. 中国海洋学会“一带一路”战略与海洋科技创新——中国海洋学会2015年学术论文集,大连:2015.

[8]毛爱丽. HPLC法同时测定清胃黄连丸中5种成分的含量[J].中国药房, 2015, 26(33):4740-4742.

[9]王丽,周慧芳,张艳军,等.高效液相色谱法测定小鼠血浆中黄芩苷含量及其药代动力学研究[J].长春中医药大学学报, 2011, 27(2):160-162.

[10]郭彩杰,白金刚,姜楠.双黄连滴剂和其配方颗粒中黄芩苷含量对比研究[J].辽宁医学院学报, 2016, 37(3):9-11.

[11]王东超,魏颖,高佳琪,等. HPLC同时测定糖痹康颗粒中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量[J].吉林中医药, 2017, 37(5):513-517.

[12]郭俊国,毕宏生,宋继科,等.龙胆泻肝配方颗粒HPLCDAD指纹图谱的建立及主要成分含量测定[J].时珍国医国药, 2016, 27(5):1106-1109.

[13]刘婷婷.钩藤提取物及其制剂的质量控制和稳定性研究[D].上海:复旦大学, 2013.

[14]木巴拉克.宣肺清热颗粒剂稳定性研究[D].乌鲁木齐:新疆医科大学, 2004.

[15]孙孝亚.胃痛宁胶囊的质量标准研究[D].郑州:河南中医药大学, 2014.

[16]鲁晓光.HPLC法测定五味麝香丸中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量[J].中国药师, 2011, 14(6):807.

[17]聂翠翠.HPLC在绿原酸和黄芩苷制剂中含量测定的应用[D].武汉:湖北中医药大学, 2012.

[18]张丽,陈菊,孙桂琳.HPLC测定维药金锁昆都尔片中木香含量[J].中国实验方剂学杂志, 2013, 19(2):123-125.