纳豆+甘麦大枣加味汤对气虚血瘀证大鼠血液流变学和凝血功能的影响

李雅君，程嘉艺

（辽宁中医药大学，沈阳 110032）

气虚血瘀证是血瘀证常见的一种临床症状，存在于诸多疾病的不同病理阶段和病程，病因复杂，常见于老年人心脑血管疾病，随着近年来，我国老龄化日益严重，防治老年人气虚血瘀证刻不容缓[1-2]。甘麦大枣汤出自医圣张仲景的《金匮要略》，该方由3味药食同源中药甘草、小麦和大枣组成，主要治疗妇人脏躁等疾病[3]，“朱氏妇科”[4-5]第三代传人朱南孙教授认为，甘麦大枣汤能养心安神，补益脾肾之气。本文在原方3味药中加入姜黄、当归、人参、山药、山楂等补气活血化瘀药食同源中药。使各味中药相互配伍，增强补血益气的作用。本实验通过观察纳豆+甘麦大枣加味汤对气虚血瘀证大鼠血黏、凝血4项等指标的影响，为甘麦大枣加味汤益气活血化瘀的研究提供一定的实验依据。

1 材料

1.1 动物 SPF级Wistar大鼠70只，雌雄各半，体质量（200±20） g，购于本溪长生生物有限公司，合格证号：SCXK（辽）2015-0001。

1.2 药品与试剂 PT测定试剂盒（批号R6007），APTT测定试剂盒（批号R4007），Fib测定试剂盒（批号R6011），TT测定试剂盒（批号546768）。戊巴比妥钠由辽宁中医药大学实验室提供（批号1021N038），柠檬酸钠抗凝管（许可证编号，湘食药监械生产许20150049）。肝素钠抗凝管（许可证号，冀食药监械生产许20100418）。

1.3 主要仪器 半自动血液流变仪LBY-N6K，北京普利生仪器有限公司；Sysmex CA510型全自动血凝分析仪，日本Sysmex株式会社。

1.4 供试品溶液制备 甘麦大枣加味汤（人参、当归、大枣、姜黄、甘草各10 g，淮小麦20 g，山药、炒山楂各15 g），各味药材加入10倍量水，浸泡30 min，加热回流煎煮2次，1 h/次，滤过，合并煎煮液，浓缩至100%浓度，放至冰箱4 ℃冷藏备用。补阳还五汤煎煮方法与甘麦大枣加味汤相同，以上药材购于辽宁众意愿大药房，药材经辽宁中医药大学中药鉴定室翟彦君教授鉴定符合2015年版《中国药典》1部相关项要求。纳豆粉购于辽宁天润生物技术有限公司，使用时用温水冲开。

2 方法

2.1 分组及给药 将雌雄各半的70只Wistar大鼠按照体质量随机分成7组，即空白组，模型组，阳性药组14.0 g生药/kg，纳豆＋甘麦大枣加味汤高剂量组（1.875＋12.5 g）生药/kg、中剂量组（1.875＋6.25 g）生药/kg、低剂量组（1.875＋3.125 g）生药/kg，纳豆组1.875 g纳豆/kg，造模时，除空白组正常饮食饮水外，其余各组每天将大鼠放入水温14～16 ℃，水深（35±5）cm，直径为50 cm的水桶中进行游泳，以每组大鼠自然沉降没入水中5s-1不能自主上浮为其疲惫标准，当全组有50%出现自然沉降时，全组停止游泳捞出，使之暴露于空气中自然晾干[6]，除正常组外，其余各组大鼠按照40 g/（kg·d）[7]提供饲料，灌胃给药1次/d，连续60 d，取血前大鼠禁食24 h，不禁水，每10 d测定体质量1次。

2.2 血流变指标测定 取血前用戊巴比妥钠30 mg/kg麻醉，腹主动脉取血，2 mL测定全血黏度，取3 mL以3 000 r/min，离心15 min，测定血浆黏度。

2.3 凝血4项测定 腹主动脉取血2 mL以3 000 r/min，离心15 min，分离血浆，按照凝血4项试剂盒说明书进行。

2.4 统计学方法 采用SPSS 17.0统计软件处理所得到的数据，选用one-wayANOVA进行统计处理，数据用均数±标准差表示，以P＜0.05为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 大鼠造模前后表征及体质量变化比较 见表1。

表1 大鼠造模前后表征及体质量变化比较（x± s，n = 10） g

3.2 对大鼠血液流变学指标的影响 见表2。

3.3 对大鼠凝血功能的影响 见表3。

表2 对大鼠血液流变学指标的影响（x± s，n = 10）

表3 对大鼠凝血功能的影响(x± s ，n = 10）

4 讨论

中医认为，气为血之帅，气行则血行，气虚则不能推动血液正常的运行，导致血瘀，气虚血瘀是血瘀证常见的一种类型。血液流变学、凝血功能是判别血瘀证的一项重要指标[8]，陈可冀[9]院士从临床治疗学角度，根据血液流变学的变化将血瘀证分为血瘀证Ⅰ型和血瘀证Ⅱ型，大多数血瘀证可以归为Ⅰ型，主要表现为高血黏、高纤维蛋白原血症、高血栓素水平，即血液“浓”“黏”“凝”“聚”，有血栓栓塞疾病的倾向。血瘀证Ⅱ型，部分疾病属于这一类型，主要表现为血液黏度低、血浆蛋白等有形成分不足，或者某一凝血功能不足等，常见贫血症、部分月经病、肝硬化等。本实验的造模结果为气虚血瘀组血液黏度低（P＜0.01）、纤维蛋白原等凝血因子显著不足（P＜0.01），与庞树玲[6]、王晚霞[10]等实验结果基本一致。本文采用饥饿和力竭游泳复合因素方法造模，《灵枢·五味篇》曰：“谷不入半日则气衰，一日则气少矣，”后天来源长时间不足，气血生化之源匮乏，低温刺激，寒邪入体内，血流不畅，劳则耗气，过度疲劳，正气损伤。符合中医气虚血瘀致病因素。

血液的高切黏度反映的是红细胞的变形能力对血液黏度的影响，低切反映的是红细胞的聚集力对血液黏度的影响，而中切处于二者之间[11]。血液中的红细胞含量减少会使血液黏度下降[12]。大部分血瘀呈“浓”“黏”“凝”“聚”，部分血瘀证会出现低凝、低黏或者更复杂的状态，血液低凝低黏状态不能代表血行通畅。现代研究发现，在疾病的某些阶段，机体的凝血与抗凝过程发生紊乱，凝血酶增多，凝血系统、血小板被激活，血液凝固性增高，血小板聚集，体内微循环中有广泛的微血栓生成，导致凝血因子大量的消耗，继发性纤溶亢进而出现低凝、低黏及出血症状[13-14]，本研究未见出血，但实验的气虚血瘀模型组全血黏度高切、中切、低切和纤维蛋白原等凝血因子均明显降低（P＜0.01）。本实验给药后，纳豆+高、中剂量组在高切和中切的切变率下血液黏度、Fib含量显著升高（P＜0.05），具体机制需进一步研究。

凝血酶原时间（PT）是检测机体外源性凝血系统，PT的延长反映凝血因子Ⅶ、Ⅹ、Ⅴ、Ⅱ 和Ⅰ的含量降低；APTT检测机体的内源性凝血系统，APTT降低反应凝血因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅴ、Ⅱ和Ⅰ的含量升高[15]，在临床上，血瘀证是一个复杂的病证，由于患病的程度和时间不同，同一机体中，可能同时存在血瘀证Ⅰ型和血瘀证Ⅱ型，本研究中，气虚血瘀模型组大鼠PT延长，APTT降低，各个给药组给药后PT含量显著下降（P＜0.01），而对APTT无任何改善，纳豆+甘麦大枣加味汤对外源性凝血系统有显著效果，但对内源性凝血系统效果不佳。

甘麦大枣加味汤中，人参大补元气，当归补血，小麦养心安神，除烦，大枣补气安神，山药补脾肺气，姜黄活血化瘀，山楂祛瘀，甘草调和诸药，诸药配伍，具有补气活血化瘀，治标亦治本。现代药理学研究表明，人参[16]中的人参皂甙能促进造血干细胞增殖分化，改善低黏状态的血液黏度；当归[17]中的当归多糖能够升高全血黏度，增强红细胞聚集性；山楂[18]中的黄酮能够直接扩张外周血管，增加血流量。本实验结果证明，纳豆+甘麦大枣加味汤可以改善大鼠血液低黏、低凝状态，表明纳豆+甘麦大枣加味汤对气虚血瘀具有很好的补气化瘀的作用。

[1]扈新刚.气虚血瘀大鼠模型表征及生物学基础相关研究[D].北京:北京中医药大学, 2007.

[2]娄金丽,张允岭,郑宏,等.气虚血瘀证动物模型研究的思路与方法[J].北京中医药大学学报, 2006, 29(2):87-90.

[3]王亚杰,杜建超,贺用和.甘麦大枣汤古今应用探究[J].辽宁中医杂志, 2015, 42(7):1292-1293.

[4]张春玲,刘志杰.朱南孙教授应用甘麦大枣汤经验[J].中国中医药现代远程教育, 2011, 9(15):70-71.

[5]李俊箐.甘麦大枣汤临床新用举隅[J].辽宁中医杂志,2014, 41(3):565-566.

[6]庞树玲,高金亮.中年大鼠气虚血瘀证模拟及其机制探讨[J].天津中医学院学报, 1997, 16(3):28-31.

[7]张颖智,路娟,宋婷,等.五加生化胶囊对气虚血瘀模型大鼠血液流变学和细胞内皮因子的影响[J]中成药, 2013,35(7):1356-1359.

[8]杜金行,史载祥.血瘀证中西医结合诊疗指南[C]//第八次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会论文集,北京: 2011.

[9]陈可冀.关于传统血瘀证的现代分析[J].中国中西医结合杂志, 2000, 20(7):487.

[10]王晚霞,李荣亨.气虚血瘀证患者血黏度与心功能相关性研究[J].中国中西医杂志, 2009, 29(1):80-81.

[11]李勇,夏翠英,吕明安.胃萎汤对气虚血瘀证大鼠血液流变学指标的影响[J]. 安徽中医药大学学报, 2005,24(1):22-24.

[12]朱传武, 彭康, 佟丽.补阳还五汤对中风后遗症气虚血瘀大鼠病证模型血常规及血液流变性的影响[J]. 中华中医药学刊, 2007, 25(4):706-709.

[13]余林中,吴锐.温病“微观血瘀”治证刍议[J].中医研究,1996, 9(5):4-6.

[14]王迪浔.人体病理生理学[M].北京:人民卫生出版社,2002:1066-1070.

[15]杨建,何波,杨扬,等.天麻醒脑胶囊的溶栓作用及对凝血系统的影响[J].中国中药杂志, 2009, 34(6):756-760.

[16]范文宇.浅谈中药人参的药理作用及应用研究[J].新疆中医药, 2010, 28(4):89-92.

[17]夏泉,张平,李绍平,等.当归的药理作用及研究进展[J].时珍国医国药, 2004, 15(3):164-166.

[18]张希成.浅析山楂的化学成分及药理作用[J].中国医药指南, 2008, 20(6):150-151.