ＨＰＬＣ－ＩＣＰ－ＭＳ测定牛黄解毒片中砷形态分析的不确定度

艾丹 陈秋生

摘要：建立了液相-电感耦合等离子体质谱联用技术（HPLC-ICP-MS）测定牛黄解毒片中砷元素形态的不确定度评价方法。根据JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》技术规范的要求，对液相-电感耦合等离子体质谱联用技术测定牛黄解毒片中砷元素形态含量的结果进行不确定度分析。结果表明，影响样品溶液浓度测定结果不确定度的主要包括标准溶液的不确定度、工作曲线方程的不确定度、重复测定样品的不确定度，计算出各种不确定度分量并将其合成，以此计算出牛黄解毒片中砷元素形态测量的不确定度。

关键词：液相-电感耦合等离子体质谱联用技术（HPLC-ICP-MS）;不确定度;牛黄解毒片;砷元素形态

中图分类号：O657.63         文献标识码：A

文章编号：0439-8114（2018）23-0132-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2018.23.031           开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

测量不确定度是测量结果的科学表达，也是测量结果可靠性、可比性和可接受性的基础[1]。目前，中国各行业实验室为实现与国际接轨，开始进行国家实验室认可评审，目的是评价测定结果的准确性，需对检测过程进行不确定度评定。根据实验室认可准则要求，在分析检测过程中，需要建立并应用评定结果的不确定度程序[2]。目前国内外文献报道关于分析方法测量不确定度的评定多见于食品分析[3，4]、环境分析[5，6]等领域，且在药物分析领域也得到了一定的应用[7，8]，并将得到越来越多分析工作者的重视。测量不确定度是对测量结果的定量表征，不确定度越小，测量结果越准，使用价值越大[2]。

2015年药典中，液相-电感耦合等离子体质谱联用法（HPLC-ICP-MS）是常见测定方法之一。由于HPLC-ICP-MS是一种新型元素和同位素分析技术，具有检出限低、动态线性范围宽、干扰少、分析精密度高和分析速度快等优点，可同时完成多元素测定，具有极高的检测效率，是痕量、超痕量元素分析领域最先进的方法之一[9，10]。因此，采用HPLC-ICP-MS手段对中药重金属含量进行测定，进而采取质量控制手段，对于规范中药采集、运输、加工饮片及制剂过程中可能引入的重金属进行监控和规范有重要的现实意义。

目前，ISO/IEC17025：2005[11]以及GB/T 27025-2008[12]中均要求检测实验室具有评价测量不确定度的程序，能够对检测项目的不确定度作出正确评估，满足客户及检测工作的要求。测量不确定度在实验室数据比对、方法确认、标准设备校准、量值溯源以及实验室质量控制与管理等方面具有重要的意义。本研究根据JJF1059.1-2012[13]、CNAL/AG06：2003[14]技术规范的要求，对HPLC-ICP-MS技术测定牛黄解毒片中砷元素形态的不确定度进行了分析，以期为这方面研究提供参考。

1  材料与方法

1.1  主要仪器与试剂

液相-电感耦合等离子体质谱联用仪（美国安捷伦公司）;超纯水仪MILLI-Q（美国Millipore公司）;亚砷酸根分析标准溶液（GBW08666），濃度为1.011±0.016 μmol/g;砷酸根标准溶液（GBW08666），浓度为0.233±0.005 μmol/g;乙二胺四乙酸二钠。

1.2  方法

牛黄解毒片样品按文献[15]进行样品前处理，称取牛黄解毒片样品0.2 g，加入人工肠液25 mL，置37 ℃水浴中超声处理20 min，摇匀，离心或过滤，吸取中层溶液10 mL，用微孔滤膜（10 μm）滤过，精密量取滤液1 mL，用0.02 mol/L乙二胺四乙酸二钠溶液稀释至100 mL，摇匀。分别吸取一定体积的溶液，上机测定，其吸收量与砷元素形态含量成正比，与标准系列比较定量。标准曲线取6个浓度点，每个浓度点重复进样3次，以系列标准曲线溶液不同形态或价态砷的峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。同时作空白试验。

3  小结

以液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术测定牛黄解毒片中的砷元素形态为例，讨论了测定牛黄解毒片中的砷元素形态的不确定度的主要来源及其各不确定度分量评定方法。可以看出，该方法也适用于其他仪器分析方法（如原子荧光法、火焰原子吸收法等），该方法的不确定度主要来源于测量全过程的重复性、标准曲线的制作、称量和定容所使用的天平、玻璃器皿等方面。从以上分析可知，在实际操作中，认真、细心、按规范做好每一步操作，就可以减少不确定度，保证测量结果准确、可靠。

参考文献：

[1] 洪  灯，张航俊，姜士磊，等.电感耦合等离子体-原子发射光谱法测定铅笔表面涂层中钡含量的不确定度[J].化学研究，2013， 24（2）：172-175.

[2] 中国实验室国家认可委员会.化学分析中不确定度的评估指南[M].北京：中国计量出版社，2006.

[3] 张宏峰，周洪伟，彭荣飞，等.电感耦合等离子体质谱法测定小麦粉中铅及其不确定度评定[J].广东化工，2014，14（41）：172-174.

[4] 陆美斌，李为喜，李静梅，等.电感耦合等离子体质谱法测定谷物中砷和镉的不确定度评定[J].中国食品学报，2014，5（14）：180-185.

[5] 王亚平，潘  河，许春雪，等.对电感耦合等离子体质谱法测定的地下水中Ag元素不确定度的评定[J].地质通报，2012，31（4）：614.

[6] 孟元华，凌  霞，毛云中.ICP-OES法测定水中12种金属元素含量的不确定度分析[J].职业与健康，2012，28（6）：690.

[7] 徐雪芹，李小兰，贾海江，等.电感耦合等离子体质谱法测定甘草中重金属铅和总砷不确定度的评定[J].贵州农业科学，2015， 43（4）：176-181.

[8] 王雪艳，苏丽丽，裴渭静，等.电感耦合等离子体质谱法测定枸杞子中铜含量及不确定度分析[J].医药导报，2015，11（34）：1513-1516.

[9] NAGESWARA R R，KUMAR T M V N.An overview of recent applications of inductively coupled plasmamass spectrometry（ICP-MS） in determination of inorganic impurities in drugs and pharmaceuticals review[J].J Pharmaceut Biomed，2007，43（1）：1-13.

[10] 戴向东，许杨彪，刘庄蔚，等.电感耦合等离子体质谱在中药及其制剂元素分析中的应用[J].中国中医药信息杂志，2013，  20（1）：106-109.

[11] ISO/IEC17025：2005，General Requirements for the Competence of Testing and Calibration Laboratories[S].

[12] GB/T 27025-2008，检测和校准实验室能力的通用要求[S].

[13] JJF 1059.1-2012，测量不确定度评定与表示[S].

[14] CNAL/AG06：2003，测量不确定度政策实施指南[S].

[15] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京：中国医药科技出版社，2015.

[16] JJG196-2006，常用玻璃量器检定规程[S].