猪弓形体抗体胶体金快速检测法的应用

徐晶晶，蒲敬伟

（新疆生产建设兵团第十二师畜牧兽医工作站，新疆 乌鲁木齐 830009）

猪弓形体病，又称为弓浆虫病或弓形虫病，是由弓形体感染动物和人而引起人畜共患的原虫病。本病以高热、呼吸及神经系统症状、猪只死亡和怀孕母猪流产、死胎、胎儿畸形为主要特征。弓形虫可致母猪流产和仔猪生长发育不良，给养猪业带来巨大的经济损失。由于猪是弓形虫重要的中间宿主，通过摄食未煮熟的含包囊的猪肉制品可使人感染弓形虫病，从而严重影响猪肉品质并威胁人类的身体健康。应用弓形体胶体金快速检测卡操作简单，敏感性和特异性较高，结果判定直观，对操作人员要求不高，适合应用于养殖场、牧区等不具备实验室条件的基层单位使用。

1 材料和方法

1.1 试验材料

1.1.1 血清样品 对来源于不同养殖场的猪全血样本150份，通过直接涂片，姬姆萨染色镜检，以看到新月形滋养体即可初步判为阳性，结果检出阳性样本13份。全部全血样本分离出血清后低温保存备用。

1.1.2 检测试剂 弓形体抗体胶体金检测试剂盒（批号20170601），由深圳市绿诗源生物技术有限公司提供。

1.2 试验方法和结果判定

先将检测卡和待检血清恢复至室温。取出检测卡，用吸管吸取待检血清，滴2～3滴到加样孔；也可用移液器加70 μL血清到加样孔。室温条件下15 min内判定结果。若质控（C）线、检测（T）线均显色，表示血清样本中含有弓形体抗体；若检测（T）线不显色，仅质控（C）线显色，则表示血清样本中不含有弓形体抗体或其含量低于检测域值；若未出现质控（C）线，表明操作不正确或检测卡已失效。

2 结果

应用胶体金检测卡对150份猪血清样本进行检测，检测结果详见表1。

表1 应用胶体金法与直接涂片法检测猪血清样品的阳性率比较

结果显示，直接涂片法检出阳性样本13份，阳性率8.7%；胶体金法检测出阳性样本15份，阳性率10%。胶体金法与直接涂片法的符合率为98.7%。

3 分析与讨论

（1）根据《猪弓形虫病防治技术规程》（DB13 T 555—2004）中关于猪弓形体病的诊断和判定方法，直接涂片法是判定阳性动物的主要标准之一，但此法由于人为因素易造成漏检情况的出现。而胶体金法作为新型快速诊断方法，可以作为直接涂片法的补充和验证。

（2）根据试验结果，应用胶体金法较直接涂片法阳性率略高，说明前者的敏感性大于后者。在实际应用中，直接涂片法所需的试验器材较多，步骤繁琐，对检测人员要求较高，检出率较低；而胶体金检测卡操作简易高效，准确性较高，非专业人员也可操作，同时具有良好的特异性、敏感性、重复性和稳定性，适用于弓形体病早期检测和诊断，特别适合在基层推广应用。

（3）胶体金法不仅限于检测血清，还可以对当天采集的抗凝全血进行检测。在养殖场和牧区等不具备离心条件的场所可以应用，该方法将在新疆生产建设兵团第十二师逐步推广。