冯玉青, 黄素素, 罗 靖, 顾国龙
(广西中医药大学附属瑞康医院检验科,广西 南宁 530011)
尿路感染(urinary tract infection,UTI)是临床常见的感染性疾病之一,发病率仅次于呼吸道感染[1]。UTI的病原学诊断及治疗主要依靠中段尿培养和体外药物敏感性试验,中段尿培养和体外药物敏感性试验的检测时间≥48 h,对于临床诊断为细菌性感染的UTI患者,医生往往在获知病原菌药物敏感性试验结果前先进行经验性的抗菌药物治疗[2],这种治疗通常是广谱的(包含革兰阳性和革兰阴性细菌)。UF-1000i全自动尿液分析仪(简称UF-1000i)的细菌通道通过识别细菌的特异性核酸荧光染色,在30 min内即可报告尿样本中是否有细菌以及细菌是革兰阳性球菌还是革兰阴性杆菌。为了比对UF-1000i的细菌通道检测与中段尿培养的符合率,本研究对UTI患者的中段尿样本同时进行了中段尿培养和尿有形成分检测。
随机选取的981份中段尿样本均来自2016年7—12月广西中医药大学附属瑞康医院疑似UTI的患者,包括住院患者和门诊患者。
采用日本Sysmex公司生产的具有细菌通道的UF-1000i进行尿有形成分检测,采用法国生物梅里埃公司生产的Vitek 2 Compact微生物鉴定仪对中段尿培养的细菌进行鉴定,UF-1000i和Vitek 2 Compact微生物鉴定仪所用的试剂均为原装配套试剂。
用接种环取1 μL尿样本在血琼脂平板上进行接种培养,菌落数女性以>105CFU/mL为阳性,男性以>104CFU/mL为阳性。挑取阳性菌落在Vitek 2 Compact微生物鉴定仪上进行菌种鉴定;同一份尿样本在进行尿培养接种后,在具有细菌通道的UF-1000i上进行尿有形成分检测。
采用SPSS 19.0软件进行统计分析,符合率、敏感性、特异性均采用百分比(%)表示,革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌之间的比较采用χ2检验,以P<0.05为差异具有统计学意义。
在981份中段尿样本中有100份样本有多种细菌生长或菌落数量达不到诊断标准,被判断为污染,有13份样本同时感染2种细菌(混合感染)。剔除污染及混合感染样本后的有效样本为868份。868份尿样本分离培养出病原菌304株,阳性率为39.6%,其中革兰阳性球菌74株,占24.3%;革兰阴性杆菌150株,占49.3%;真菌80株,占26.3%。见表1。
以中段尿培养为金标准,UF-1000i的细菌通道检测革兰阳性球菌的符合率为90.7%,敏感性为60.8%,特异性为93.5%。UF-1000i的细菌通道与中段尿培养检测革兰阳性球菌的结果见表2。
表1 304株中段尿培养阳性细菌的构成比
表2 2种检测方法检测革兰阳性球菌的结果
以中段尿培养为金标准,UF-1000i的细菌通道检测革兰阴性杆菌的符合率为93.3%,敏感性为76.7%,特异性为96.8%。UF-1000i的细菌通道与中段尿培养检测革兰阴性杆菌的结果见表3。
表3 2种检测方法检测革兰阴性杆菌的结果
以中段尿培养为金标准,UF-1000i的细菌通道检测革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌的符合率、敏感性和特异性差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。
表4 UF-1000i的细菌通道检测革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌的比较 (%)
UTI的诊断主要依靠中段尿培养提供的病原学诊断。中段尿培养报告的检测时间≥48 h,临床医生在中段尿培养及体外药物敏感性试验报告发出之前往往选择广谱抗菌药物对患者进行经验性治疗,而UTI常见的致病菌为大肠埃希菌和肠球菌[3-4],前者为革兰阴性杆菌,后者为革兰阳性球菌,二者的治疗方案完全不同,这种经验性治疗方式容易出现治疗失败或治疗过度。2016年,Sysmex公司在UF-1000i中增加了细菌通道,通过识别细菌的特异性核酸荧光染色,在30 min内即可报告尿样本是否有细菌以及细菌是革兰阳性球菌还是革兰阴性杆菌。
本研究结果显示, UF-1000i的细菌通道与中段尿培养相比较,革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌的符合率、特异性均较高,说明UF-1000i的细菌通道在诊断UTI患者是革兰阳性球菌感染还是革兰阴性杆菌感染方面准确率较高,临床医生可以根据UF-1000i报告的革兰阳性球菌或革兰阴性杆菌选择抗菌药物对患者进行治疗,从而提高经验性治疗的成功率,避免治疗过度。但须注意的是,本研究发现,UF-1000i检测为革兰阳性球菌阳性而尿培养为革兰阳性球菌阴性的52例样本中,有22例(42.3%)为真菌感染。UF-1000i的细菌通道只能鉴别球菌和杆菌,尿样本中的真菌以念珠菌为主,念珠菌的孢子形态更像球菌,导致UF-1000i误把真菌判断为球菌。这提示在UF-1000i提示为革兰阳性球菌感染时,可参考类酵母细胞是否阳性进行真菌筛查[5],并通过尿沉渣镜检把真菌感染的可能性剔除。
UF-1000i的细菌通道与中段尿培养检测革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌的敏感性均不高(<80.0%),说明UF-1000i的细菌通道在UTI的筛查方面漏诊率较高。范宏佳等[6]报道,尿液常规检测中的白细胞、白细胞酯酶和亚硝酸盐三者联合诊断UTI的敏感性达到87.2%,可作为UTI的筛查手段。这提示在筛查UTI时,可联合尿液常规检测中的白细胞、白细胞酯酶、亚硝酸盐、革兰阳性球菌及革兰阴性杆菌进行综合分析,以达到UTI快速筛查和早期诊断的目的。
UF-1000i在革兰阳性球菌与革兰阴性杆菌的检测能力方面进行比较,无论是符合率、敏感性还是特异性,二者差异均有统计学意义(P<0.05),说明UF-1000i的细菌通道对于革兰阴性杆菌的检测能力优于革兰阳性球菌。UTI的主要病原菌为革兰阴性杆菌[3-4],UF-1000i对于革兰阴性杆菌的良好检测能力,对临床医生经验性选择抗菌药物治疗UTI起到了良好的指导作用。
综上所述,我们认为UF-1000i的细菌通道在UTI患者的早期针对性选择抗菌药物方面有较好的参考价值,特别是对革兰阴性杆菌感染引起的UTI,有更高的参考价值。当然,最终的病原学诊断及用药依据还是中段尿细菌培养和体外药物敏感性试验报告。
[1]SHIGEMURA K,TANAKA K,OKADA H,et al.Pathogen occurrence and antimicrobial susceptibility of urinary tract infection cases during a 20-year period(1983-2002) at a single institution in Japan [J]. Jpn J Infect Dis,2005,58(5):303-308.
[2]尿路感染诊断与治疗中国专家共识编写组. 尿路感染诊断与治疗中国专家共识(2015版)——尿路感染抗菌药物选择策略及特殊类型尿路感染的治疗建议[J]. 中华泌尿外科杂志,2015,36(4):245-248.
[3]吴芳芳,许纹,杨乐园. 962例尿培养病原菌分布及耐药性分析[J]. 检验医学,2014,29(8):806-808.
[4]徐瑾,吕婉飞,金海英. 泌尿系统感染患者病原菌分布与耐药性研究[J].中华医院感染学杂志,2015,25(12):2698-2700.
[5]丁志祥,蒋银芬,周伊兰,等. Sysmex UF-1000i尿有形成分分析仪对尿液真菌筛查的临床应用价值[J].检验医学,2013,28(4):290-292.
[6]范宏佳,汤瑾,王坚镪,等. 尿常规检测在尿路感染诊断中的价值[J]. 检验医学,2014,29(12):1207-1211.