侧柏叶中挥发性成分研究

周静宜+史梦珺+王金梅

摘 要：目的：分析側柏叶中挥发性成分。方法：（HS-SPME-GC/MS），结合保留指数法并用峰面积归一化法测定相对百分含量。结果：侧柏叶中鉴定出11个挥发性成分，占总峰面积的77.23%。结论：叶中主要成分为3-蒈烯（23.97%）、石竹烯 （11.06%）、α-蒎烯（9.12%）及α-石竹烯（8.26%）等。

关键词：侧柏；挥发性成分；固相微萃取；气质联用

中图分类号：O657 文献标识码：A 文章编号：1671-2064（2018）01-0183-02

侧柏（PlatycladusorientalisLinn.），为柏科侧柏属植物，产于辽宁、吉林、河南、湖北等地，常栽培用做庭院观赏树[1-2]。其种仁及叶均可入药，种仁具有养心安神、止汗、润肠功效；叶具有凉血止血、生发乌发等功效[3]。

目前，文献研究发现，侧柏中已分离得到的化合物种类有黄酮[4]、萜类、鞣质及挥发油等，且具有抗肿瘤[5]、抗炎[6-7]、抑菌[8]、抗氧化[9]及α-葡萄糖苷酶抑制[10]等活性。本文首次采用顶空固相微萃取-气质联用法对侧柏叶中挥发性成分进行分析，样品用量少，集采样、萃取、浓缩、进样于一体，具有快速分析、灵敏度高等优点，为进一步研究侧柏叶挥发性成分及其药理活性提供理论基础。

1 材料

1.1 仪器

GC 6890 N GC/5975 MS气相色谱-质谱联用仪（美国安捷伦公司）；手动固相微萃取（SPME）装置（美国Supelco公司）；萃取头为100μm聚二甲基硅氧烷（PDMS-DVB，美国Supelco公司）。

1.2 试剂

C6-C26正构烷烃（美国Alfa Aesar公司）。

1.3 药材

侧柏叶于2017年7月采集于河南省郑州市，经河南大学中药研究所李昌勤教授鉴定为侧柏（P.orientalis）的叶，标本存于河南大学中药研究所。

2 方法与结果

2.1 顶空固相微萃取

取侧柏叶0.7g，置于5mL进样瓶中，使其不接触PDMS-DVB纤维头（100μm），于50 ℃下顶空萃取30min，随后取出纤维头，立即插入GC-MS进样口（温度250℃），脱附1min。使用前，将萃取纤维头于GC-MS进样口（250℃）老化10min；载气体积流量为1.0mL/min。

2.2 GC/MS分析条件

色谱条件色谱柱：HP-5 MS石英弹性毛细管柱（0.10μm×30.0m×250μm），载气为高纯氦气（99.999%），流速1.0mL/min，进样口温度250℃；升温程序：色谱柱初始温度50℃（保持2.0min），以4℃/min升温至120℃（保持2min），最后以6℃/min升温至230℃（保持10min）。分流进样，分离比为10：1。

质谱条件：电子轰击（EI）离子源；电子能量80eV；电子倍增器电压1588V；离子源温度为230℃；四极杆温度150℃；传输线温度为280℃。扫描范围m/z 30-400amu。

2.3 保留指数（KI）测定

按照文献[11-12]，将色谱正构烷烃和样品（C6-C26）等量混合后，按上述GC-MS条件进行色谱分析，测定各正构烷烃和在完全相同的条件下样品的保留时间，通过测定各组分的保留时间从而计算出样品中各组分的Kovats保留指数。其计算公式为：

2.4 结果

用HS-SPME-GC/MS技术，从侧柏叶中分离鉴定出10个挥发性成分，占总峰面积的77.23%。具体结果见表1。

3 讨论

从表1可以看出，侧柏叶中主要挥发性成分是萜烯类化合物，包括3-蒈烯（23.97%）、石竹烯（11.06%）、α-蒎烯（9.12%）及α-石竹烯（8.26%）等。据报道，α-蒎烯具有比较浓郁的香气，含量为9.12%，且α-蒎烯具有较强的祛痰、抗炎和抑制肿瘤细胞增殖作用[13-14]。此外，β-水芹烯含量为4.14%。文献研究发现，β-水芹烯对麦蛾、玉米象成虫、赤拟谷盗成虫等储粮害虫具有一定的毒杀作用[15]，其可能为侧柏叶抑菌作用的主要活性成分。本文用HS-SPME-GC/MS法分析侧柏叶中挥发性成分，与雷华平等[16]等气质联用（GC-MS）分析结果有差异。据分析，这可能是因为我们所用侧柏叶药材的产地[17-18]以及采收时间[19]等因素影响所致，具体原因仍需要进一步研究。侧柏资源丰富，本文通过对其挥发性成分的研究，可为侧柏叶的开发利用提供了科学依据，但其挥发性成分与药效的相关性有待进一步的研究。

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