郭 兴 高智涛 王洪刚
(黑龙江省伊春林业科学院,伊春 153000)
北五味子(Schisandra chinensis)是主产于我国东北的传统中药材[1-2]。五味子中的药效物质主要为木脂素类化合物,果实中含量丰富,含量达到18.1%~19.2%[3],包括五味子素(Schisandrin)、五味子醇(Schisadrol)、去氧五味子素(Deoxyse-hisandrin)、Y-五味子素 (Y-Sehisandrin)及伪-Y-五味子素(Pseudo-Y-Sehisandrin)、五味子酯甲(Sehisantherin A)、五味子酯乙、丙、丁、戊(Shciasn-therni B、C、D、E)及五味子醇甲和醇乙等成分,具有多种保健功效[4]。
近年来黑木耳产业已极具规模,成为林区职工致富的优选项目,但经济效益却增长缓慢,主要是受原料、产品档次等多方面条件的限制[5]。本研究将五味子添加到黑木耳栽培原料中,通过黑木耳菌丝生长,吸收五味子中的中药成分,进而栽培出具有更多食用保健作用的黑木耳,为黑木耳产品品质和档次的提升奠定了基础。
五味子由伊春友好林业局栽培出产,挑选无霉烂的五味子,经烘干、粉碎处理,备用。
菌种为黑威15,由黑龙江省科学院微生物研究所提供。
试验药品主要有甲醇(分析纯)、氯仿(分析纯)、变色酸(分析纯)、五味子乙素(≥98%)。
1.2.1 试验配方
采用不同比例加入五味子(1.5%、3.0%、4.5%、6.0%、7.5%、9.0%、10.5%共7个配比),分别添加到黑木耳栽培原料中,按黑木耳正常生产方式进行拌料、装袋等生产操作,各组配方见表1。
表1 试验配方
1.2.2 生产、栽培、管理
每组配方制作100袋(料袋规格15cm×30cm),经高压蒸汽灭菌,在126℃、1.2 kg/cm2的工艺条件下保持3.5~4 h,然后分别接种黑威15二级种,置于20~25℃温度下的菌房进行培养。待黑木耳菌丝长满袋后,进行催耳、挂袋管理,并按照配方进行单独晾晒、单独保存。
1.2.3 总木脂素含量的测定
1.2.3.1 标准曲线的制作
精确称取五味子乙素5.0 mg,置于10 mL量瓶中,加氯仿至定容刻度线,分别吸取 20、40、60、80、100 μL注入20 mL试管中;另在空白试管中加入100μL氯仿,待氯仿挥发后,依次加入10%变色酸水溶液 0.5 mL、浓硫酸3.0 mL、蒸馏水1.5 mL,摇匀,沸水浴30 min。此时溶液为紫红色,用流水冷却,在紫外光570 nm处测定吸收度,建立回归方程[4]。
1.2.3.2 总木脂素测定
在不同配方中随机抽取一定量的黑木耳进行总木脂素含量检测。精密称取经过烘干、粉碎的黑木耳细粉1 g,加甲醇25 mL,采用功率250 W、频率20 kHz超声波对其进行超声处理;30 min后,甲醇有一定损失,将其补回到原来的体积。静置30 min后,取上清液过滤,把滤好的溶液2 mL用甲醇将其稀释至10 mL容量瓶中,之后让其自然干燥。最后依次加入变色酸1mL、浓硫酸7mL、蒸馏水4mL,并摇匀。完成上述操作后,贴上封口膜,置于沸水浴中30 min,待冷却后用紫外光测其吸光度[4]。
在不同配方中各抽取10袋,观察黑木耳菌丝生长情况,结果(表2)显示,五味子不同添加比例的各组配方,菌丝生长比空白对照组均有提高,且菌丝白、粗壮、浓密。经对比观察,添加五味子量以4.5%~7.5%的比例较适宜。
表2 各组配方黑木耳菌丝生长情况比较
由表3可知,五味子的添加对提高黑木耳产量具有促进作用。7组配方的黑木耳产量比空白对照组分别提高了 22.68%、30.00%、33.96%、40.56%、48.65%、32.62%、24.26%;绝对生物转化率比空白对照组分别提高13.13%、13.91%、14.33%、15.04%、15.90%、14.18%、13.29%。
表3 黑木耳出耳、产量的比较
对制备好的试样在紫外光570 nm处测定其吸光度,建立标准曲线(图1)及回归方程。
图1 标准曲线
通过进行紫外检测及数据分析处理,建立如下回归方程
试验结果(表4)显示,添加1.5%、3.0%、4.5%、6.0%、7.5%、9.0%、10.5%五味子的各组配方,黑木耳中总木脂素含量比空白组分别提高28.80%、79.98%、121.14%、163.84%、199.08%、228.40%、245.05%。由此看出,通过添加五味子,提高了各配方黑木耳总木脂素的含量;配方5号(五味子添加比例为7.5%)的单袋总木脂素含量最高。
表4 添加不同比例五味子产出的黑木耳总木脂素含量
试验结果证明,黑木耳栽培原料中添加五味子可以提高产品的产量和营养含量,使产出的黑木耳含有更多的营养成分总木脂素;培养料中添加7.5%的五味子可使产出的黑木耳产量达到55.64 g/袋,比空白对照产量增加48.65%;总木脂素含量达到29.28 mg/g,较空白对照提高199.08%,提升了黑木耳的保健效果;平均每袋黑木耳可产出1 629.14 mg总木脂素。
[1] 李爱民.北五味子及其研究进展[C].奥岩松,于泽源.96黑龙江园艺进展[M].哈尔滨:哈尔滨工程大学出版社,1996.
[2] 李爱民.北五味子果实成熟期营养成分变化的研究[J].特产研究,2004,22(3):8-10.
[3] 仰榴青,吴向阳,徐佐旗.五味子及其制剂中木脂素类成分含量测定的研究进展[J].中国中药杂志,2005,30(9):650-653.
[4] 张喜军.五味子酒及饮料中五味子素变化规律的研究[D].长春:吉林农业大学硕士论文,2011.
[5] 高金辉,王维剑,张厚良,等.四种木质栽培原料对黑木耳生长性状的影响[J].森林工程,2015,31(1):43-45.