扬州地区烟粉虱生物型检测及发生动态

刘晓娜+杜以梅+杜予州

摘要：连续2年检测扬州地区烟粉虱生物型，并对其危害程度和发生动态进行系统调查，以期为扬州地区烟粉虱的防治提供依据。利用细胞色素氧化酶I（cytochrome axidase I，简称COI）分子标记检测扬州地区烟粉虱的生物型，采用定时定点的方法调查烟粉虱的危害程度和发生动态。结果表明，2014年和2015年扬州地区发生的烟粉虱均为Q型；烟粉虱从6月初到11月初在主要蔬菜上的危害等级一直保持在4级，在其他时间的危害程度不高。2014年扬州地区大棚蔬菜上的烟粉虱始见于4月上旬，消亡期为12月下旬，在7月下旬有1个危害高峰；2015年烟粉虱始见期为4月中下旬，到11月底仍有烟粉虱危害，其间有2个危害高峰，分别在5月底至6月初和7月底至8月中旬。2014年扬州地区烟粉虱的发生危害及虫口密度高于2015年，其发生的虫口密度在不同年份之间有波动，而且在不同的月份之间也存在差异。

关键词：烟粉虱；生物型；危害程度；发生动态；扬州市

中图分类号： S433.39文献标志码： A文章编号：1002-1302（2017）23-0100-03

该虫为多食性害虫，寄主范围广，寄主适应性强，在热带、亚热带和温带地区一年发生11～15代，具有世代重叠的特性。烟粉虱可以在温暖地区的野外杂草和花卉上越冬，但在寒冷地区的烟粉虱则主要在保护地作物上越冬。烟粉虱是一类快速进化的复合种，其中B型烟粉虱（也称Middle East-Asia 1）和Q型烟粉虱（Mediterranean）在全球范围内危害较为严重，入侵性也最强[1-2]。2001年在扬州地区首次发现B型烟粉虱，随后在江苏地区迅速扩散危害，造成严重的经济损失[3]。但2005年在江苏省发现Q型烟粉虱后，Q型烟粉虱的种群数量逐年增加，而B型烟粉虱的种群数量却逐年递减，到2010年Q型烟粉虱已成为优势种[4]。孙伟等连续多年对江苏省范围内烟粉虱的发生危害进行调查发现，烟粉虱的发生危害不仅在不同年份之间存在波动，而且在不同地区之间也存在着显著差异[5-6]。为进一步了解和掌握扬州地区烟粉虱生物型及全年的发生危害动态，于2014、2015年对扬州不同地区烟粉虱的生物型进行检测，并以扬州蒋王蔬菜基地作为系统调查点，对烟粉虱在其主要嗜好寄主植物上的发生危害动态做详细的调查，以期为扬州地区烟粉虱综合防治提供科学依据。

1材料与方法

1.1扬州地区烟粉虱生物型检测

1.1.1材料供试虫源：于2014、2015年在扬州市邗江区、广陵区、江都区、高邮市、仪征市、宝应县的番茄（Lycopersicon esculentum）、黄瓜（Cucumis sativus）、辣椒（Capsicum annuum）、茄子（Solanum melongena）等主要蔬菜和过渡寄主葎草（Humulus scandens）上采集烟粉虱成虫。将采集到的样本浸泡于装有无水乙醇的1.5 mL Eppendorf管中，于-20 ℃条件下保存。

主要试剂有蛋白酶K、rTaq DNA聚合酶、10×Buffer，购自宝生物工程（大连）有限公司；dNTPs，购自中美泰和生物技术（北京）有限公司。

1.1.2方法采用细胞色素氧化酶I（cytochrome axidase I，简称COI）分子标记快速检测法，该方法引用福建省农业科学院植物保护研究所申请的专利201110413571《烟粉虱生物B型和Q型特异性引物和快速鉴定方法》。这个专利主要针对B型和Q型分别设计了2对特异性引物，构建了一套适合烟粉虱生物型快速鉴定的双引物PCR扩增体系。该方法可以快速鉴定田间外来入侵烟粉虱的生物型。若该方法不能检测出烟粉虱样本的生物型，笔者采用通用引物，即上游引物 C1-J-2195（5′-TTGATTTTTTGGTCATCCAGAAGT-3′）和下游引物L2-N-3014（5′-TCCAATGCACTAATCTGCCATA

TTA-3′）对烟粉虱mtDNA COI基因进行扩增并送中美泰和生物技术有限公司测序，将测序结果进行Blast比对分析，确定其生物型。本研究共检测扬州地区288个样本。

1.2扬州地区烟粉虱危害程度及发生动态调查

于每年2月开始定期对扬州市蒋王蔬菜基地的番茄、茄子、辣椒进行系统调查，每7 d调查1次。对不同的寄主均采用“Z”字形5点采样，每点随机调查5株，每株分别摘取上、中、下3张叶片，将不同寄主的叶片放入不同的袋子中带回实验室进行镜检，记录每张叶片中烟粉虱卵、若虫和伪蛹的数量以及叶面积，然后折算成单位叶面积的虫口密度并划分危害等级。具体方法：（1）将烟粉虱的危害程度划分为5级。（2）设定1个标准叶面积为10 cm2。调查时，将调查叶片的平均叶面积换算为标准叶面积。（3）以1个标准叶面积上的平均烟粉虱数量（卵、若虫和伪蛹的总数量）为分级单位，即虫量（头）/标准叶面积。（4）分级标准[平均虫量（头）/标准叶面积（10 cm2）]：0级为无虫，1级≤1头/10 cm2，2级为2～3头/10 cm2，3级为 4～6头/10 cm2，4级≥7头/10 cm2，分别记为“-”“+”“++”“+++”“++++”。

2结果与分析

2.1扬州地区烟粉虱生物型检测

連续2年对扬州市邗江区、广陵区、江都区、高邮市、仪征市、宝应县蔬菜基地不同寄主植物上的烟粉虱进行生物型检测。结果表明，扬州地区主要蔬菜和过渡寄主葎草上的烟粉虱均为Q型烟粉虱，没有发现B型烟粉虱（表1）。这表明扬州地区主要蔬菜上的B型烟粉虱已被Q型所取代。

2.2扬州地区烟粉虱的发生危害程度

2014年的调查数据表明，扬州地区烟粉虱4月初开始在番茄上出现，至5月初危害较轻，危害程度一直保持在1级；5月中旬危害开始逐渐加重，危害程度上升至2级，5月下旬后危害程度升至4级，其危害在7月中旬达到高峰，与蔡力等2013年的调查结果[7]相比提前40 d左右，此间主要种植的蔬菜有番茄、茄子和黄瓜等；从5月下旬至10月底，烟粉虱在番茄、茄子、黄瓜等主要蔬菜上的危害程度一直维持在4级水平；从11月初开始，烟粉虱的危害程度开始下降，此时已开始种植下一季番茄，11月10日左右危害程度降为3级，到11月末烟粉虱的危害程度降到1级，直到12月中旬调查结束。endprint

2015年的调查数据表明，烟粉虱从4月中下旬开始在番茄上发生，较2014年发生晚，直到5月中旬，危害程度一直处在1级；5月中下旬危害程度开始上升至2级，此时寄主蔬菜主要以番茄为主；从5月下旬开始，烟粉虱的危害程度迅速上升至4级，直到10月初，此时除了种植番茄以外还有黄瓜、茄子等蔬菜；从10月中旬开始危害程度降为3级，此时大棚里主要种植的是茄子、豇豆等蔬菜；此后到12月初，烟粉虱主要转至十字花科蔬菜危害，其危害程度较轻，危害级别为1级。

从扬州地区2014年和2015年的调查数据可以看出，烟粉虱在番茄、茄子、黄瓜等主要蔬菜上的危害程度趋势基本一致，但2015年较2014年发生晚，发生危害程度略轻。

2.3扬州地区烟粉虱的发生动态

2014年的调查结果表明，从4月3日发现烟粉虱到5月中下旬，在叶片上的虫口密度一直很低，为0.03～0.15头/cm2；从5月底开始，烟粉虱的虫口密度开始增加，为 0.83头/cm2 左右；在6月20日至7月24日的1个月时间里，虫口密度由4.09头/cm2迅速增长为30.68头/cm2，达到危害最高峰，此间田间主要种植茄子；随后虫口密度迅速下降，到8月9日虫口密度降至3.64头/cm2；此后烟粉虱的虫口密度除了在10月27日有小幅度的增长外，一直维持在较低水平，为0～0.59头/cm2，直到调查结束（图1）。

2015年的调查数据表明，4月18日开始发现烟粉虱危害番茄，直到5月22日，叶片上的虫口密度一直不高，在 0.02～0.36头/cm2之间；到5月下旬至6月初，发生危害形成1个小高峰，其虫口密度在6月6日达到4.11头/cm2，此时田间主要种植番茄；6月中旬番茄收获，主要寄主更换为黄瓜，虫口密度有所下降，6月12日的虫口密度为 1.08头/cm2。随后20 d左右的时间，虫口密度没有大幅变化，在2.35～2.77头/cm2；7月10日虫口密度达到1个月之内的最小值为0.75头/cm2；7月中旬以后，烟粉虱的危害加重，虫口密度快速上升，8月7日达到最高峰，虫口密度为1472头/cm2；随后，虫口密度迅速下降，到8月28日虫口密度降到2.77头/cm2，之后的虫口密度逐渐下降，此间烟粉虱的寄主蔬菜主要是茄子；在10月30日茄子收获后，大多数烟粉虱转到在十字花科蔬菜上危害，但数量很少（图2）。

从调查的数据可以看出，2014年扬州地区烟粉虱危害高峰期的虫口密度明显高于2015年的，是2015年的2倍多；2014年烟粉虱只出现了1个明显的危害高峰，而2015年则出现了2个危害高峰，1个危害高峰期在5月底至6月初，另1个危害高峰期在7月底至8月中旬， 出现的时间和2014年

基本一致。

3讨论

2001年，在扬州仪征花卉生产基地的一品红上首次发现B型烟粉虱，这也是江苏省的首例[3]，随后其不断的扩散，给农业生产造成了严重的损失。2005年江苏省检测到Q型烟粉虱，此后Q型烟粉虱的种群数量逐年递增，而B型烟粉虱却逐年递减[4]。2008—2013年扬州地区都未检测到B型烟粉虱[7]，2014—2015年的检测结果也同样如此。短短几年的时间，扬州地区B型烟粉虱完全被Q型烟粉虱所取代，可能的原因有：（1）Q型烟粉虱有更强的寄主适应性，杂草是Q型烟粉虱的主要寄主，这一点在调查中也有体现[8-9]；（2）有研究报道，Q型烟粉虱对新烟碱类农药有更强的抗性[10]；（3）可能与扬州地区蔬菜种植布局及品种有关。由于目前扬州地区烟粉虱都为Q型，它对新烟碱类农药更有抗性，所以在对其进行化学防治时，应注意不同药剂之间合理的混用轮用，以延缓抗性产生。

调查结果表明，2014、2015年扬州地区烟粉虱的危害动态大体一致，5月中旬之前危害程度一直为1级，从6月初到11月初一直保持4级的危害程度，这与孙伟等的调查结果[5，11]一致。通过2年的种群动态调查可以看出，2014年扬州地区烟粉虱危害高峰期的虫口密度明显高于2015年，是2015年的2倍多；2014年在扬州蒋王蔬菜基地的烟粉虱只出现了1个危害高峰，而2015年则出现了2个危害高峰，这可能与扬州地区这2年的天气（温度、湿度、降水和风等）和寄主蔬菜的生长状况等因素有关。因为温度、湿度可以影响烟粉虱的生长发育、存活和繁殖[12-13]，也可以影响寄主蔬菜的生长状况，从而影响烟粉虱的发生动态。而2014年扬州地区早春的平均气温高于2015年，有利于烟粉虱的发生危害。扬州地区2015年的降水量明显高于2014年，且在4月中旬、5月中旬至7月中旬以及8月上旬出现多个持续降水天气，这一天气条件不利于烟粉虱发生危害。此外，由于扬州蒋王蔬菜基地温室设施老旧，防雨、保温、保湿的效果较差，而2015年雨水较多，寄主蔬菜受涝害较重，长势较差。这些因素导致2014年烟粉虱的发生危害和虫口密度明显高于2015年。

值得注意的是，烟粉虱在-2 ℃以下时开始出现死亡，随着温度的下降和处理时间的延长，烟粉虱的死亡率迅速上升，-6 ℃时烟粉虱处理7 h以上全部死亡[12]。而在扬州地区，最低气温是要低于烟粉虱致死温度的，且持续时间较长，故在扬州地区烟粉虱只能在温室中越冬，不能在野外越冬。因此，在防治温室大棚内的烟粉虱时，要注意保持棚内空气流通，适当掀开大棚的薄膜以降低棚內温度，有效地抑制烟粉虱的生长繁殖。通过调查发现，在寄主轮换时烟粉虱数量骤减，而在蒋王地区作物的种植是没有间隔期的，这就导致烟粉虱种群数量骤减后又迅速增长。因此，在烟粉虱的防治工作中，要注意彻底清理残枝落叶，减少危害下一茬作物的虫源基数，适当调整作物种植间隔期。

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