MTA1、RECK在结肠息肉癌变过程中的表达及意义

吴义娟 陈现亮 吕 卓 赵慧敏 韩宝娟

(河北医科大学附属邢台人民医院消化内科，河北 邢台 054000)

结肠息肉是一种结肠的良性肿瘤，是结肠癌的癌前病变，息肉的病理类型与息肉恶变密切相关，积极诊断和治疗结肠息肉是控制、减少结肠癌发病的重要途径。但目前结肠息肉癌变的机制研究较少，且其具体机制尚不明确。近年来许多研究结果显示肿瘤转移相关基因(MTA)1、逆转诱导的富含半胱氨酸，含有kazal域的蛋白(RECK)与多种恶性肿瘤的发生、发展、浸润和转移密切相关〔1～5〕。本研究采用免疫组织化学法(SABC)检测不同病理类型结肠息肉及结肠癌中MTA1、RECK的表达，探讨其在结肠息肉癌变过程中的作用。

1 材料与方法

1.1临床资料 2010～2015年邢台市人民医院肿瘤外科手术切除结肠癌标本104例，男79例，女25例，年龄31～83岁，平均61.24岁；肠镜活检结肠息肉标本114例(绒毛状腺瘤44例，管状腺瘤70例)，男82例，女32例，年龄28～74岁，平均56.66岁；正常结肠黏膜组织30例，男18例，女12例，年龄20～70岁，平均58.42岁。

1.2方法 免疫组化染色按SABC试剂盒操作说明书进行。鼠抗人MTA1单克隆抗体购自美国Santa Cruz公司，羊抗鼠辣根过氧化物酶标记二抗；兔抗人RECK单克隆抗体购自福州迈新生物技术开发有限公司，工作浓度为即用型；防脱片剂3-氨丙基三乙氧硅烷(APES)及二氨基联苯胺(DAB)显色剂均购自北京中杉生物技术有限公司；以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作为阴性对照，用已知的阳性切片作为阳性对照。

1.3结果判断 MTA1蛋白阳性表达于细胞核，表现为棕黄色颗粒；RECK蛋白在胞质或胞核呈棕黄色着色为阳性表达。病理染色标本均由2名病理医师判断，判断标准：染色强度按棕色的深浅可分为0分、1分、2分及3分，阳性细胞比例0%为0分、1%～30%为1分、31%～60%为2分、>60%为3分；最后将着色强度及着色范围相加，0～2分为阴性，3～6分为阳性。

1.4统计学处理 应用SPSS13.0软件进行χ2检验。

2 结 果

2.1MTA1、RECK在不同结肠黏膜组织中的表达 MTA1在正常结肠黏膜、管状腺瘤、绒毛状腺瘤、结肠癌组中的阳性表达率分别为84.61%(88/104)、63.64%(28/44)、42.86%(30/70)、6.67%(2/30)；结肠癌与绒毛状腺瘤间差异有统计学意义(P<0.05)，绒毛状腺瘤与管状腺瘤间差异有统计学意义(P<0.05)，管状腺瘤与正常结肠组织间差异有统计学意义(P<0.05)，即由正常结肠组织、管状腺瘤、绒毛状腺瘤至结肠癌中MTA1阳性表达率呈逐渐上升趋势。RECK在正常结肠黏膜、管状腺瘤、绒毛状腺瘤、结肠癌组中的阳性表达率分别为100.00%(30/30)、78.57%(55/70)、77.27%(34/44)、53.85%(56/104)；结肠癌与绒毛状腺瘤间差异有统计学意义(P<0.05)，绒毛状腺瘤与管状腺瘤间差异有统计学意义(P<0.05)，管状腺瘤与正常结肠组织间差异有统计学意义(P<0.05)，即由正常结肠组织、管状腺瘤、绒毛状腺瘤至结肠癌中RECK阳性表达率呈逐渐下降趋势。

2.2MTA1、RECK在结肠息肉癌变过程中的表达 在结肠息肉中MTA1的阳性表达率分别为39.02%(32/82，轻度)、81.25(26/32，中重度)，差异有统计学意义(P<0.05)。RECK在结肠息肉(轻度异型增生)、结肠息肉(中重度异型增生)的表达率分别为90.24%(74/82)、46.88%(15/32)，中重度异型增生结肠息肉中RECK阳性表达率明显低于轻度异型增生结肠息肉，差异有统计学意义(P<0.05)。

3 讨 论

MTA1是1993年Pencil等〔6〕应用差异杂交技术从具有转移潜能的鼠乳腺癌细胞株13762NF中筛选克隆出来的基因，通过影响染色质的状态来调节转录，调控组蛋白脱乙酰基从而发挥其生物学作用。MTA1是MTA家族的一员，其与肿瘤的侵袭和转移密切相关〔7～9〕。MTA1是一种关键的癌蛋白，有研究显示MTA1在人类肿瘤中表达上调，其高表达与肿瘤的高侵袭特征如高病理分级、血管形成和预后不良等相关。MTA1 可能通过以下机制在肿瘤发展进程中发挥作用：①MTA1 基因与组蛋白去乙酰化酶结合重塑染色质的结构，实现转录相关蛋白的下调〔10〕；②MTA1 基因能够改变细胞角蛋白纤维系统，使细胞获得更强的侵袭及转移特征〔11〕。本研究结果提示MTA1的高表达是结肠腺癌发展过程中的早期事件。

RECK基因是1998年Takahashi等〔12〕在v-Kiras转染的NIH3T3细胞中发现的一种新的肿瘤抑制基因，具有抑制基质金属蛋白酶表达与活性的功能。研究表明，RECK基因的表达受多种癌基因的调控〔13〕。在9号染色体短臂上，特别是RECK基因定位的9p13-p12区域上的基因，与许多肿瘤的发生、发展及浸润转移密切相关。近年来研究显示RECK基因参与了许多肿瘤的发生和发展，包括肺癌、肝癌、头颈部鳞状细胞癌、乳腺癌及膀胱异型细胞癌等〔14～19〕。且该基因与恶性肿瘤的浸润、转移和预后密切相关。本研究结果提示MTA1、RECK参与正常组织、癌前病变、癌组织的发生、发展，在结肠息肉的癌变过程中起重要作用。