广西肝癌高发区人群机体免疫水平与HBV感染的关系

2018-01-19 10:54梁新强宁淑芳刘海洲王海燕唐亚梅张力图利基林
临床医药文献杂志(电子版) 2017年72期
关键词:高发区健康人亚群

梁新强,宁淑芳,刘海洲,王海燕,唐亚梅,张力图,崔 英,利基林*

(广西医科大学附属肿瘤医院,1.实验研究部;2.教务科,广西 南宁 530021)

原发性肝癌(primary liver cancer,PLC)是我国甚至全世界最常见的恶性肿瘤之一,据我国2010年肿瘤登记资料统计,广西肝癌的发病率和死亡率分别为43.76/10万和38.52/10万,均高于全国的28.71/10万和26.04/10万水平[1],肝癌的发生是多因素、多步骤的过程,其最主要的生物危险因素是乙型肝炎病毒(HBV)感染[2-3]。在广西肝癌高发区,我们应用流式细胞术(FCM)检测715例人员外周血淋巴细胞亚群的表达水平和NK细胞活性,同时以100例健康人作为对照,以了解高发区人群的免疫状态,对肝癌的防治提供参考依据,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象

715例肝癌高发区人员为广西扶绥县城乡居民,男459例,女256例,28~61岁,平均45.1±8.2岁,其中有HBV感染者574例,无HBV感染者141例。100例健康对照者为同期献血人员,男61例,女39例,25~55岁,平均42.5±7.9岁。组间性别构成比和年龄,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2 仪器与试剂

流式细胞仪为Epics XL型,COULTERQ-PREP型自动溶血仪,ABC溶血素,鼠抗人单克隆抗体CD 45/CD4/CD8/CD3、CD45/CD(16+56)/CD19/CD3,上述仪器与试剂均为美国Beckman coulter公司生产;血清HBsAg检测使用上海科华生物有限公司生产的试剂盒。

1.3 方法

分别于清晨空腹抽取肘静脉血5 mL,其中2.5 mL置于含乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)的抗凝管中,另外2.5 mL置于普通生化管中。从抗凝管中吸取100 μl全血分别与荧光素标记的鼠抗人单克隆抗体CD45/CD4/CD8/CD3、CD45/CD(16+56)/CD 19/CD3 20μl混匀、同型对照IgG各20 μL混匀,避光反应(室温)30 min,溶血后1 h内上机完成检测。上机后圈出拟测定的淋巴细胞群,每次捕获取10000个细胞,双参数分析淋巴细胞表面标记,计算出CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、NK和CD3+CD19+细胞的百分比含量;分离出生化管中的血清,用于检测HBsAg,严格按说明书操作。

1.4 统计学分析

应用SPSS 18.0统计学软件对数据进行分析处理,计量资料以“±s”表示,采用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 肝癌高发区人员外周血淋巴细胞亚群表达水平和NK细胞活性与健康人比较

与健康人比较,高发区人员外周血CD3+/CD8+升高,CD3+/CD19+下降,差异有统计学意义(P<0.01);CD3+、CD3+/CD4+和NK细胞活性,差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 肝癌高发区人员外周血淋巴细胞亚群表达水平和NK细胞活性与健康人比较(±s,%)

表1 肝癌高发区人员外周血淋巴细胞亚群表达水平和NK细胞活性与健康人比较(±s,%)

组别nCD3+CD3+/CD4+CD3+/CD8+NKCD3+/CD19+高发区人员71569.31±11.8935.11±10.2329.28±11.6015.70±8.303.02±2.68健康人对照10069.63±10.5335.70±7.2924.69±6.0616.97±5.2213.62±3.90 t 0.25550.55713.8821.4894.967 P 0.79840.57760.0010.13690.0000

2.2 肝癌高发区人员有无HBV感染者外周血淋巴细胞亚群的表达水平和NK细胞活性比较

在高发区人群中,有感染乙型肝炎者和无感染乙型肝炎者比较,各项指标的,差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 肝癌高发区人员有无HBV感染者外周血淋巴细胞亚群的表达水平和NK细胞活性比较(x±s,%)

3 讨 论

肝癌的发生是多因素、多基因、多阶段作用的结果,至今病因尚未完全确认。有研究[2-3]表明,HBV、黄曲霉毒素B1摄入和饮用水源污染等是肝癌的主要危险因素,HBV感染人员患肝癌的危险性是阴性人员的25~37倍,肝癌高发区人群HBsAg阳性率高达17.83%,远高于全国9.09%的平均水平,差异有统计学意义(P<0.01)。

乙型肝炎免疫应答的主要途径是以CD8淋巴细胞为主导的细胞免疫,T细胞清除实验数据表明,CD8 T细胞是与病毒清除直接有关的细胞亚群,在清除病毒过程中起到关键的作用,慢性乙型肝炎患者CD3+/CD8+T细胞百分率显著上升,与肝炎病毒的复制密切相关。本研究显示,肝癌高发区人群外周血CD3+/CD8+升高,CD3+/CD19+下降,表面机体感染HBV后,由于病毒复制,从而导致CD3+/CD8+T细胞百分率上升,而对血液中HBV的杀灭,又使得CD3+/CD19+下降。但CD3+/CD8+升高和CD3+/CD19+下降却与机体是否感染HBV无关,对非HBV感染者如何解析?是什么因素导致该地区人群外周血普遍CD3+/CD8+升高,值得我们进一步研究。

[1] 左婷婷,郑荣寿,曾红梅,等.中国肝癌发病状况与趋势分析[J].中华肿瘤杂志,2015,37(9):691-696.

[2] 高 蕊,刘中景,陈 菲,等.乙型肝炎相关性原发性肝癌相关危险因素的Logistic回归分析[J].临床肝胆病杂志,2014,30(4):370-372.

[3] 薛万江,冯 盈,李 鹏,等.肝细胞癌组织中Ras相关结构域家族1A基因甲基化与环境因素的关系[J].中华实验外科杂志,2012,29(4):650-652.

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