蒙药材黑冰片吸附内毒素与活性炭作用的比较研究△

李甫泉 常 亮 陈广荣 金 辉 魏艳沛 白音夫 冯国庆 刘 静

(1.内蒙古自治区中医医院，内蒙古 呼和浩特 010020； 2.内蒙古国际蒙医医院，内蒙古 呼和浩特 010065； 3.内蒙古医科大学附属人民医院，内蒙古 呼和浩特 010010)

内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁外层的组成部分，主要成分为脂多糖，是细菌感染后的主要致病因素。黑冰片为炭化后的野猪粪，其作用原理不明确。本文采用鲎试剂法测定黑冰片对内毒素的吸附作用[1]，并与活性炭吸附作用进行比较。

1 材料

1.1 试剂 内毒素工作标准品(中国食品药品检定研究院)，鲎试剂(厦门市鲎试剂实验厂)，活性炭(张家口活性炭厂)，黑冰片(内蒙古阿尔泰药材公司)。

1.2 仪器 TGL-16型高速离心机(上海医用分析仪器厂)，SHZ88-1型台式水浴恒温振荡器(江苏太仓鹿河生化仪器厂)，AL204电子天平(瑞典)，DNM-9602酶联免疫检测仪(北京普朗新技术有限公司)，移液器(德国Eppendorf)，离心管(美国corning)，所有玻璃器皿均250°干燥2h，以除去外源性内毒素；塑料器皿均为密封包装无污染的一次性用品。

2 方法与结果

2.1 黑冰片用量对内毒素吸附作用 取内毒素标准液1EU·mL-1、10EU·mL-1各5mL加入至含有取预先经250°处理2h后的黑冰片与活性炭的试管内，黑冰片终浓度为2%、4%、8%、12%，活性炭终浓度为0.5%、1%、2%、3%，振摇10min后，离心2000转/min，取上清液，按鲎试剂盒使用说明书操作，用移液器取反应液，加到酶联免疫检测仪的测定板微孔内测定内毒素含量，并计算吸附率：[(吸附前的内毒素含量-吸附后的内毒素含量)/吸附前内毒素含量]×100%。结果，内毒素标准液1EU·mL-1、10EU·mL-1，黑冰片终浓度2%、4%、8%、12%，对内毒素吸附率23%、63%、97%、97%和20%、60%、95%、95%；活性炭终浓度0.5%、1%、2%、3%，对内毒素吸附率32%、90%、99%、99%和41%、95%、98%、99%。

2.2 黑冰片作用时间对内毒素吸附作用 取上述内毒素标准液，分别加入终浓度8%黑冰片，2%活性炭，振摇0min、5min、10min、20min，按上法处理测定液体内内毒素含量并计算吸附率。结果内毒素标准液1EU·mL-1、10EU·mL-1，作用时间0、5、10、20(min)，黑冰片对内毒素吸附率分别为5%、70%、97%、97%和7%、70%、96%、96%；活性炭对内毒素吸附率分别为12%、82%、99%、99%和21%、88%、99%、99%。

2.3 不同温度黑冰片对内毒素吸附作用 取1EU·mL-1、10EU·mL-1内毒素标准液，分别加入成终浓度8%黑冰片，2%活性炭，在20℃、37℃分别振摇10min，按上法处理，测定液体内内毒素含量并计算吸附率，结果表明，黑冰片与活性炭作用温度在20℃、37℃无明显差异，内毒素吸附率分别为98%、97%和99%、99%。

2.4 吸附作用后对家兔致热作用 选取体温正常家兔20只，体重1.5～2kg，测定体温，均分4组，对照组、模型组、黑冰片与活性炭组。对照组耳iv 0.5mL/kg生理盐水，模型组iv0.5mL/kg1EU·mL-1，黑冰片与活性炭组分别iv黑冰片与活性炭吸附后1EU·mL-10.5mL/kg，观察对家兔致热效果。结果，对照组致热前体温38.1±0.6(±s，℃)，致热后1h、2h、3h、5h、8h体温分别为38.1±0.5、38.2±0.6、38.1±0.4、37.8±0.5、37.9±0.6；模型组致热前体温38.2±0.5，致热后体温分别为39.4±0.5(P<0.05)41.2±0.4(P<0.01)、40.7±0.7(P<0.01)、40.2±0.5(P<0.05)、39.7±0.7(P<0.05)；黑冰片组致热前体温37.9±0.6，致热后体温分别为38.2±0.6、38.4±0.3、38.1±0.3、38.3±0.7、38.4±0.3；活性炭组致热前体温37.8±0.4，致热后体温分别为38.3±0.7、38.2±0.5、38.1±0.6、38.2±0.8、38.3±0.3。

3 讨论

实验表明，黑冰片与活性炭用量对细菌内毒素的吸附作用呈正相关，黑冰片吸附内毒素作用低于活性炭。震荡作用10min，黑冰片可把液体内的细菌内毒素大部分吸附，作用温度对黑冰片的内毒素吸附作用差异不大。经吸附后的内毒素溶液对家兔体温无明显致热作用，表明，黑冰片主要作用原理与活性炭作用一致。

活性炭是由含碳物质作为原料，经高温脱水碳化和活化而制成的多孔性疏水性吸附剂。活性炭具有比表面积大、高度发达的孔隙结构，1g活性炭材料中微孔，将其展开后表面积可高达800～1500m2，同时活性炭孔径内“范德华力”的作用极大增加活性炭吸附作用力。黑冰片为晾干后的野猪粪经高温脱水碳化，野猪粪主要成分为碳水化合物，含有少量的无机盐类，这与活性炭制作原料及制作过程一致，上述实验也证明，黑冰片对内毒素的吸附作用，可认为，黑冰片的作用原理与活性炭作用原理一致，即通过对体内有害物质的吸附作用，缓解临床症状，同时可能，黑冰片中少量无机盐类参与临床的治疗作用。黑冰片吸附作用弱于活性炭，其原因可能源于两者脱水炭化处理过程的不同。所以，为提高黑冰片临床疗效，可委托活性炭生产厂按活性炭工艺加工炮制黑冰片。

[1]肖贵南，程朝辉，盛英美.活性炭吸附细菌内毒素作用研究[1].中国药房，2010,21(5)：443