紫叶酢浆草鳞茎愈伤离体培养研究

戚华沙 符瑞侃 黄赛 吕德任 王景飞 潘梅

（海南省农业科学院热带园艺研究所 海南省特种经济植物种质资源创新利用重点实验室 海南海口 571100）

紫叶酢浆草鳞茎愈伤离体培养研究

戚华沙 符瑞侃 黄赛 吕德任 王景飞 潘梅

（海南省农业科学院热带园艺研究所 海南省特种经济植物种质资源创新利用重点实验室 海南海口 571100）

研究了紫叶酢浆草鳞茎的初始培养、增殖及生根壮苗的培养影响因子。结果表明：紫叶酢浆草鳞茎的初始培养基MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L，有利于鳞茎诱导，诱导率86%；MS＋6-BA4.00mg/L为紫叶酢浆草增殖的最佳培养基，增殖系数达4.50；MS＋NAA2.50mg/L+IBA0.5mg/L，适宜诱导生根获得再生植株。

紫叶酢浆草；离体培养；增殖培养

紫叶酢浆草（Oxalis triangularis Subsg.Triang）是酢浆草科酢浆草属多年生常绿草本，原产于热带亚洲[1]。紫叶酢浆草株高15～30cm，地下部分长有小鳞茎，叶基生，掌状复叶，每个复叶由3片小叶组成，小叶倒三角形或倒箭形，叶色常年为艳丽的紫红色[2]，极具有观赏价值。紫叶酢浆草适应性广，抗性强[3]，常规繁殖多采用分株法，繁殖系数低，无法满足市场需求。本试验旨在通过对紫叶酶浆草鳞茎愈伤离体培养研究，探索出紫叶酢浆草的快速繁殖方法，为紫叶酢浆草规模化育苗提供一条有效途径。

1 材料与方法

1.1 试验材料

采于海南省农业科学院热带园艺研究所苗圃。

1.2 外植体消毒方法

选择生长良好的植株，切取地下鳞茎做为外植体，用自来水冲洗干净，放置于洗洁精溶液中摇荡3min，再用自来水冲洗干净。沥干水后，在超净工作台上，用无菌水冲洗2次，75%酒精处理15s，再用0.10%升汞浸泡15min，无菌水冲洗5次。切除外植体两边顶端，转入诱导培养基中诱导不定芽生成。

1.3 初始培养基的筛选

以MS为基础培养基，添加6-BA0.10mg/L、0.50mg/L、1.00mg/L与NAA0.20mg/L、0.50mg/L组成6种不同配比处理，50d后统计不定芽诱导情况。

1.4 不同浓度无机盐对不定芽增殖的影响

设置 1/5MS、2/5MS、3/5MS、4/5MS、MS，共 5 种处理的基本培养基，分别添加6-BA2.0mg/L，30d后统计不定芽增殖情况。

1.5 不同浓度6-BA对芽增殖的影响

以MS为基础培养基，设置6-BA1.00mg/L、2.00mg/L、3.00mg/L、4.00mg/L4种浓度梯度，30d后统计不定芽增殖情况。

1.6 生根培养基的筛选

以MS为基本培养基，添加NAA0.50mg/L、1.50mg/L、2.50mg/L、3.50mg/L与IBA0.20mg/L、0.50mg/L组成8种不同配比处理，30d后统计生根情况。

2 结果与分析

2.1 初始培养基的筛选

由表1可知，6-BA和NAA不同浓度配比对紫叶酢浆草鳞茎诱导影响差异较大。6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L处理和6-BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L处理的芽诱导率与其它处理的差异达到显著性水平，分别为86.00%和80.00%；6-BA1.00mg/L+NAA0.50mg/L处理的芽诱导率最低，为35.20%。6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L处理和6-BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L处理的芽数显著优于其它4个处理，其它4个处理间的芽数差异不显著。从紫叶酢浆草鳞茎诱导的情况来看，6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L处理鳞茎芽诱导萌芽生长较快，38d见有萌动，至42d见芽有抽长，50d诱导芽长势良好。因此，紫叶酢浆草适宜初始培养基为6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L。

2.2 不同浓度无机盐对不定芽增殖的影响

由表2可知，不同浓度无机盐对紫叶酢浆草不定芽增殖系数的影响效果不同。3/5MS、4/5MS和MS3种处理的增殖系数差异不显著，增殖系数介于 3.55～4.20；1/5MS 处理与 2/5MS、3/5MS、4/5MS和MS4种处理的差异达到显著性水平。从不定芽生长的情况来看，MS的增殖效果最好，增殖系数达4.20，不定芽壮且颜色艳，高度均匀；其次4/5MS，增殖系数达4.00，不定芽壮，叶片厚；1/5MS、2/5MS及3/5MS处理效果较差，增殖系数为2.20～3.55之间，茎细，颜色淡，基部有愈伤组织生长。因此，紫叶酢浆草不定芽增殖适宜的无机盐浓度为MS。

表2 不同浓度无机盐对不定芽增殖的影响

2.3 不同浓度6-BA对不定芽增殖的影响

由表3可知，不同浓度6-BA对紫叶酢浆草不定芽增殖的影响呈正相关性。6-BA1.00～4.00mg/L范围内，随着6-BA浓度的增加，紫叶酢浆草不定芽增殖系数逐渐增加，且颜色逐渐加艳，长势渐好，可见在一定范围内，高浓度6-BA对紫叶酢浆草不定芽增殖有明显的促进作用。方差分析的结果表明，6-BA3.00mg/L和6-BA4.00mg/L显著优于 6-BA1.00mg/L和 6-BA2.00mg/L，6-BA3.00mg/L和6-BA4.00mg/L处理间增殖系数差异不显著；不定芽在6-BA4.00mg/L保存50d后出现叶片变黄，不定芽在6-BA3.00mg/L保存45d后见有叶片变黄，不定芽在6-BA4.00mg/L保存时间比6-BA3.00mg/L长。综合考虑分析，合适紫叶酢浆草不定芽增殖培养基为MS+6-BA4.00mg/L。

2.4 生根培养基的筛选

由表4可知，不同浓度激素配比对紫叶酢浆草的生根效果不同 。 NAA2.50mg/L+IBA0.20mg/L、NAA3.50mg/L+IBA0.20mg/L、NAA2.50mg/L+IBA0.50mg/L、NAA3.50mg/L+IBA0.50mg/L 处理间的生根率差异不显著，均为100%。从根数来看，NAA2.50mg/L+IBA0.5mg/L处理得到的根数最多，达8.50条/株，NAA2.50mg/L+IBA0.5mg/L 处 理 与 NAA2.50+IBA0.20、NAA3.50+IBA0.20、NAA2.50+IBA0.50、NAA3.50+IBA0.50处理根数间差异不显著。从最长根长来看，8个处理的最长根长介于4.50～8.50cm，其中NAA2.50mg/L+IBA0.5mg/L处理的最长根最长，达8.50cm，与其它7个处理的最长根长的差异达到显著性水平。从株高来看，各处理株高在2.80cm以上，其中NAA2.50mg/L+IBA0.5mg/L处理的株高最高，为7.50cm；综合比较分析认为，适合紫叶酢浆草根系发育的培养基为NAA2.50mg/L+IBA0.5mg/L。

表3 不同浓度6-BA对不定芽增殖的影响

表4 NAA和IBA不同浓度配比对生根的影响

3 结论

本试验对紫叶酢浆草地下鳞茎进行了初始培养、增殖及生根研究，找到了适宜的试验方法。试验结果表明，紫叶酢浆草鳞茎的初始培养基MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L，有利于鳞茎诱导，诱导率可达86%；增殖培养以MS＋6-BA4.00mg/L为宜，增殖系数达4.50；生根培养基为MS＋NAA2.50mg/L+IBA0.5mg/L，适宜诱导生根获得再生植株。

[1]龙金花.彩蝶纷飞的三角紫叶酢浆草[J].植物杂志，2000（2）：10～11.

[2]王旭昭.紫叶酢浆草栽培技术与推广应用[J].安徽农业科学，2007，35（36）：11905，11922．

[3]李海燕.紫叶酢浆草的园林应用及培育技术[J].北方园艺，2007（2）：13.

S682.19

A

1005-7897（2017）24-0008-02

2017-10-15

戚华沙，助理研究员，主要从事观赏植物组织培养研究工作。

潘梅，高级园艺师，主要从事热带植物组织培养研究工作。