马泰勒虫病致死孕马报道

杨红霞 ， 张 杨 ， 刘世芳 ， 谢小婉 ， 吾力江 ， 张梦圆 ， 宋晶晶 ， 巴音查汗

(新疆农业大学 ， 新疆 乌鲁木齐 830052)

马泰勒虫(Theileiaequi，旧称马巴贝斯虫)和马驽巴贝斯虫(Babesiacaballi)是寄生于马属动物红细胞内，是马梨形虫病的主要病原。据报道马泰勒虫病比驽巴贝斯虫病有更强的致病性和传播能力[1]。马泰勒虫(Theileriaequi)隶属于泰勒科(TheileriidaeLevine)泰勒属(Theileria)，是寄生于马属动物红细胞体内，临床以稽留热、贫血、黄疸等为主要症状的蜱传性血液原虫病。该病被世界动物卫生组织(OIE)纳入动物疫病名录，我国因此也将其列为二类动物法定报告疫病。该病在世界各地呈广泛分布，西班牙、迪拜、瑞士、美国、蒙古等地[2-6]均有报道；而在我国多发生于西北、内蒙古西部地区及南方各地[7]。2016年5月，昭苏某马场出现待产母马发病，由于待产期，并未进行特效药物治疗，仅为对症治疗；3日后该马流产，对死驹(脐带血)及母马进行马泰勒虫病诊断，母马患病而死驹未患病；对流产马匹强心补液，但流产导致该马抵抗力严重下降，于2 d后死亡。

1 病例介绍

伊犁马，13岁，中等膘情，待产，2016年5月在新疆昭苏发病，出现呼吸急促、大口喘气、咳嗽、流涕等症状，体温41.6 ℃；3 d后凌晨出现早产，死胎，胎衣不下；2 d后死亡。

2 临床症状及诊断

2.1 临床症状 待产母马，食欲下降，呼吸和脉搏加速，黏膜充血，精神不振，咳嗽、流涕，体温41.6 ℃；3 d后凌晨流产、死胎，经助产后出现胎衣不下等症状，使用缩宫素、右旋糖酐铁及10%葡萄糖、柴胡等对症治疗，当日胎衣脱下，但较为虚弱，步履困难；治疗2 d后，站立不稳，卧地不起，呼吸加快，数小时后死亡。

2.2 PCR检测 对死胎进行脐带血采集，生产母马采集颈静脉血，进行马泰勒虫病检测。

PCR参照罗金等[8]扩增18S RNA基因的目的区段(上游引物：5′- TTTGGGCTGTTTACAGTTGC-3′；下游引物：5′- CTCAAAGTAAACGTCGAGTCATG-3′)；由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。

PCR扩增反应体系(50 μL)：2×EcoTaqPCR 25 μL，10 μmol/L 上下游引物各1 μL，模板DNA 3 μL，灭菌水20 μL。

3 讨论

鸡大肠杆菌病是危害养鸡业主要的细菌病之一，该菌血清型众多，易产生耐药性，该菌可以通过消化道、呼吸道等多种途径进行传播。沙门菌不仅通过水平传播，也可以通过垂直传播，种鸡成为沙门菌的宿主，成年鸡感染后可以长期带毒和排毒，导致沙门菌病广泛流行。鸡大肠杆菌病和沙门菌病同为条件性疾病，当机体防卫机能下降、饲养管理不善、环境条件变化和应激因素影响等，都能促使疾病的发生与流行。鸡大肠杆菌病和沙门菌病的防治主要通过抗生素，但随着抗生素的广泛与不适当地应用，使耐药谱不断扩大，多重耐药菌株的增加，联合用药的效果势必越来越差，严重影响了临床治疗效果。耐药性也可通过多种途径造成交叉传播，直接威胁人类的健康。许多研究证明了鸡群对这两种菌的混合感染存在很强的耐药性。本试验药敏结果显示，分离菌株QHE-1和QHS-1仅对对阿米卡星、头孢克肟、头孢曲松3种药物敏感；对其他的药物存在不同程度的耐药性，与于学会[12]等报道了蛋鸡沙门菌和大肠杆菌混合感染的对多种抗生素存在很强的耐药性一致。因此，发生该病时，应该进行了药敏试验，选择敏感的药物，采取交叉用药、轮换用药防止产生耐药性，充分发挥抗菌药物之间的协同作用，增加疗效，才能有效预防疾病的发生。

略)

PCR反应参数：95 ℃预变性 5 min；30个循环(94 ℃ 45 s，56 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s)；72 ℃延伸5 min，4 ℃保存。扩增结束后取5 μL PCR产物进行1.0%琼脂糖凝胶电泳检查。

3 剖检变化

对死亡马匹进行剖检：体型消瘦、贫血和全身大面积黄染；心脏扩大；肝小叶中央呈黄色；脾及淋巴结肿大；胃黏膜和肠黏膜严重黄染；左肾黄染，有脑积液现象。

4 结果

用PCR方法扩增马泰勒虫病18S RNA基因片段，在约500 bp处出现目的条带，与预期片段(531 bp)大小相一致，诊断为马泰勒虫病(见图1)。

图1 马泰勒虫病18S RNA基因序列扩增结果

5 讨论

马泰勒虫病是由中间宿主硬蜱传播并寄生于红细胞的一种原虫病，该病广泛分布于世界各地[9]。近年来，马泰勒虫病的感染率逐年上升，死亡率也随之增加，严重影响畜牧业发展及畜产品生产。新疆昭苏位于高原腹地，属高山半湿润性草原气候，植被丰富，为马泰勒虫病的传播媒介-革蜱属的孳生提供了有利条件。当地马匹饲养方式主要为草场散养，且每年有来自不同地区的马匹在此进行配种，从而增加了该病的广泛流行。

据报道，孕马感染此病可引发流产或早产，严重时伴发子宫大出血而死[10]。该病例为待产母马发病，由于感染马泰勒虫病导致身体虚弱，在即将分娩季节出现呼吸急促、大口喘气、咳嗽、流涕等症状，体温41.6 ℃，由于为孕马，并未进行马泰勒虫病特效药物治疗，仅为双黄连等中成药对症治疗；但3日后仍旧出现流产现象，流产后马匹明显出现虚弱症状，站立不稳。由于流产导致身体抵抗力严重下降，于两日后死亡。对于母马与死亡幼驹进行马泰勒虫病18S RNA 基因片段扩增，母马感染马泰勒虫病，而幼驹并未感染该病。该例报道是否可以推断马泰勒虫病不垂直传播，在今后的研究中，需要更多病例进行验证。

马泰勒虫病尚无特效疫苗可用，主要以预防为主。在蜱的活跃季节，采用人工灭蜱和药物灭蜱相结合的方法，经常检查畜体体表，随时摘除畜体上的蜱，并将其焚烧，定期对畜体和圈舍彻底喷洒消毒1次。在疫区，出现病例后，为了防止其他马匹发病，可采取药物进行治疗，多选用三氮脒(贝尼尔、血虫净)、盐酸吖啶黄(黄色素、锥黄素)、咪唑苯脲等[11-13]进行治疗。在没有疫情但有蜱类活动的地区，对外来马匹要严格进行检疫，防止带虫马进入。做好马厩卫生消毒工作，加强饲养管理，改善饲草单一的状况，增强马匹对疫病的抵御力。

参考文献:

[1] De Waal D T. Equine piroplasmosis: a review[J]. British VeterinaryJournal， 1992, 148: 6-14.

[2] Camacho A T，Guitian F J，Pallas E，etal．Theileria (Babesia) equi and Babesia caballi Infections in Horses in Galicia，Spain[J]．Tropical Animal Health and Production，2005，37：293-302．

[3] Jaffer O，Abdishakur F，Hakimuddin F，etal．A comparative study of serological tests and PCR forthe diagnosis of equine piroplasmosis[J]．Parasitol Res，2010，106(3)：706-709．

[4] Sigg L，Gerber V，Gottstein B，etal．Seroprevalence of Babesia caballi and Theileria equi in the Swisshorse population[J]．Parasitology International，2010，59：313-317．

[5] Qablan M A，Sloboda M，Jirku M．Quest for the piroplasms in camels：Identification of Theileria equi and Babesia caballi in Jordanian dromedaries by PCR[J]．Veterinary Parasitology，2012，186：456-460.

[6] Battsetseg B，Xuan X，Ikadai H，etal．Detection of Babesia caballi and Babesia equi in Dermacentor nuttalli adult ticks[J]．International Journal for Parasitology，2001，31：384-386.

[7] 孔繁瑶. 家畜寄生虫学[M]. 2版.中国农业大学出版社， 2010: 330-331.

[8] 罗金,刘光远,谢俊仁,等. 马泰勒虫病PCR检测方法的建立和应用[J]. 中国畜牧兽医,2012,39(02):28-31.

[9] 张守发,贾立军,鞠玉琳. 马泰勒虫不同PCR检测方法的比较[J]. 中国兽医科学,2007,37(12):1 046-1 049.

[10] 李佳.马泰勒虫荧光定量PCR检测方法的建立及伊犁马泰勒虫病的分子流行病学调查[D].乌鲁木齐：新疆农业大学,2014.

[11] 姜新基, 六十, 布仁巴依尔, 等. 马焦虫病的临床症状及防治措施[J]. 中国畜禽种业, 2014, 10(10): 82-83.

[12] 孙晓华. 牛、马巴贝斯虫病的诊断与防治[J]. 养殖技术顾问, 2014, 02: 176.

[13] 闫常平, 薛克云, 安海军. 马巴贝斯虫病的暴发与诊治[J]. 中国兽医杂志, 2003, 39(09): 52-53.