高效液相色谱法测定不同甜瓜品种的糖含量

郑贺云++张银欢++张翠环++耿新丽++廖新福

摘要 以春秋蜜17号、西州密25号、西州密1号、新蜜25号为试材，利用高效液相色谱法测定果实中葡萄糖、果糖、蔗糖含量并对不同品种糖含量进行差异分析。结果表明，不同甜瓜品种糖组分含量差异显著，果实甜度高低依次为西州密25号、春秋蜜17号、新蜜25号、西州密1号。

关键词 高效液相色谱法；甜瓜；品种；糖含量；测定

中图分类号 S652 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2017）17-0065-02

Abstract The contents of sugars of 4 melon cultivars（Chunqiumi17、Xizhoumi25、Xizhoumi1、Xinmi25） were determined by high performance liquid chromatography（HPLC） and the difference of sugar content in different varieties was analyzed.The results showed that the content of sugar components significantly differences between species，the sweetness degree of fruit is in turn Xizhoumi25、Chunqiumi17、Xinmi25、Xizhoumi1.

Key words HPLC；melon；sugar；varieties；content of sugar；determination

甜瓜属葫芦科（Cucurbitaceae）香瓜属（Cucumis）植物，栽培历史悠久，风味独特，含有人体内必需的各种营养物质，具有很高的营养价值，近年来备受广大消费者的青睐。糖不仅是果实品质、风味的重要组成成分，也是氨基酸、VC等营养物质合成的基础原料[1]。甜瓜中主要的可溶性糖组分为葡萄糖、果糖和蔗糖，其含量和组成是构成甜瓜品质的关键[2]。

由于市场的需要，甜瓜品种急剧增加，甜瓜类型越来越丰富。目前，我国种植较为普遍的有西州密系列、白兰瓜、伊丽莎白、玉金香等众多品种，这些品种的厚皮甜瓜风味差异较大，其品质营养也有较大差异。本试验对4个甜瓜品种的含糖量进行测定，以期为甜瓜品质评价提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

供试甜瓜材料：于2016年8月购买于新疆哈密市淖毛湖镇。甜瓜品种分别为西州密25号、春秋蜜17号、西州密1号、新蜜25号4个品种。栽培管理条件一致，每个品种随机挑选5个成熟果实，去皮去瓤，用打孔器分别在果实的脐部、中部、蒂部取样后混合，样品置于-40 ℃冰箱中保存备用。

供试试剂：葡萄糖、果糖、蔗糖标样；乙腈（色谱级）；超纯水。

1.2 仪器与设备

高效液相色谱仪（美国安捷伦1260）、示差遮光检测器（G1362A RID）、高速台式冷冻离心机Sigma3K-15、纯水机、电子天平等。

1.3 标准液的配制

准确称取葡萄糖、果糖、蔗糖25 mg，溶解后双蒸水定容至1 mL容量瓶中，得到浓度为25 mg/L的葡萄糖、果糖、蔗糖混标溶液；用同上方法配制25 mg/L的葡萄糖、果糖、蔗糖的单标溶液，蔗糖逐级稀释至5.00、2.00、1.00、0.50、0.10、0.05 mg/L。

1.4 色谱分析条件

色谱柱：氨基柱（Platisil NH2 5u 250 mm×4.6 mm）；流動相为乙腈∶水=75∶25，流动相经0.45 μm滤膜过滤后超声波脱气30 min，流速为1.00 mL/min，进样体积为20 μL，柱温为35 ℃[3]。

1.5 糖分提取

准确称取经榨汁机打碎的甜瓜肉1 g，加6 mL纯乙腈（色谱级），60 ℃水浴10 min后8 000 r/min 离心20 min，将上清液转至25 mL的容量瓶中；残渣再加入6 mL双蒸水，继续60 ℃水浴10 min，8 000 r/min离心20 min，合并上清液；再次重复上一步提取1次，合并上清液，最终定容到25 mL刻度，抽取1 mL上清液通过0.22 μm有机滤膜过滤，供高效液相色谱检测用[4]。

1.6 数据分析

1.6.1 糖含量计算方法。计算公式：W=C0V/m，式中：W为糖含量（mg/g·FW）；C0为糖分质量浓度（g/L）；V为样品溶液体积（mL）；m为样品质量（g）。

1.6.2 甜度值计算方法。甜度值的计算参照姚改芳略有改动[5]，以蔗糖的甜度值为基准1.00，果糖为1.75，葡萄糖为0.7，甜度值=果糖×1.75+葡萄糖×0.7+蔗糖×1。

1.7 数据统计

利用Excel 2003和DPS软件进行数据分析。

2 结果与分析

2.1 标准曲线的绘制

分别取5.00、2.00、1.00、0.50、0.10、0.05 mg/L的葡萄糖、果糖、蔗糖的标准溶液，进样量为20 uL，以标准为纵坐标，标样峰面积为横坐标，绘制标准曲线并计算回归方程，结果见表1。葡萄糖、果糖、蔗糖的质量浓度与其HPLC峰面积的相关参数分别为0.999 8、0.999 6、0.999 5。混标色谱图中出峰顺序分别是溶剂峰、果糖、葡萄糖和蔗糖（图1）。

2.2 不同甜瓜品种果实糖组分含量

由表2可知，4个甜瓜品种果实中的可溶性糖组分含量差异性显著。果糖含量为17.220 4～35.747 7 mg/g FW，高低依次为春秋蜜17号、新蜜25号、西州密25号、西州密1号，春秋蜜17号与其他3个品种之间都达到了极显著差异，西州密25号与西州密1号差异显著，但与新蜜25号差异不显著。4个品种间的葡萄糖含量差异都达到了极显著水平，春秋蜜17号葡萄糖含量最高，达到70.585 3 mg/g FW，西州密1号葡萄糖含量最低，为22.855 3 mg/g FW。蔗糖含量为47.081 3～94.992 2 mg/g FW，含量最高的是西州密25号，极显著高于春秋蜜17号和新蜜25号，但与西州密1号含量差异不显著。

2.3 不同甜瓜品种甜度差异

甜味是糖的重要性质，甜味的强弱用甜度来表示，通常以蔗糖作为基准物。由图2可知，4个甜瓜品种甜度值西州密25号>春秋蜜17号>新蜜25号>西州密1号，西州密1 号表现与其他品种差异显著，其他3个品种之间没有明显差异。

3 结论与讨论

果实中糖分的积累是衡量果实品质和风味的重要指标，由于糖组分和含量的差异，在一定程度上对果实风味的形成有一定的影响[6]。甜瓜果实积累的糖分主要以葡萄糖、蔗糖、果糖为主，甜瓜果实发育早期以积累己糖为主，在发育后期蔗糖开始上升，不同品种、不同产地的甜瓜果实中的糖组分有一定差异。本试验研究表明，春秋蜜17号以葡萄糖积累最多，西州密25号、西州密1号和新蜜25号蔗糖含量较多，由此说明，甜瓜果实可溶性糖含量积累类型因品种而异[7-8]。

果实中可溶性糖以果糖甜度最高，甜度约为蔗糖的1.8倍，葡萄糖的2.5倍。因此，果实甜度不仅与糖总量有关还取决于糖分组成[9]。由于春秋蜜17号、西州密25号、西州密1号和新蜜25号的糖组分存在显著差异，其果实甜度也差异显著，即西州密25号>春秋蜜17號>新蜜25号>西州密1号。

4 参考文献

[1] 秦巧平，林飞凡，张岚岚.枇杷果实糖酸积累的分子生理机制[J].浙江农业大学学报，2012，29（3）：453-457.

[2] 张明方，李志凌，陈昆松，等.网纹甜瓜发育果实糖分积累与蔗糖代谢参与酶的关系[J].植物生理与分子生物学学报，2003，29（5）：455-462.

[3] 薛素琳，李学文，吴海波，等.成熟度对伽师瓜采后蔗糖代谢及后熟甜度的影响[J].新疆农业科学，2014，51（12）：2212-2220.

[4] 孟伊娜，张瑞廷，史强，等.高效液相色谱法测定甜高粱茎秆中3种糖含量[J].中国农学通报，2010，26（8）：90-95.

[5] 姚改芳，张绍玲，曹玉芬，等，不同栽培种梨果实中可溶性糖组分及含量特征[J].中国农业科学，2010，43（20）：4229-4237.

[6] 文涛，熊庆娥，曾伟光，等.脐橙果实发育中有机酸合成代谢酶活性变化的研究[J].园艺学报，2001，28（2）：161-163.

[7] 张宁，张显，张勇，等.甜瓜果实糖含量相关性状QTL分析[J].西北植物学报，2015，35（2）：252-257.

[8] 陈克农，盛云燕，朱子成.不同甜瓜品种含糖量差异分析[J].北方园艺，2012（10）：35-38.

[9] 黄晓辉，贾振红.甜瓜含糖量无损测定研究[J].新疆大学学报（自然科学版），2010（4）：478-481.