1例自发性肝硬化新西兰兔肝脏病理形态学观察

邱 波, 王 艳, 英 永, 屈卉锦, 王凤乾, 张海静, 张 鑫, 胡建廷

(1. 山东省药学科学院新药评价中心, 济南 250101; 2. 山东英才学院, 济南 250104)

·经验交流·

1例自发性肝硬化新西兰兔肝脏病理形态学观察

邱 波1, 王 艳2, 英 永1, 屈卉锦1, 王凤乾1, 张海静1, 张 鑫1, 胡建廷1

(1. 山东省药学科学院新药评价中心, 济南 250101; 2. 山东英才学院, 济南 250104)

在试验周期为6个月，试验分5组，分别为低、中、高剂量、模型及空白对照组(每组为6只)的新西兰兔膝关节刺激试验中，解剖偶然见空白对照组中出现一例肝硬化病变。肉眼观察，该患病动物消瘦、体质量减轻、皮肤黏膜轻度黄染等体征。该患病动物肝脏形状不规则、质地变硬，表面可见大小不一的颗粒状结节突出于肝脏表面。随即对肝脏进行HE、Masson及网状纤维染色。通过光学显微镜下观察表明其符合肝硬化病理形态学特点。

新西兰兔; 肝硬化; 病理形态学

肝硬化是严重威胁人类健康的常见疾病, 任何破坏肝脏内环境稳定的过程, 炎症、毒性损害、肝血流改变、先天性代谢障碍、化学物质和药物毒性、肝内循环紊乱和胆汁流动阻塞等都可导致肝硬化[1]。新西兰兔常用于小动物肝硬化模型的制作,该模型可用于筛选抗肝硬化药物研究、观察外科手术治疗的效果。常用的制作肝硬化模型的方法包括化学损伤方法(四氯化碳法、乙醇法、致癌物法、铁代谢法及D-半乳糖胺法); 外科方法(胆管阻塞法、门静脉缩窄法); 复合法及其他方法(免疫法、营养法、血吸虫法、病毒法)等[2-6], 但关于新西兰兔自发性肝硬化的文献未见相关报道。本文以空白对照组(试验周期为6个月)出现的1例肝硬化新西兰兔为研究对象, 通过肉眼形态学及组织病理学观察，对新西兰兔肝脏的病理形态学进行深入的探讨。

1 患病动物概况及剖检

本试验为周期6个月的药物对新西兰兔膝关节的刺激试验，以期观察该药物对膝关节的损伤及修复情况。普通级新西兰白兔30只, 2月龄体质量约1.5～2.5 kg，购自济南西岭角养殖繁育中心[SCXK(鲁)2010-0005]，动物饲养于本中心普通级设施[SYXK(鲁)2010-0004]。试验分5 组, 每组6只, 分别为低、中、高、模型及空白对照组。试验结束, 肉眼观察空白对照组中1例雌性动物消瘦、体质量减轻、皮肤黏膜有轻度黄染等体征。解剖观察该患病动物肝脏形状不规则、质地变硬, 表面可见大小不一的颗粒状结节突出于肝脏表面(图1A)，腹腔内出现约10 mL淡黄色腹水，其它组织脏器均无明显的肉眼形态学变化。

2 病理形态学检查

对肝组织进行常规取材、脱水、包埋、石蜡切片、HE染色，并根据说明书步骤进行网状纤维染色[7]和Masson 染色[8]，光学显微镜下观察患病动物肝脏病理形态学改变。HE染色显示患病动物肝脏肝细胞呈弥漫性变性、坏死伴结节状再生; 再生的肝细胞排列紊乱, 形成数量不等的假小叶, 假小叶内中央静脉缺如或偏位 (图1B、图1C) 。Masson染色显示蓝染的增生的胶原纤维将肝组织分成数量不等的假小叶, 假小叶被蓝染的增生的胶原纤维分割、包裹 (图1D、图1E)。网状纤维染色显示假小叶被棕黄色胶原纤维分割、包裹(图1F、图1G);肝组织及假小叶内可见黑色的网状纤维及棕黄色胶原纤维; 肝细胞坏死区域和假小叶周围未见黑色网状纤维塌陷或沉积, 仅见棕黄色胶原纤维增生(图1H)。

图 1 兔肝脏病理学观察

3 讨论

新西兰兔是目前科学研究中常用的实验动物之一，广泛用于药物的各种刺激性实验(血管、肌肉、关节、皮下等)、各类生物制剂的热原实验、生殖生理和胚胎学研究、避孕药物的筛选及制备高效价和特异性强免疫血清等实验。为了对药物相关性肝病和自发性病变进行正确鉴别，需加强对实验动物自发性肝脏病变的研究，以建立实验动物的背景资料。因此，本试验系统描述了1例自发性肝硬化新西兰兔肝脏肉眼形态学、组织病理学变化特征。经肉眼形态学观察提示，该患病动物出现的肝脏病变为结节性肝硬化。为进一步证实肝脏病变状况的进展，可通过网状纤维染色与亚急性肝衰竭进行鉴别诊断，因为亚急性肝衰竭时肝细胞坏死区域和假小叶周围可见网状纤维塌陷或沉积[12]。经网状纤维染色，肝细胞坏死区域和假小叶周围未见黑色网状纤维塌陷或沉积，仅见棕黄色胶原纤维增生，进一步确诊该肝脏病变为结节性肝硬化。

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Detection of Blood Physiological Parameters in Albino Mutant Golden Hamster

CUI Xiao-xia1, SHANG Shi-chen1, MA Lan-zhi1, HUANG Bin1,SHANG Yu-pu1, WANG Dong-ping1, CHEN Zhen-wen2, WANG Quan-xin3

(1. Laboratory Animal Center, Military Medical Sciences, Military Academy, Beijing 100071, China;2. Department of Laboratory Animal Science, Capital Medical University, Beijing 100069, China;3. Liao Ning Chang Sheng Biotechnology Co., LTD, Benxi 117004, China)

ObjectiveTo detect the normal range of blood physiological parameters in albino mutant golden hamster and compared with wild type golden hamster.MethodsBlood samples were taken from orbital venous plexus of hamsters. A number of blood physiological parameters were measured using automatic blood cell analyzer and semi-automatic coagulometer. The data was analyzed with SPSS17.0.ResultsThe range of normal values of blood physiological data of albino mutant golden hamster and golden hamster were detected. There were significant differences between albino mutant golden hamster and golden hamster in some indexes.ConclusionThe albino mutant in golden hamster may be influence the normal values of some blood physiological indexes.

Albino mutant; Golden hamster; Blood physiological parameters

Q95-33

B

1674-5817(2017)06-0485-03

10.3969/j.issn.1674-5817.2017.06.013

2017-05-10

山东省科技厅山东省创新公共服务平台专项(2014CXPT00001)

邱 波(1983-), 男, 硕士研究生, 主要从事药物的毒性病理学研究。 E-mail: qiubo.1983@163.com

胡建廷(1979-), 男, 硕士, 副高, 主要从事药物的毒性病理学研究。E-mail: jiantinghu@126.com