本刊编辑/张金辉
猪瘟防控、净化经验大家谈
本刊编辑/张金辉
猪瘟的防控、净化问题一直困扰着我国养猪业,为何猪瘟能长期流行,难以净化?为何免疫注射了猪瘟疫苗的猪群还发病?等等一系列问题。小编借“2017猪瘟防控技术研讨会”召开之际,采访到了行业内的专家、实战精英,以其切身的实践经验为大家分享了更加实用、高效的防控、净化猪瘟的方法,以飨读者。
特邀嘉宾:(以下排名不分先后)
中国兽医药品监察所 丘惠深 研究员
勃林格殷格翰(中国)动物保健全国技术服务总监 朱连德 博士
北京大北农科技集团股份有限公司动物医学研究中心首席科学家 张学贤 博士
天康生物股份有限公司制药事业部技术总监、全国市场部总经理 周绪斌 博士
成都天邦生物制品有限公司高级技术服务总监 吴其林
硕腾(中国)战略客户技术服务经理 李忠华
广东永顺生物制药股份有限公司 技术服务总监 杨傲冰
图1 丘惠深 研究员
丘惠深 研究员:我我国是养猪大国,同时也是猪肉消费大国,每年生猪的饲养量和猪肉的消费量占世界总量的一半。随着我国养猪业的发展,规模化、集约化程度不断提高,猪病也在不断地增多,每年由猪病造成的猪只死亡占10%左右,其中,我认为目前猪瘟在各种猪病中仍居首位。现在猪瘟的流行特点主要以慢性、隐性形式存在。
造成猪瘟长期流行不断、持续感染的根源在于妊娠母猪带毒综合征,母猪不表现临床症状,但猪瘟病毒可通过胎盘传给胎儿,造成母猪繁殖障碍、产下木乃伊胎、死胎、畸形胎、弱仔或仔猪出生后几天就死亡等。仔猪因为先天感染带毒后很难饲养,常在保育阶段出现死亡,而一些存活下来的仔猪由于产生了免疫耐受,成为持续性感染的带毒猪,不断地向外界排毒、污染环境、感染其他健康猪,如果把先天带毒猪培育成后备母猪会造成垂直传播,这些是造成猪瘟持续感染的根源。
控制、消灭猪瘟是一个系统工程,单靠一方面是不够的,要采取综合防治措施。
一是国家政府要严格控制猪瘟。在欧洲控制猪瘟的方法是对发病猪周围3 km或5 km的范围内所有猪全部进行扑杀,对患有猪瘟的猪场国家政府补贴50%,没有猪瘟的猪场国家100%进行补贴。但对于中国目前还很难做到,政府要严格控制猪的流通环节,必须要对猪瘟进行严格的检疫。
二是从技术角度进行综合防治,其中最重要的手段是要实施猪瘟的净化。因为猪瘟传播的根源在于母猪带毒综合征,用净化的方法对繁殖的母猪、种公猪、后备种猪进行有效、严格的实验室诊断,对于阳性的带毒猪要坚决、全部、彻底淘汰。淘汰带毒种公、母猪的同时也要将它的后代仔猪进行严格的隔离饲养、加强消毒。对种公、母猪每半年进行一次全面的净化,经过4~5次净化,猪群猪瘟带毒的阳性率会大大降低,可有效地控制猪瘟,同时猪群整体的健康状况会得到很大的改善。
三是要进行免疫接种,要选用合格的猪瘟疫苗,采取科学合理的免疫程序,进行预防接种。
四是要加强科学的饲养管理。饲养管理非常重要,特别是要做好日常猪舍的消毒工作,可选用各种消毒剂,我特别推荐使用氢氧化钠进行消毒。一些经过实验室诊断体内不带毒的猪体表可能会携带猪瘟病毒,可以用低浓度的氢氧化钠进行体表消毒是非常有用的。一定要采取全进全出的饲养方式,在猪出栏后要进行彻底消毒—冲洗—干燥—再消毒,经过反复3次彻底消毒后才可再进猪。
五是要同时对猪的其他疫病进行协同防治。不单只防控猪瘟一种疫病,要与其他疫病如猪伪狂犬病、猪高致病性蓝耳病、口蹄疫、猪细小病毒病、猪圆环病毒病等协同防控。根据多年的工作经验发现,一般患有猪瘟的猪多同时患有猪伪狂犬病等疫病,当猪感染了其中一种疫病后,对其他疫病进行免疫预防接种后产生的抗体会大大降低。如果一个猪场猪瘟控制好了,其他疾病也会随之减少。综合防治非常重要,只要认真落实、有耐心、坚持科学防控,猪群整体的健康状况就会有很大的改变,猪病减少了,不但节省了药费,同时也节省了饲料、人力、物力、财力,为市场提供健康、优质、安全的猪肉。
图2 周绪斌 总监
周绪斌 总监:我们从事兽医工作的都清楚,疾病防控的三个关键环节:传染源——传播途径——易感动物,猪瘟的防控与净化同样要围绕这三个关键环节,其中传染源最为重要。
猪瘟在我国猪群中呈现出新的流行形势,即典型猪瘟越来越少见,非典型猪瘟成为主要流行形式,母猪带毒和仔猪先天性感染现象普遍,猪瘟病毒在猪场内隐性循环,猪群免疫保护力低下,一旦免疫失败,偶有猪瘟暴发。
母猪带毒,虽然外表健康、体况良好,但是可以引起繁殖障碍导致母猪流产、产死胎和木乃伊胎;同时引起母猪卵泡结石化,使母猪降低或失去排卵功能。母猪带毒还可以持续向环境中排毒,成为传染源,引起易感猪发病,出现死亡。先天性感染的仔猪要么死亡,要么持续带毒。带毒母猪和先天性感染小猪在临床上难以被识别,成为传染源,引起猪瘟病毒在猪场内恶性循环,难以清除。有研究结果初步证实,母猪隐性带毒可能和猪体的免疫力低下相关。
猪瘟疫苗免疫现在主要存在4个问题:
1) 母猪群抗体水平离散度大,仔猪母源抗体水平高低不齐。
2) 商品猪首免后抗体转阳率低,易出现免疫保护空白期。
3) 商品猪二免后抗体持续期短,无法保护到出栏。
4) 不能区分野毒感染抗体和疫苗免疫抗体。
针对上述4个问题,养猪企业防控猪瘟需要注意4个方面:
1) 对猪瘟疫苗的质量严格把控,有条件的企业可以对每批次疫苗检测是否有牛黏膜病病毒(BVDV)等外源病毒污染,通过细胞培养和免疫荧光抗体技术测定疫苗的抗原含量,严格监控疫苗储存、运输和使用过程中的冷链。或应用新的基因工程疫苗。
2) 根据定期的监测结果制定科学的免疫程序,保证母猪群抗体离散度低于25%;监测仔猪母源抗体自然消减规律,避免首免过早母源抗体干扰,制定科学合理的免疫程序。
3) 筛查母猪群中的带毒母猪,坚决淘汰。
4) 综合防控,控制好猪场内其他的免疫抑制疾病,如猪蓝耳病,猪圆环病毒病等。
我国长期使用的猪瘟兔化弱毒疫苗的全面免疫,有效地控制了该病大规模的暴发流行,为我们国家的猪瘟防控做出了杰出的贡献。
但正如一些猪瘟研究专家指出,C株疫苗不利于我国猪瘟的净化,主要原因包括:
1) 目前的C株疫苗免疫后不能区分疫苗接种和野毒感染;
2) 现有C株疫苗的免疫效果易受母源抗体干扰;
3) 与其他疫苗(如猪蓝耳病活疫苗)存在相互干扰;
4) 疫苗生产及质量受BVDV抗原及抗体的影响。
由于我们国家长期采用强制免疫的策略,这也为猪瘟的控制提供了基础,但使用C株疫苗免疫净化猪瘟的过程会很漫长,需要有标记疫苗来缩短净化的进程。
图3 吴其林 总监
吴其林 总监:隐性猪瘟是造成我国猪瘟长期持续存在和散发流行、恶性循环的主要根源!病猪主要通过配种(人工授精)、胎盘垂直感染或水平感染等途径持续感染带毒传播猪瘟病毒。防控猪瘟的关键在于:
1)淘汰带毒种猪:公母猪带毒可造成交叉感染、影响下一代健康。通常采取抗原检测、抗体检测、生产指标(选择生产性能差,或者经常有木乃伊胎、死胎、畸形、流产、屡配不孕)三种方法相结合,对抗体阴性及抗原阳性的种猪进行淘汰。
2)合适的免疫程序:如果免疫程序不合理会大大降低免疫效果,主要是母源抗体对猪瘟一免的影响,或造成一免后免疫抗体阳性率不合格。
3)选择好的疫苗:优质的猪瘟疫苗应具备有效的抗原含量、产生理想的免疫力、无外源病毒牛黏膜病病毒(BVDV)、方便使用、无需冷藏等。
4)做好生物安全措施:根据汉世伟的经验,后备母猪进场、组群必须经过检测无病原方可入群,建立公猪站,严格控制精液污染带毒;饲料进入生产区需通过管道运输防止污染;人员进入生产区要进行隔离、洗澡、更衣;售猪时要对装猪台、车辆进行清洗、消毒、检测。
5)选址:为防止交叉感染猪场应远离其他养殖场,建在远离道路、居民区等偏僻的地方。
图4 杨傲冰 总监
杨傲冰 总监:目前常见的猪瘟疫苗种类有:
1)猪瘟活疫苗(传代细胞源):用猪睾丸传代细胞作为猪瘟兔化弱毒疫苗种毒繁殖系统,病毒增殖滴度高,培养的猪瘟疫苗不会污染外源病毒,且免疫原性好,具有高效、安全、稳定、过敏反应小的特点。
2)猪瘟活疫苗(细胞源):利用牛睾丸原代细胞制造,疫苗生产工艺不稳定,批间差异大,病毒滴度低;容易受到BVDV的污染。
3)猪瘟活疫苗(脾淋源):用猪瘟疫苗种毒接种大耳白兔子后采集兔子的脾脏和淋巴制成的疫苗。缺点是生产工艺落后,利用动物组织制苗,易造成外源病原污染,由于当前我国缺乏制苗兔子的质量标准,特别是对兔子体内的病原缺乏检测方法和标准,很难保证疫苗的纯净性。
图5 张学贤 博士
张学贤 博士:1)选用品质品牌优良的猪瘟疫苗产品
目前市面上的猪瘟疫苗均来自C株猪瘟病毒,可分为细胞苗和组织苗,其中组织苗有乳兔源和脾淋源。猪瘟疫苗以前是国家强制性免疫疫苗,现已为市场苗。因此选择适宜的猪瘟疫苗对免疫成功与否至关重要。猪瘟疫苗的生产厂家很多,疫苗生产工艺较为复杂,所以应选择生产设备、技术力量、生产工艺等相对较优的厂家。要避免选用BVDV污染影响猪瘟疫苗。可以关注国家疫苗监督抽查的结果,确保所用疫苗无质量问题。
2)RID(兔体反应量)是衡量猪瘟疫苗病毒含量高低的一个重要指标
随着疫病防控难度的加大,每头份猪瘟细胞苗抗原含量国家标准已经升为750 RID,脾淋苗抗原含量国家标准为150 RID。实际生产中,大部分疫苗企业的内控标准均高于国家标准(大多数企业宣传其猪瘟疫苗抗原含量≥7 500 RID,部分高效苗抗原含量则高达1.2万RID)。但RID并非越高越好,应根据临床情况选择适当疫苗进行免疫接种,如常规免疫,紧急免疫等。
3)慎用组织苗
1月龄内的仔猪严禁使用组织苗免疫,临床实践中,对月龄内仔猪接种组织苗后发生过敏现象,接种时日龄越小,反应越强烈,严重的引起仔猪死亡。紧急免疫(发生猪瘟,并处于明显期的猪群)可使用脾淋苗。其原因主要由于组织苗在制备过程中没有去除一些组织因子,由此引起不良反应。另一方面,这些组织因子具有促进免疫功能的作用。
4)免疫过程要精细操作
①预防注射过程要严格消毒。
②不要同时使用两种或两种以上病毒活疫苗,两种病毒苗之间最好间隔10 d以上。
③做到只给健康猪注苗,不要给发烧、减食、呼吸困难、腹泻等病猪注苗,可等到治愈后补苗。
④加强疫苗管理,按规定要求在低温条件下运输、保存和使用好疫苗。
5)猪瘟防控措施与监测检验相结合,制定个性化免疫程序
在猪场进行猪瘟免疫抗体的监测检验,了解猪群的抗体水平,尤其仔猪的母源抗体水平,分析注射猪瘟疫苗后的免疫效果。并以此为依据科学合理地制定免疫程序。不同的猪场情况不同,应制定适合自己的个性免疫程序。免疫剂量要适中,疫情严重的猪场可适当加大剂量。
6)掌握猪群的健康状况,霉菌毒素和免疫抑制性疾病影响猪瘟疫苗免疫效果
霉菌毒素对免疫系统有破坏作用,猪只的免疫系统不足以抑制病原体的侵害,为疾病的发生创造了有利条件,可引起猪群免疫失败,使猪只注射疫苗后抗体水平仍然很低,导致猪瘟的发生。常见传染病疾病,如猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒病、猪伪狂犬病等等在猪群中存在,会产生免疫抑制,使猪的免疫力下降,机体对猪瘟疫苗的免疫应答下降,也可造成免疫失败。猪场应通过完善免疫程序、改善饲养管理,进行监测检测,才可做好猪瘟预防和控制。
杨傲冰 总监:对猪瘟疫苗的选择主要是从疫苗的免疫原性、疫苗的效价、有无外源病毒污染和质量的稳定性这几方面来选择,要选择免疫原性好、效价高、无外源病毒污染和质量稳定的疫苗。不同企业的生产工艺不同,生产的疫苗质量和稳定性也不同,选择好的疫苗品种和口碑好的疫苗企业生产的质量稳定可靠的产品,是保证猪瘟免疫效果的首要因素,也是最关键因素。
周绪斌 总监:2017年3月,农业部发布的《国家猪瘟防治指导意见(2017-2020年)》明确提出2020年全国所有种猪场要完成猪瘟净化,标志着我们国家的猪瘟防控进入新的时期,即由控制进入净化时期。
猪瘟的净化方案可以分成两个步骤,一是免疫净化;一是非免疫净化。
所谓免疫净化,指的是采取以疫苗免疫为主,结合淘汰猪瘟野毒感染猪,逐步净化猪瘟。
目前常用的方法是采用弱毒疫苗以及种猪扁桃体病毒检测技术。可以用免疫荧光或分子生物学技术检测种猪扁桃体中是否带毒。缺陷是扁桃体采集对种猪的应激比较大,检测方法需要标准化,检测的敏感性和便捷性都有待提高,并且野毒和疫苗毒无法鉴别诊断。
随着猪瘟标记疫苗和配套的鉴别诊断方法(比如猪瘟E2基因工程亚单位疫苗和猪瘟E0蛋白抗体检测试剂盒)的研发和商品化,为猪瘟的净化提供了可行性。通过检测猪是否有E0抗体,从而区分疫苗免疫猪(E2抗体阳性,E0抗体阴性)和野毒感染猪(E0抗体阳性),针对性淘汰野毒感染猪,补充未感染后备猪,逐步净化猪瘟。
采用标记疫苗进行猪瘟免疫净化可以分为3个阶段:
第一个阶段是猪瘟的控制和净化阶段。在该阶段采用猪群猪瘟抗体和病毒监测、猪瘟野毒感染种猪淘汰、疫苗免疫、引进猪瘟病毒阴性后备猪等措施,同时完善猪场生物安全体系,完成对猪群中猪瘟病毒的清除。
第二个阶段是净化监测阶段。每3个月对种猪群按95%的检测置信区间采样,每6个月对全部种猪群进行采样,进行猪瘟E2和E0抗体检测。猪瘟E0抗体阴性,猪瘟E2抗体阻断率低于一定标准(比如75%)的猪应加强免疫,如加强免疫后E2抗体阻断率仍低于一定标准则应该淘汰。猪瘟E0抗体阳性的猪,不论猪瘟E2抗体如何,全部淘汰。
如果全部种猪群采样连续2次检测猪瘟E0抗体阳性率为0,且猪群平均阻断率高于一定标准,抗体阳性率为100%,则达到免疫净化标准。
第三个阶段是猪瘟净化场维持和预警阶段。坚持全群使用标记疫苗,每4个月按猪群数量的8%~10%抽样检测猪瘟E0和E2抗体,确保猪瘟E2抗体达到规定要求,同时种猪群猪瘟E0抗体持续保持阴性。
对于非免疫净化,指的是在净化的最后阶段,停止应用一切猪瘟疫苗,对于非免疫净化,应先达到免疫净化标准且生物安全体系完善后,方可实施。这也是猪瘟净化的最终目标。
杨傲冰 总监:目前常用的猪瘟净化方法有:
1)扁桃体检测抗原法
用专用的扁桃体采样器械采集全群种猪的扁桃体,送实验室用免疫荧光抗体法或RT-PCR方法检测猪瘟病毒,淘汰阳性种猪,半年后重复一次。
2)血清学检测和高质量猪瘟疫苗免疫结合法
全场种猪群采血检测猪瘟抗原,淘汰抗原阳性猪,同时检测其猪瘟抗体,对于抗体阴性猪用ST猪瘟活疫苗(传代细胞源)加强免疫一次,4周后进行再采血检测猪瘟抗原和抗体,淘汰猪瘟抗原阳性和抗体不合格的猪。
同时后备猪群混群前应严格检测,猪瘟抗原检测阴性后备猪才可混群。对引种要严格把关,引进的种猪必须从猪瘟阴性的猪场引进,引进后隔离饲养45 d以上经检测合格(猪瘟抗原阴性)后才可混群饲养。
建立健全的生物安全体系
做好生物安全措施是疾病控制和净化的前提条件,只有完善的生物安全体系,坚持“预防为主,防重于治”的方针,才能确保猪只得到有效的防疫和隔离,避免接触到传染源而发生感染。完善的生物安全措施主要包括:加强饲养管理,坚持自繁自养、全进全出的饲养模式;做好日常的消毒防疫工作,加强人流、物流、猪流和车辆的管理;做好病死猪的无害化处理等。
图6 朱连德 博士
朱连德 博士:目前被OIE(世界动物卫生组织)认定的无猪瘟疫病国家主要集中于养猪业发达的北美和欧盟区域。美国的猪瘟净化工作开始于1961年,持续了17年,经历了准备、降低发病率、猪瘟净化和防止再次感染4个阶段,于1977年宣布净化成功。欧盟于1980年颁布并实施了控制和扑灭猪瘟的法规,随后各成员国陆续完成净化,并于1990年停止了疫苗免疫。其中有很多经验值得我们借鉴:
1)高效疫苗正确免疫
欧盟净化过程中,使用中国C株为种毒且PD50>100的疫苗,保证疫苗安全有效。免疫在官方监控下进行,通过专业的兽医服务保证地区中所有猪只均正确接种官方批准的合格疫苗。
2)早期诊断和流行病学调查
在猪瘟净化过程中以及现在,欧美国家均不间断地通过兽医和兽医服务对猪群的健康状态进行监控,发现猪瘟疑似病例即送往专业实验室进行诊断,并依照法定预案对疑似感染群体和区域进行管控。同时通过广泛的流行病学调查了解疾病状况,评估病毒入侵和传播风险。
3)进行猪群鉴定,严格推行区域化管理,限制猪只流动
荷兰等国在1997年重新暴发了猪瘟,分子流行病学和溯源追踪的方法显示案例之间具有相关性,且感染场之间发生过接触。与之相邻的比利时,在确诊猪瘟案例后,对感染场和相关接触猪场进行快速扑杀和净化,并极有成效,40 d后官方恢复了其无猪瘟疫病国家的状态。因此对猪群感染状态的鉴定,以及在此基础上的疫区划定和猪只流动管理对猪瘟净化意义重大。
4)良好的兽医服务体系和动物健康保障体系
上述的疫苗免疫、诊断、流行病学调查和疫区划分都需要专业的兽医和兽医服务进行实现,是猪瘟防控净化措施合理制定和执行成功的关键。涵盖了生物安全及良好操作规范的动物健康保障体系,能够帮助农场提高猪群健康状态并降低疾病感染风险。
5)国家层面的政策和立法支持
在美国和欧盟猪瘟净化项目均开始于政府一系列的立法,并且不断修订和完善,明确了猪瘟防控和净化的各项工作。同时,政府还投入大量的资金提升猪瘟研究水平,并对相关人员进行系统培训。
图7 李忠华 经理
李忠华 经理:国际上的疫病净化一般分三步走。即第一步:对全群进行广泛高密度免疫疫苗,提高群体的免疫力;第二步:全面停止疫苗免疫,建立完善的疫情监控体系,对感染猪场进行全面扑杀,并对所有病例进行全面的流行病学调查;第三步:宣告扑灭净化疫病,在停止使用疫苗且无病例发生后1年开始计时,计时开始后继续进行监控并停止使用疫苗,无此疫病发生即宣布该病已经净化。国外猪瘟成功净化给我们诸多经验,并结合我国猪瘟的流行情况,对于我国规模化猪场猪瘟净化可分为三个阶段:
第一阶段:摸清当前种猪群猪瘟感染情况:通过母猪一定比例、公猪全部采血检测抗体(抗体不理想种猪群全群采血),了解种猪群基础免疫情况。对于抗体不合格猪群选择优质疫苗,进行二次免疫(建议在一免后4~6周进行二免),免疫后6周再次检测猪瘟抗体,淘汰抗体阴性猪。保证种猪群抗体合格率在90%以上。公猪精液带野毒会导致水平 —垂直传播。坚决杜绝公猪带毒精液排毒情况。
第二阶段:选择优质疫苗,坚持免疫监测,维持猪群高水平的猪瘟抗体:母猪群合格率90%以上,并对不合格的10%进行扁桃体采样RTPCR检测猪瘟抗原并测序,分析是否带猪瘟野毒,坚决淘汰野毒感染猪。同时对所产弱仔、死胎、畸形猪进行检测,测到野毒、严格消毒处理的同时,反推淘汰相应的种猪。后备猪进入使用前进行抗体检测,不合格的不许种用。
第三阶段:全群净化阶段,选择优质疫苗,坚持免疫监测。种猪群全群进行扁桃体采样、测序检测,淘汰阳性猪。谨慎引种、必须引种时采扁桃体检测,阴性者允许合群。定期检测抗体、抗原。并于种猪群基本稳定后设立商品猪和母猪哨兵猪(猪瘟抗体为阴性)。设立后一段时间,检测哨兵猪及其后代的猪瘟抗体,应保持阴性。
净化完成、生产稳定后应坚持每年检测,按比例采血、采扁桃体进行持续抗原抗体监测。带毒种猪是猪瘟流行的根本原因,种猪场净化原则就是通过反复筛查检测找到传染源并将其淘汰。建立健康猪,繁育健康后代。另外加强生物安全措施、全进全出、空栏消毒等(切断传播途径)措施,及选择优质疫苗,制定合理免疫程序(消除易感动物)对于猪瘟净化同样重要。对于猪场来说,净化猪瘟是全场协同、逐步、系统的过程。
周绪斌 总监:世界上养猪水平较高的国家如美国、加拿大、澳大利亚、新西兰及欧洲一些国家,主要是采取扑杀的方式,成功地消灭了猪瘟。
根据OIE官网公布的信息,目前已经净化猪瘟的国家有美国、加拿大、新西兰、日本和爱尔兰等国家,其中美国1961年颁布《全国猪瘟消灭计划》,到1977年宣布净化猪瘟,仅用了16年。美国净化猪瘟是在其农业部的带领下,各个猪场及相关企业、各州与政府机构、专家团体、公众多方协作,执行扑杀政策,而不仅依赖疫苗控制,实现猪场净化。美国净化猪瘟后获得了巨大的利益,通过比较实施猪瘟根除计划和不执行计划取得的利益,成功实施猪瘟根除计划的效益和成本比为13.2(即每净化过程中每投入1元钱,获得13.2元钱的回报)。
欧盟颁布和实施了一系列的控制和消灭猪瘟的法规,但至今整个欧盟并没有彻底消灭猪瘟,其主要原因是野猪群中的猪瘟流行。欧洲的猪瘟控制也是通过弱毒苗的密集免疫,降低猪瘟的流行率后全群停止免疫,辅以扑杀政策。在欧洲原则上禁止使用猪瘟疫苗,但在确定存在猪瘟的传播风险后,成员国可以向欧盟提出紧急免疫申请。但由于疫苗免疫猪和感染猪无法鉴别,因此所有免疫猪都应被屠宰或扑杀。