芪芍抗毒颗粒的提取工艺研究

景倩

摘 要：本文对芪芍抗毒颗粒中黄芪甲苷的提取工艺进行研究。最佳提取工艺为提取3次，第一次加入10倍量蒸馏水，提取1小时，第二次加入10倍量蒸馏水提取1小时，第三次加入10倍量蒸馏水提取1小时，浓缩。本方法可靠、简单，可用于生产。

关键词：芪芍抗毒颗粒；工艺；研究

黄芪为芪芍抗毒颗粒主要成分之一。黄芪的药用迄今已有2000多年的历史，近几年来野生黄芪的数量急剧减少，为此确定该植物为渐危种，国家三级保护植物[1-3]。黄芪用于治疗气虚乏力，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，血虚萎黄，内热消渴，慢性肾炎，蛋白尿，糖尿病等。现代医学研究表明，黄芪含皂甙、甜菜碱、胆碱、叶酸、多糖、蔗糖、多种氨基酸等多种微量元素，促进蛋白质代谢，降血糖，改善肾功能，能消除实验性肾炎蛋白尿，增强心肌收缩力，调节血糖含量。本文对芪芍抗毒颗粒中黄芪甲苷提取工艺进行研究。

1 仪器与试药

Temp 300双通道热电偶式温度计（塞默飞世尔科技水质分析仪器）； HP系列无油真空泵（天津市恒奥科技发展有限公司）；R-210瑞士步琦旋转蒸发器（上海沃珑仪器有限公司）；HN-6AL汗诺功率可调超声波清洗（上海汗诺仪器有限公司）；Cascada III.I全新智能纯水/超纯水一体化系统（颇尔过滤器（北京）有限公司）；英国艾德姆PWC分析天平（艾德姆衡器（武汉）有限公司）；天瑞仪器LC-310液相色谱（江苏天瑞仪器股份有限公司）。乙腈（上海埃彼化学试剂有限公司）、甲醇（上海埃彼化学试剂有限公司）、磷酸（上海埃彼化学试剂有限公司）、正丁醇（长沙江龙化工科技有限公司）、乙醇（上海埃彼化学试剂有限公司）。

2 方法与结果

2.1 水提

按处方称取药材，粉碎为粗粉，至于圆底烧瓶内，分别加4倍、5倍、6倍、8倍、10倍水，浸泡0.5小时，提取二次，第一次2小时，第二次1小时，过滤，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.20（70摄氏度测）。采用高效液相测定浓缩膏含量。

2.2 醇提

按处方称取药材，粉碎为粗粉，至于回流提取器内，分别加4倍、5倍、6倍、8倍、10倍60%乙醇，浸泡0.5小时，提取二次，第一次2小时，第二次1小时，过滤，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.20（70摄氏度测）。采用高效液相测定浓缩膏含量。

2.3 渗滤

按处方称取药材，粉碎为粗粉，至于渗滤罐内，分别采用4倍、5倍、6倍、8倍、10倍60%乙醇进行渗漉，渗漉速度为每分钟1升，合并渗漉液，减压浓缩至相对密度为1.20（70摄氏度测）。采用高效液相測定浓缩膏含量。

2.4 浸泡

按处方称取药材，粉碎为粗粉，至于浸泡罐内，分别采用4倍、5倍、6倍、8倍、10倍60%乙醇浸泡8小时，合并浸泡液，减压浓缩至相对密度为1.20（70摄氏度测）。采用高效液相测定浓缩膏含量。

2.5 正交试验设计

实验结果表明，水提取工艺优于其他工艺。选择提取次数、加水倍数和提取时间作为考察因素，采用正交试验法对影响提取效率的其它工艺条件进行优选。采用3个考察水平，用L9（34）正交表进行试验，因素水平表见表1。

表1 大黄酚提取工艺因素水平表

3 含量测定

3.1 色谱条件

色谱柱为Waters SunFire C18液相色谱柱 （规格250×4.6mm，5um）；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按下表进行梯度洗脱，漂移管温度为105摄氏度；载气流速为3.0ml/min；放大倍数为2[4-5]。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不得低于2000。

3.2 供试品溶液的制备

取芪芍抗毒颗粒浓缩膏，精密称定，加20毫升水，超声5分钟，用水饱和过的正丁醇振摇提取四次，每次20毫升，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次20毫升，弃去氨液，正丁醇层水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至5毫升容量瓶，用甲醇定容，摇匀，过0.45μm的滤膜，即得。

3.3 对照品溶液的制备

精密称取黄芪甲苷对照品约50mg，置10毫升棕色容量瓶中，用甲醇超声波振荡溶解并用甲醇稀释至刻度，摇匀，精密吸取10毫升，置100毫升棕色容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得（每1mL溶液中含黄芪甲苷0.5mg）。

3.4 标准曲线的制备

制备浓度为0.1mg·mL-1、0.2mg·mL-1、0.4mg·mL-1、0.6mg·mL-1、0.8mg·mL-1、1.0mg·mL-1、1.2mgomL-1、1.4mgomL-1、1.6mgomL-1、1.8mgomL-1、2.0mgomL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值的对数A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，黄芪甲苷对照品在0.1～2.0mg·mL-1范围内线性关系良好。

3.5 回收率试验

取已知含量的同一批供试品各6份，分别精密添加一定量的黄芪甲苷对照品，测定含量，计算回收率。平均回收率为98.3%，RSD为0.92%。

4 实验结果

按照L9（34）正交设计表条件进行试验，得到最佳提取工艺为提取3次，第一次加入10倍量蒸馏水，提取1小时，第二次加入10倍量蒸馏水提取1小时，第三次加入10倍量蒸馏水提取1小时，浓缩。本工艺稳定、可行、收率高。

参考文献

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