丁德芹,李澄,2,刘璐,2,胡瑶,陈道桢
(1.东南大学 医学院,江苏 南京 210009;2.东南大学附属中大医院 放射科与核医学科,江苏 南京 210009; 3.南京医科大学,江苏 南京 210029;4.南京医科大学附属无锡妇幼保健院 妇科,江苏 无锡 214002)
丁德芹1,李澄1,2,刘璐1,2,胡瑶3,陈道桢4
(1.东南大学 医学院,江苏 南京 210009;2.东南大学附属中大医院 放射科与核医学科,江苏 南京 210009; 3.南京医科大学,江苏 南京 210029;4.南京医科大学附属无锡妇幼保健院 妇科,江苏 无锡 214002)
1.2 实验细胞及动物
人源Hela细胞株及人正常宫颈上皮细胞HCerEpic由中国科学院细胞库购得;Balb/C裸鼠若干只,雌性,4~6周龄,体重18~22 g,购于南京大学南京生物研究院实验动物中心,根据无特殊病原体SPF标准饲养于东南大学附属中大医院动物实验中心。
1.3 细胞培养及传代
分别取Hela细胞和HCerEpic细胞,加入含10%胎牛血清的DMEM培养基中,置于37 ℃、5%CO2培养箱中,当细胞生长至80%以上时加入适量胰蛋白酶消化细胞,加入适量培养基制成细胞悬液,离心,PBS洗涤,按1∶3比例加到含有培养基的培养瓶中培养,重复传代多次,以备实验所需。
1.4 Western Blot检测
1.5 免疫荧光结合实验
1.8 荷瘤裸鼠模型建立及SPECT显像
取对数生长期的HELA细胞,制备成细胞悬液并计数,用无菌1 ml注射器抽取100 μl细胞悬液接种到裸鼠右腋皮下,隔天观察裸鼠生命体征,皮下接种2周左右,瘤体直径达6~12 mm时备用。
1.9 统计学处理
人正常宫颈上皮细胞 宫颈癌细胞
2.2 免疫荧光结合实验
表1 标记产物在室温与血清混合后放化纯度(n=3) %
图2免疫荧光细胞结合实验验×100
全身放射性显影较淡,而另一组经瘤内间质注射游离99TcmO4-后30 min,可见肿瘤所在部位放射性摄取迅速消退,而胃、肝脏、双肾及膀胱所在部位仍主要见放射性积聚,且随着时间推移,放射性摄取逐渐增加,结果见图3。
图3皮下移植瘤裸鼠模型不同时间点SPECT显像
(1.SchoolofMedicine,SoutheastUniversity,Nanjing210009,China;2.DepartmentofRadiologyandNuclearMedicine,ZhongdaHospital,SoutheastUniversity,Nanjing210009,China;3.NanjingMedicalUniversity,Nanjing210029,China; 4.DepartmentofGynaecology,WuxiMaternalandChildHealthCareHospital,NanjingMedicalUniversity,Wuxi214002,China)
国家自然科学基金资助项目(81372480)
R445.5
A
颜焕敏)