川芎药材及饮片质量标准提升研究

钱晓磊

江苏省中医院（南京中医药大学附属医院）药学部 江苏省南京市 210029

川芎药材及饮片质量标准提升研究

钱晓磊

江苏省中医院（南京中医药大学附属医院）药学部 江苏省南京市 210029

目的：分析川芎药材及饮片质量控制方法，以便提升其质量标准。方法：以川芎为研究对象、甲醇-水（52:18）为流动相、丁苯酞为替代对照品，采用高效液相色谱法（HPLC）以相对较正因子测定其成分内丁苯酞、藁本内酯的含量。结果：以干燥品为计算标准，川芎药材成分内丁苯酚≥0.031%、藁本内酯≥0.81%，而饮片成分内的丁苯酚≥0.027%、藁本内酯≥0.061%。结论：经过限制川芎药材及饮片内丁苯酚、藁本内酯含量，可以有效完善川芎药材及饮片质量标准，便于川芎药材及饮片质量控制。

川芎；质量标准；丁苯酚；藁本内酯

川芎是一种中药植物，辛温香燥，常用于活血行气、祛风止痛，适用于瘀血阻滞各种病症、风头痛、风湿痹的治疗[1]。现代药理学指出，该药含有多种活性成分，如挥发油类（苯酞类化合物）、生物碱、有机酸等，其中苯酞类化合物（丁苯酚、藁本内酯）的舒张血管、改善微循环等作用较强，是治疗心脑血管疾病的重要成分，是评价川芎质量的重要指标，然而化学稳定性较差，无法成为国家法定的含量测定对照品。相关研究提出，在同一时间内采用替代对照品法对川芎的丁苯酚、藁本内酯成分含量进行测定，以丁苯酞为藁本内酯的替代对照品，两者在相对校正因子计算下可以取得理想的效果[2]。鉴于此，本文进一步测定川芎药材及饮片内丁苯酞、藁本内酯成分的含量，以便明确其含量的限度标准，不断完善川芎材及饮片的质量标准，如下。

1 资料与方法

1.1 试验仪器与试剂

Agilent Eclipse ΧDB-C18、Agilent120°高效液相色谱仪、色谱柱、AUW220D型十万分之一天平、KQ-300B超声波清洗仪、Milli- Integral 3超纯水机。

川芎药材来自于四川的多个城市，川芎饮片由四川中药材饮片公司提供，均经过四川省中医药科学院舒光明研究员鉴定。

丁苯酞对照品、藁本内酯对照品自制，以水作为超纯水，以甲醇作为色谱纯，其余试剂均作为分析纯。

1.2 方法

1.2.1 丁苯酚、藁本内酯的对照品溶液与两者混合对照品溶液的配置

丁苯酚对照品溶液，20mg丁苯酞对照品置于25mL工量瓶内，加以无水乙醇溶解，直至刻度，充分摇匀成丁苯酞对照品母液，取1.0ml置入10ml量瓶内，加以无水乙醇溶解，直至刻度，充分摇匀成丁苯酞对照品溶液Ⅰ，从中取1.0ml，按照上述方法完成操作，得到丁苯酞对照品溶液Ⅱ；藁本内酯对照品溶液：取25mg藁本内酯对照品置入25ml棕色量瓶内，同时加入无水乙醇进行溶解、稀释、定容，直到刻度，然后充分摇匀，即藁本内酯对照品母液，取出1.0ml藁本内酯对照品母液置入10ml棕色量瓶内，并按照以上方法完成操作即可；两者混合对照品溶液：丁苯酞对照品母液、藁本内酯对照品母液分别量取1.0ml，均置入同一10ml棕色量瓶内，加以甲醇-水，直到刻度，充分摇匀即可。

1.2.2 供试品溶液的配置

0.2 g供试品粉末置于具塞锥形瓶内，加以25ml甲醇，称重量，提供超声处理0.5h，冷却，再称重量，然后选用甲醇补足减失的重量，充分摇匀、滤过，量取续滤液置入棕色瓶内即可。

1.2.3 色谱条件

柱温（35℃）、流动相（甲醇-水）、色谱柱（Agilent Eclipse ΧDB）、丁苯酞与藁本内酯的检测波长分别为230nm、330nm，流速（1.0ml·min-1。

2 结果

2.1 丁苯酞、藁本内酯的标准曲线与湘桂校正因子f值

把进样量Χ作为横坐标；把峰面积Y作为纵坐标，然后分别计算丁苯酚、藁本内酯的标准曲线、相对校正因子f值，详见表1所示。

表1：丁苯酞、藁本内酯标准曲线、湘桂校正因子f值的比较

2.2 精密度、稳定性、重复性试验

精密度操作如下：取5μL同一川芎样品溶液注入液相色谱仪，分别测定丁苯酞、藁本内酯峰而积，连做6次，测得丁苯酞、藁本内酯的RSD分别是0.07%、0.13%，说明仪器精密性完好；稳定性：取5μL同一川芎样品溶液，共测定6次，分别每隔一定时间进行一次测定，测得结果显示出丁苯酞RSD为1.20%、藁本内酯RSD为0.79%，说明24小时内测定结果处于稳定状态；重复性试验：平行取6份同一川样品溶液测得丁苯酞RSD为1.57%、藁本内酯RSD为0.95%，说明此方法具备良好的重复性。

2.3 加样回收率

0.1 g丁苯酞的川芎样品溶液加入1.0mL丁苯酚对照品溶液内，测得平均回收率（97.50%）、RSD（1.23%），见表2。

表2：丁苯酞、藁本内酯的标准曲线与湘桂校正因子f值

表3：样品含量测定

2.4 样品含量测定

以甲苯法测定川芎样品的水分、以高低浓度相结合方法对川芎药材与饮片内丁苯酞、藁本内酯成分含量进行测定，然后利用藁本内酯对照品外标法对所测定结果的准确性予以验证，同时与相应样品水分相结合，按照干燥品方式分别计算出丁苯酞、藁本内酯成分含量，详见表3。

3 讨论

就川芎药材及饮片质量标准而言，合理、正确的方法对其成分含量的鉴定具有重要意义，是由于优化质量控制标准，有助于提升药效，确保药物质量水平[3]。目前，针对川芎药材及饮片质量测定主要是以丁苯酚、藁本内酯为主，并通过薄层色谱法、HPLC法的应用，可以有效提高川芎药材及饮片成分的质量标准。本文以川芎药材及饮片为研究对象，以对照品替代法优化方式、HPLC法测定不同地区不同批号且具有一定程度代表性的川芎药材及饮片内丁苯酚、藁本内酯含量，目的在于为川芎药材及饮片的质量控制提供科学标准。研究结果显示，川芎药材的丁苯酞成分含量波动范围为0.0215%～0.0683%，而川芎饮片的丁苯酚成分含量波动范围为0.0104～0.0483%；川芎药材的藁本内酯成分含量波动范围为0.597%～1.1480%、而川芎饮片的藁本内酯成分含量的波动范围在0.451%～1.310%之间，将两者结果在干燥品方式作用下进行计算，显示出川芎药材的丁苯酞、藁本内酯成分含量分别≥0.031%、≥0.81%，而川芎饮片的丁苯酚成分≥0.027%、藁本内酯成分含量≥0.061%，有助于川芎药材与饮片质量标准提供重要依据。

由于样品内丁苯酞含量为0.031%、藁本内酯含量为0.081%，两者之间含量相差28倍，差异显著，因此在配置两种不同浓度对照品时应该分别和供试品内丁苯酚、藁本内酯含量相匹配，具体是指运用浓度对照品对藁本内酯成分含量进行测定，同时采用低浓度对照品对丁苯酚成分含量进行测定。除此之外，在配置样品期间分析比较川芎常规提取溶剂与提取所需时间，得出70%甲醇、70%乙醇、甲醇、乙醇4种溶剂，提取效果最差的是乙醇，而甲醇提取溶液内2种成分峰而积均较其他提取液大，所以可以确定甲醇为提取溶剂，一旦明确提取溶剂，便运用超声处理15min、0.5小时、1小时，结果得出，超声处理0.5小时的效果最佳且耗时短。因此，可以明确以超声处理0.5小时为宜。

总之，经过限制川芎药材及饮片内丁苯酚、藁本内酯含量，可以有效提升川芎药材及饮片的质量标准。

[1]吕非非.川芎饮片不同等级质量评价研究[D].成都中医药大学,2014.

[2]田璐.白芍等十二种常用中药饮片质量标准研究[D].北京中医药大学,2014.

[3]刘晓芬.中药川芎饮片效期相关因素研究[D].成都中医药大学,2014.

[4]林瑞东.川芎配方颗粒生产工艺和质量标准的研究[D].吉林大学,2015.

[5]姚艺新,华芳,洪远林,等.川芎药材、饮片及其中成药抗血小板聚集活性的生物检定方法学研究[J].中草药,2017,48(11):2249-2254.

钱晓磊（1988-），女，江苏省南京市人。大学本科学历，学士学位。中药师。主要从事门诊中药房调配工作。