范文彤
(天津怀仁制药有限公司,天津 300000)
从黄芪中提取黄芪多糖的工艺的考察研究
范文彤
(天津怀仁制药有限公司,天津 300000)
采用沸水煮提法从药用黄芪中提取黄芪多糖,经正交实验确定最优提取工艺为:浸泡3小时,提取4次,每次提取4小时,首次提取溶剂确定为9倍生药量,其余3次为8倍生药量,同时对实验条件及方法进行了简要的研究与探讨。
黄芪;黄芪多糖;多糖;提取;正交试验
为豆科植物黄芪的干燥根或根茎。
黄芪药材原料由中新药业集团股份有限公司中新制药厂购自甘肃。按照中国药典2015年版一部 “黄芪”项下对其鉴定,结果所选黄芪品种为豆科植物黄芪的干燥根或根茎。药材标准为达到中国药典2015年版一部“黄芪”项下要求,多糖含量在3.5%以上。活作用[6]。
经过初步研究,黄芪中黄芪多糖含量为4%左右,初步药理表明黄芪多糖能益气健脾,提高人体免疫力,有开发利用的价值,故确定黄芪多糖为提取的有效部位,并相应进行工艺和含量检测方面的研究
植物多糖是普遍存在于植物中的一种成分,近年来的研究发现许多植物多糖具有增强人体免疫力,抗肿瘤[1],降血糖[2]的作用,罗永明[3]等研究表明茶芎多糖的非常显著的拮抗Cy所致的体液免疫抑制,使其恢复正常;李江[4]等从防风水提液中得到两种酸性杂多糖XC-1、XC-2,XC-2能显著提高小鼠脾脏淋巴细胞的增殖,因而显著增强机体免疫功能。徐琳本[4]按常规法接种肿瘤法,将瘤株接种到小鼠,后给予羧甲基茯苓多糖口服液,结果显示有显著抑瘤的作用,吕小英[6]等研究了红毛五加多糖(AGP)体外抗肿瘤机制,表明AGP有诱导肿瘤细胞SGC-7901调亡。以上研究表明多糖有提高人体免疫力,抗肿瘤的功效。
有关植物多糖的研究是近些年才开始的,王岳五[5]等从甘草残渣中分离一种中性多糖(GPS),研究表明GPS对牛爱滋病毒(BIV)有一定抑制作用,对腺病毒Ⅲ型(AdVⅢ)和柯萨奇病毒(CBV3)也有明显抑制和直接灭
关于提取的工艺,原则上设计遵循传统的沸水煮提的方法即采用水煮提取黄芪中的黄芪多糖。
近年来在植物多糖的提取分离方面有许多文献报道,施亚琴[7]研究了红毛五加的提取和含量检测,方小明[8]等做了黄精多糖方面的研究,纪耀华[9]等做了芦荟多糖提取方面的研究等等,大多数植物多糖的提取分离均采用水提的方法来得到植物中的活性多糖。
经研究查明黄芪多糖属于大分子物质,能溶于热水或在热水中形成胶体溶液故可采用沸水煮提的方法加以提取。
采用正交实验对提取工艺进行最佳工艺条件的筛选。以黄芪多糖的收率和含量作为考察提取效果的指标。选用影响提取效果较大的因素:即溶剂用量(A),提取时间(B),提取次数(C),浸泡时间(D),利用L9(3)4正交试验表,设计了四个因素,三个水平的试验,通过试验优选得出提取最佳条件。试验方案及结果归纳于表1至表6。
表1 L9(34)因素水平表
表2 正交实验设计表(n,%)
表3 水提工艺正交实验结果分析表
表4 水提工艺方差分析表(F0.05(2,4)=6.94,F0.01(2,4)=18.00)
表5 对因素提取次数(B)中4次和5次分析
表6 对因素水提时间(C)中4小时和5小时分析
结论分析:直观分析见表三,方差分析见表四,因素(B)中4次和5次分析,因素C中4小时和5小时分析。结果表明影响水提工艺的主要因素为提取次数(B)和提取时间(C),它们都具有极高的显著性。通过对提取次数分析,两水平之间的差异无显著性;对提取时间分析,两水平之间的差异无显著性。由此考察结果推定:提取时间暂定为4小时,首次提取溶剂暂定为9倍生药量,其余3次为8倍生药量,浸泡时间暂定为3小时,提取4次。
综合试验考察并考虑到生产实际情况,最后确定最佳水提操作工艺为:浸泡3小时,提取4次,每次提取4小时,首次提取溶剂确定为9倍生药量,其余3次为8倍生药量。
总之,自植物来源的多糖类化合物由于它们的独特功能和很低的毒性,将会不断的被利用和开发伴,随着植物多糖研究的不断深入,其在提取开发上将会有更多的更好的更行之有效的方法产生。
[1] 张 昕,等.香菇多糖的抗肿瘤和降糖作用机制的研究进展,中国药事2008:22(2):149-154.
[2] 罗永明,等.茶芎多糖的提取及免疫活性研究,中草药1999,30(2):124-125.
[3] 李 江,等.防风多糖的研究,中草药1999,3(09):652-653.
[4] 王岳五,等.南开大学学报(自然科学)2001,34(2):126.
[5] 王岳五,等.南开大学学报(自然科学)2000,12,33,48.
[6] 施亚琴,等.红毛五加的提取和含量检测,华西药学杂志,1994,9(20):73.
[7] 方小明,等.黄精多糖的提取和含量检测,时珍国药研究,1995,6(1):16.
[8] 纪耀华,等.芦荟多糖的提取和与粗多糖中总糖的含量分析 时珍国医国药,2001,12(5):407.
Study on the extraction of Astragalus Polysaccharide from Radix astragali
FAN Wen-tong
(Tianjin Huairen Pharmaceutical Co,Ltd,Tianjin 300000,China)
using boiling water extraction of Astragalus Polysaccharides from medicinal Astragalus,by orthogonal experiment to determine the optimal extraction process was:soaking for 3 hours,4 times of extraction,extraction time of 4 hours for the fi rst time,extraction solvent is determined as 9 times dosage,the remaining 3 times 8 times dosage,and the experimental conditions and methods the brief research and discussion.
Astragalus membranaceus; Astragalus polysaccharides; Polysaccharides; Extraction;Orthogonal test
R286.1
A
ISSN.2095-8242.2017.068.13274.02
本文编辑:赵小龙