涎腺超声联合血清BAFF检测在原发性干燥综合征诊断中的价值

耿保庆 黄娴倩 干敏芝 彭勇 朱梦雅 应颖 黄海燕 陈勇

涎腺超声联合血清BAFF检测在原发性干燥综合征诊断中的价值

耿保庆 黄娴倩 干敏芝 彭勇 朱梦雅 应颖 黄海燕 陈勇

目的 探讨涎腺超声联合血清B淋巴细胞刺激因子（BAFF）检测在原发性干燥综合征（pSS）诊断中的临床价值。方法 选择pSS患者80例（pSS组），类风湿关节炎（RA）患者60例（RA组），健康体检者20例（健康对照组）。采用ELISA法检测各组血清BAFF、增殖诱导配体（APRIL）、TNF-ɑ、IL-1β及IL-6水平；通过二维超声评估pSS患者涎腺受累情况。分析比较各组血清BAFF、APRIL、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6水平，并分析pSS患者血清BAFF、APRIL、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6与涎腺超声评分的相关性。结果 3组血清BAFF、IL-1β、TNF-ɑ比较差异均有统计学意义（均P＜0.05），其中pSS组患者血清BAFF、IL-1β、TNF-ɑ水平明显高于RA组与健康对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。pSS患者血清BAFF与涎腺评分呈负相关（r=-0.462，P＜0.05），血清IL-1β与涎腺评分呈正相关（r=0.403，P＜0.05）。涎腺超声、血清BAFF对pSS诊断的灵敏度高于抗干燥综合征A抗原（SSA）/干燥综合征B抗原（SSB）、类风湿因子（RF），差异均有统计学意义（均P＜0.05）。对于涎腺超声评分≤2分的早期pSS患者，涎腺超声联合BAFF检测诊断特异度达到96.77%。结论 pSS患者血清BAFF在疾病的早期即有明显升高，有助于早期诊断。涎腺超声对pSS的诊断比抗SSA/SSB有更高的灵敏度，特异度相当；BAFF对pSS的诊断比抗SSA/SSB灵敏度高，但特异度较低。对于涎腺超声评分≤2分的pSS患者，涎腺超声联合血清BAFF检测可提高诊断的特异度，可作为早期筛查指标。

B淋巴细胞刺激因子 涎腺超声 原发性干燥综合征

原发性干燥综合征（primary Sjogren’s syndrome ，pSS）是一种主要累及外分泌腺体的慢性自身免疫性疾病，它以单个核细胞侵犯外分泌腺体，引起这些腺体的分泌减少为特点，形成口干和眼干等症状，除外分泌腺受累外，尚可累及其他器官或系统。该病好发于中年女性，我国发病率约为0.29%～0.77%[1]。pSS临床表现复杂多样，病因复杂，诊断上颇为棘手。当前普遍应用的是2002年修订的欧洲抗风湿病联盟（EULAR）提出的pSS分类标准[2]，其特异度较高，但灵敏度较差，对于新发pSS或疑似pSS的患者易因缺乏特异度而容易延误诊断。近年来，涎腺超声以其方便、无创、费用低的优势受到越来越多的关注，大量研究证实其对pSS的诊断具有较高的灵敏度和特异度。但涎腺超声检查所发现的低回声结节或高回声线，亦不是pSS患者涎腺早期改变的特异性表现，需要新的指标加以补充，以期做到早诊断、早治疗，从而提高患者预后及生活质量。因此，积极探讨能够早期诊断且无创的技术手段是pSS防治工作的重点也是当前亟待解决的问题。B淋巴细胞刺激因子（BAFF）、增殖诱导配体（APRIL）都是TNF超家族的新成员，可调节体液免疫，并在B淋巴细胞的成熟和活化及pSS发病过程中起重要作用。本研究通过涎腺超声联合血清BAFF检测与抗干燥综合征A抗原（SSA）/干燥综合征B抗原（SSB）、类风湿因子（RF）等临床常用指标的比较，旨在探讨涎腺超声联合血清BAFF检测在pSS诊断中的价值。

1 对象和方法

1.1 对象 选择2016年2月至2017年2月在本院住院或门诊确诊的pSS患者80例（根据EULAR 2002年修订的pSS分类标准[2]）（pSS组），男8例，女72例；年龄26～80（54.61±12.13）岁。选择同期在本院住院或门诊确诊的类风湿关节炎（RA）患者60例[（根据美国风湿病学会（ACR）1987年修订的RA分类标准[3]）]（RA组），男 10 例，女 50 例；年龄 45～78（60.28±8.74）岁。选择同期健康体检者20例作为健康对照组，男4例，女16例；年龄 36～70（56.11±8.74）岁。3 组性别和年龄比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。排除标准：颈部、头面部放疗史、丙型肝炎病毒感染、艾滋病、结节病、淀粉样变、移植物抗宿主病、免疫球蛋白（Ig）G4相关性疾病。本研究经医院伦理委员会批准和患者知情同意。

1.2 方法

1.2.1 血清标本检测 采集3组受检者清晨空腹外周静脉血5ml，以3 000r/min离心5min，取上清液，分装至试管后立即放入－70℃低温冰箱保存，集中测定。采用ELISA法（美国宝特公司ELX800酶标仪读板，Gene 5软件） 检测血清 BAFF、APRIL、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6 水平；免疫印迹法（全自动电化学发光免疫分析仪，瑞士Roche公司）检测血清抗SSA/SSB水平；免疫比浊法（美国Beckman Coulter公司免疫浊度分析仪）检测血清抗RF 水平。BAFF、APRIL、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6 试剂盒均购自武汉博士德生物工程有限公司。抗SSA/SSB试剂盒购自德国欧蒙生物技术公司。抗SSA/SSB、RF用于诊断pSS的标准参照EULAR 2002年干燥综合征国际分类标准[2]。

1.2.2 涎腺超声检查 采用意大利Esaote彩色超声扫描仪，探头频率8～13MHz，检测双侧腮腺及双侧颌下腺，结果参照Elke等[4]制定的涎腺超声简化评分系统评定，0分：正常腺体，回声均匀；1分：实质回声减低，轻度不均匀，可见少许高回声线；2分：实质明显回声不均匀，弥漫分布的低回声结节，直径＜2mm，高回声线增多；3分：结节状低呼声区增大融合，直径2～6mm，高回声线分布杂乱；4分：低回声结节＞6mm，或腺体萎缩，多发高回声线。将涎腺超声分≤2分的患者视为早期pSS患者。

1.3 统计学处理 采用SPSS 17.0统计软件。计量资料以表示，组间比较采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验。计数资料组间比较采用χ2检验。采用Spearman秩相关分析 pSS患者血清 BAFF、APRIL、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6 水平与涎腺超声评分的相关性。P＜0.05为差异统有计学意义。

2 结果

2.1 3 组血清 BAFF、APRIL、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6 比较3组血清BAFF、TNF-ɑ、IL-1β比较差异均有统计学意义（均 P＜0.05），其中 pSS组患者血清 BAFF、TNF-ɑ、IL-1β明显高于RA组与健康对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；而3组APRIL及IL-6比较差异均无统计学意义（均P＞0.05），见表1。

表 1 3 组血清 BAFF、APRIL、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6 比较

2.2 涎腺超声检查结果 pSS患者涎腺超声评分0分0例，1分5例，2分18例，3分47例，4分10例。涎腺超声评分≤2分的早期pSS患者共23例。

2.3 pSS 患者血清 BAFF、APRIL、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6与涎腺超声评分的相关性 pSS患者血清APRIL、TNF-ɑ、IL-6与涎腺超声评分均无相关性（r=-0.102、0.098和-0.141，均P＞0.05），血清BAFF与涎腺评分呈负相关（r=-0.462，P＜0.05），血清 IL-1β 与涎腺评分呈正相关（r=0.403，P＜0.05）。

2.4 涎腺超声与实验室检查指标的诊断效能比较 涎腺超声、血清BAFF对pSS诊断的灵敏度高于抗SSA/SSB和RF，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表2。

表2 涎腺超声与实验室检查指标的诊断效能比较（%）

2.5 涎腺超声联合血清BAFF检测在涎腺超声评分≤2分pSS患者中诊断的灵敏度及特异度 对于涎腺超声评分≤2分的23例早期pSS患者，涎腺超声联合BAFF检测诊断特异度达到96.77%，见表3。

表3 涎腺超声联合BAFF检测在涎腺评分≤2分pSS患者中诊断的灵敏度及特异度（%）

3 讨论

pSS是一种常见病、多发病，主要累及外分泌腺，至今病因尚不十分清楚[5]，且缺乏灵敏度及特异度均高的单项检查手段[6]，常常被误诊，患者从初发症状到最后确诊可长达20余年，给患者造成长期精神与肉体上的痛苦[7]。随着对pSS认识的逐渐深入，其分类标准不断修正与改善，当前普遍应用的是EULAR 2002年修订的pSS分类标准[2]，其特异度较高（98.7%），但灵敏度较差（77.9%），对于新发pSS或疑似pSS的患者易因缺乏特异度而延误诊断。近年来涎腺超声因其无创、方便、价格低廉等优势受到关注，大量研究表明，可提供丰富的定性、定量诊断信息，在鉴别诊断pSS中有较高的灵敏度及特异度[8]。2012年ACR提出以血清学指标、角膜荧光染色、唇腺活检3项检查组成的简化的分类标准[9]，克服了主观因素的影响，降低了误诊率，但尚存在有创的唇腺活检不能普遍实行或患者接受度较低等不足。

2013年Divi等[10]将涎腺超声列入分类标准中，在2002年pSS分类标准的基础上提出了新的分类标准，其灵敏度为85.7%，特异度为94.9%，灵敏度明显高于2002年标准，特异度相似。该研究认为对于疑诊患者，唇腺活检可在涎腺超声检查结果阴性以后再完善，以减轻患者有创检查的痛苦。总之，这项研究预示了涎腺超声良好的应用前景，减低了早期pSS的漏诊率，减少了唇腺活检等有创检查带来的不便。本研究通过对比涎腺超声与抗SSA/SSB抗体、RF等临床常用指标在pSS诊断中的价值，也发现涎腺超声对pSS的诊断有更高的灵敏度，且特异度相当。但是涎腺超声检查所发现的低回声结节或高回声线，亦不是pSS患者涎腺早期改变，需要新的指标加以补充。

BAFF是新近发现的TNF超家族成员之一，基因定位于染色体13q32～34，主要是由巨噬细胞和嗜中性粒细胞分泌产生，活化的T细胞和树突状细胞也有少量表达。它能促进B淋巴细胞增生、分化和产生Ig，在体液免疫中起重要作用[11]。pSS是一类侵犯外分泌腺器官，并可累及多脏器的系统性自身免疫性疾病，血清中存在多种异常的自身抗体，且常伴有多种Ig水平升高，提示B细胞功能异常、体液免疫紊乱参与其发病。

2001年Joanna等[12]研究发现BAFF的转基因小鼠随着生长出现了如唾液腺炎、唾液减少等pSS样改变。Joanna等[12]推测BAFF的转基因小鼠产生疾病的原因可能是随着脾的成熟，在BAFF的刺激下超过一个耐受点对自动反应B细胞产生一种过度存活信号，从而调节B细胞的分化。因此，BAFF诱导的B细胞的分化和耐受可能是pSS的病理学基础。在人类，也有研究提示pSS与BAFF水平升高有关。Szodoray等[13]研究发现，在BAFF水平升高的pSS患者中伴有高丙种球蛋白血症，提示过度的BAFF刺激可导致B细胞的增殖进而产生大量的Ig。Lavie等[14]研究发现，在pSS患者的血清及唾液腺中均可发现BAFF水平的升高，在淋巴细胞浸润的唾液腺中高表达BAFF，且高于血清BAFF水平。

本研究也显示pSS患者血清BAFF、IL-1β、TNF-ɑ明显升高，提示pSS患者存在B细胞的异常增殖与功能亢进。pSS患者血清BAFF与涎腺评分呈负相关，提示pSS患者血清BAFF在疾病的早期即有明显升高，有助于早期诊断；血清IL-1β与涎腺评分呈正相关，提示血清IL-1β与疾病的严重程度更相关。因此，在pSS诊治过程中定期检测BAFF、IL-1β，有助于更准确地评估疾病发展阶段或严重程度。

随着小器官超声技术的成熟，采用无创、安全的超声技术评价和随访pSS的靶器官腮腺、颌下腺的功能和形态成为可能。pSS患者涎腺二维超声图像有其特异性表现，通过此项检查能降低早期pSS的漏诊率，但灵敏度较低。本研究发现pSS患者血清BAFF在疾病的早期即有明显升高，对于涎腺超声评分≤2分的pSS患者，涎腺超声联合BAFF检测可以进一步提高诊断的特异度，可作为早期筛查指标。

综上所述，pSS患者血清BAFF在疾病的早期即有明显升高，涎腺超声联合BAFF检测可提高诊断的特异度，有助于pSS的早期诊断。

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（本文由浙江省医学会风湿病学分会推荐）

Serum BAFF test combined with salivary gland ultrasonography in diagnosis of primary Sjogren's syndrome

GENG Baoqing，HUANG Xianqian，GAN Minzhi，et al.
Department of Rheumatology，Ningbo Second Municipal Hospital，Ningbo 315010，China

Objective To assess the value of serum BAFF level combined with salivary gland ultrasonography in diagnosis of primary Sjogren's syndrome(pSS). Methods The serum levels of BAFF,APRIL,TNF-ɑ,IL-1β and IL-6 were measured by ELISA in 80 pSS patients,60 rheumatoid arthritis(RA)patients and 60 healthy controls.Salivary gland was examined with two-dimensional ultrasonography in three groups.The correlation of serum levels of BAFF,APRIL,TNF-ɑ,IL-1β,IL-6 and salivary gland ultrasonography with pSS was evaluated. Results The serum levels of BAFF,IL-1β,TNF-ɑ in pSS patients were significantly higher than those in RA patients and healthy controls(all P＜0.05),while there were no significant differences in serum levels of APRIL and IL-6 among tree groups.The salivary gland ultrasound scores was negatively correlated with serum BAFF level(r=-0.462,P＜0.05)and positively correlated with IL-1β level(r=0.403,P＜0.05).The sensitivity of salivary ultrasonography in diagnosis of pSS was higher than that of SSA/SSB and the specificity was similar.The sensitivity of serum BAFF in diagnosis of pSS was higher than that of SSA/SSB,but the specificity was lower.For pSS patients with ultrasonic score＜2min,the specificity of ultrasonography combined with BAFF was increased to 96.77%. Conclusion Serum BAFF measurement combined with salivary gland ultrasound examination can be used for screening and diagnosis of primary Sjogren's syndrome.

B cellactivating factor Salivary gland ultrasonography Primary Sjogren's syndrome

10.12056/j.issn.1006-2785.2017.39.21.2017-1608

2017年宁波市自然基金（2017A610208）

315010 宁波市第二医院风湿免疫科

陈勇，E-mail：nbdeyycy@163.com

2017-07-07）

陈丽）