李 娴 袁若愚 顾文超
(南通大学附属医院检验科,江苏 南通 226001)
肺结核患者痰结核杆菌检验的方法及效果分析
李 娴 袁若愚 顾文超
(南通大学附属医院检验科,江苏 南通 226001)
目的 分析肺结核患者痰结核杆菌检验的方法及效果。方法 选择2016年1月—2016年12月在我院接受治疗的肺结核患者75例,分别经由PCR检查以及痰涂片检查,分析两种检查结果阳性率。结果 75例肺结核患者经痰涂片检出阳性20例,约占26.67%,经PCR检查,痰结核杆菌阳性者55例,约占73.33%;PCR检查结果阳性率明显高于对照组,差异显著,χ2=28.8235,Plt;0.05。结论 肺结核患者经由PCR方法检验痰结核杆菌准确率较高,建议进一步在临床应用及推广。
肺结核;结核杆菌;痰涂片;PCR
肺结核是一种临床常见的呼吸系统传染病,主要由结核杆菌感染引起。我国目前已经成为肺结核发病的重灾区,若未能及时得到有效治疗,可导致患者病情进一步发展,甚至发展至难治性肺结核。通常情况下,肺结核多经X线检出,但很多肺结核患者无典型影像学特征[1]。PCR是一种在临床上应用范围比较广泛的检验方法,主要用于生化检验。本次研究选择2016年1月—2016年12月在我院接受治疗的肺结核患者75例,分别经由PCR检查以及痰涂片检查,分析两种检查结果阳性率,现报道如下。
1.1一般资料 选择2016年1月—2016年12月在我院接受治疗的肺结核患者75例,其中男性65例,女性10例,年龄18~70岁,平均年龄(30.54±9.85)岁,病程4个月~45年,平均病程(29.60±10.11)年;75例中包括复治者11例,约占14.67%;主要临床表现为咳嗽、气短、咯痰、胸痛、乏力、纳差、发热、盗汗以及消瘦等[2]。纳入标准:(1)临床资料完整,研究中途无脱出;(2)入院后给予CT检查、肺组织活检等,结合药敏试验结果、临床表现,明确肺结核诊断;(3)精神系统正常,能够与人正常交流,能够阅读文字资料;(4)对本次研究内容知情,自愿参与,患者本人、家属或法定代理人同意与医院签订知情同意书。排除标准:(1)临床资料不完整,经沟通后,不愿意配合本次研究者;(2)除肺结核以外的其他传染性疾病,结核杆菌感染其他脏器[3];(3)肿瘤,凝血障碍、白血病等血液系统疾病;(4)心肝肾等严重脏器疾病;(5)其他不适合参加本次研究者。
1.2检验方法 所有患者均收集其晨起痰液标本,即晨起深呼吸后,咳痰,由专门容器收集;若患者无法咯出痰液,则收集其咽拭子标本,即肺部分泌物[4]。所有标本采集完毕后送检实验室进行检验,检验方法包括痰涂片和PCR。
1.2.1检验仪器及试剂 光学显微镜(奥林巴斯CX23),实时荧光定量PCR仪(安捷论Mx3000);试剂为与检验仪器配套试剂。其他主要检验研究仪器以及试剂包括:(1)高速离心机及微型离心机;(2)微型混匀器;(3)水浴箱;(3)冰箱,-80℃;(4)生物安全柜;(5)干式恒温箱;石炭酸复红染液,95%乙醇等。
1.2.2痰涂片培养 痰液标本经尼式抗酸染色后,涂片,置于光学显微镜下观察,3~9条/100视野可诊断为阳性[5];阅片后,玻片经脱油干燥后按照序号妥善保存,以备复检。
1.2.3PCR检查 取适当NaOH溶液,与痰液标本进行混合,置于37℃环境下,停留40 min;混合液进入离心机离心,去除上清液,将剩下混合液使用生理盐水冲洗处理,直至检验pH结果为中性。按照荧光值变化情况,评估结核杆菌检验阳性率。
1.3统计学分析 选择SPSS18.0软件对数据进行统计学分析,计数资料进行χ2检验,P≤0.05为差异具有统计学意义。
75例肺结核患者经痰涂片检出阳性20例,约占26.67%,经PCR检查,痰结核杆菌阳性者55例,约占73.33%。PCR检查结果阳性率明显高于痰涂片检查,差异显著,χ2=28.8235,Plt;0.01。见表1。
表3 两种检验方法结果比较
肺结核是一种常见的呼吸系统传染性疾病,传播速度很快,若未能及时接受有效诊断及治疗,很容易引发结核杆菌感染其他脏器或系统,比如骨结核、肠道结核、肾脏结核,不仅带给患者较大痛苦,还能提高治疗难度,加速病情进展,延长治疗时间,增加脏器功能衰竭风险[6]。随着我国医疗水平的不断深入发展,对肺结核防控力度的逐步加强,加上民众对于医疗卫生要求的逐渐提高,综合作用之下,很多结核患者获得了及时有效的治疗[7]。但据医学调查显示,肺结核患者发病率仍然居高不下,现已成为全世界突出的公共卫生问题。
肺结核发病早期,并无典型临床表现,而且由于症状复杂多样,很容易被其他疾病所掩盖,出现误诊及漏诊情况,致使病情进一步发展,不利于治疗及预后。肺结核病情一般比较长,通常根据痰菌检测结果判断临床疗效,而准确的检验结果是掌握当前病情、调整治疗计划,判断未来病情走向的重要依据。因此,对检验结果的准确率、灵敏度要求比较高。通常而言,令人满意的检验需要具备安全性好、准确率高、经济性优良、便于推广等特点[8]。结核患者痰标本涂片检验具有经济性较好,推广难度不高等特点,但存在着准确率低及灵敏度不高等缺陷,这导致其临床诊断价值不高。PCR检验是目前广泛应用于临床的一种检验方法,主要通过对靶向序列互补的特异性荧光双标记微生物核苷酸探针,根据受检标本特异性PCR扩增产物评估检查结果,不仅适用于检验痰液标本,人体其他体液标本,比如血液、胸腔积液以及宫颈分泌物等均能够使用PCR方法检验。本次研究中,75例结核患者经PCR检查结果阳性率73.33%明显高于对照组26.67%,χ2=28.8235,Plt;0.05。
此外,可通过支气管镜、胸膜标本活检等方法对肺结核患者进行诊断。但由于这些方法属于有创检查,花费较高,而且使用时需医疗机构满足一定的条件,因此存在一定的推广难度。抽血检验肺结核的血清标志物也是肺结核的诊断方法之一,比如检验MMP9血清蛋白、S100A9蛋白、SOD3血清蛋白等。
总之,肺结核患者经由PCR方法检验痰结核杆菌准确率较高,诊断价值良好,有助于评估治疗效果,调整治疗方案,有利于预后,建议进一步在临床应用及推广。
[1] 向启云,韩宇,庄倩,等.结核患者痰结核杆菌检验的方法探讨[J].中国社区医师,2016,32(20):132-133.
[2] 杨巍巍.结核患者痰结核杆菌检验的方法探讨[J].中国医药指南,2013,11(14):258-259.
[3] 周玉娟,王飞.189例患者分泌物三种结核杆菌检测方法的对比分析[J].湖北中医杂志,2011,33(4):50.
[4] 古莉冰,朱玉兰,王佃鹏,等.结核分枝杆菌双重实时RT-PCR检测方法的研究[J].中国热带医学,2012,12(6):756-758.
[5] 葛燕萍,张青.痰标本RNA恒温扩增技术对活动性肺结核的临床诊断价值[J].中国防痨杂志,2016,38(9):742-746.
[6] 代颖.谈肺结核病的诊断与预防[J].大家健康,2013,7(7):180-181.
[7] 王泉,吴龙章,李君莲,等.新疆乌鲁木齐市2009-2011年非结核分支杆菌药物敏感性试验结果分析[J].实用医学杂志,2012,28(22):3827-3829.
[8] 郭春梅,李玉梅,刘佃香.肺结核患者痰中结核分枝杆菌检验的临床价值[J].中国卫生标准管理,2016,7(10):164-166.
R446.1
B
1004-7115(2017)11-1299-02
10.3969/j.issn.1004-7115.2017.11.039
李娴(1987—),女,技师,硕士研究生,主要从事临床检验工作。
2017-08-11)