弹力纤维染色对非小细胞肺癌的诊断意义

刘一婷,刘 珍,刘师宇,王学菊,张丽荣*

(1.吉林大学公共卫生学院，吉林 长春130021；2.南京市六合区中医院 儿科；3.吉林大学中日联谊医院 病理科)

弹力纤维染色对非小细胞肺癌的诊断意义

刘一婷1,刘 珍2,刘师宇1,王学菊3,张丽荣3*

(1.吉林大学公共卫生学院，吉林 长春130021；2.南京市六合区中医院 儿科；3.吉林大学中日联谊医院 病理科)

肺癌(lung cancer,LC)包括非小细胞肺癌(non-small cell lung，NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)，其中非小细胞肺癌(鳞癌、腺癌和大细胞未分化癌)占肺癌的80%以上[1]。非小细胞肺癌按照TNM分期，临床上根据不同的病理分期采用相应的治疗方案，但是某些NSCLC的病理诊断分期单凭HE染色切片很难分辨是否癌细胞侵犯脏层胸膜，给病理医生带来困扰，由于弹力纤维染色技术具有简便、经济、敏感、易操作等优点，可用于非小细胞肺癌的病理诊断分期。

1 资料与方法

1.1临床病理资料

选取2016年1月-2017年7月诊断为NSCLC206例病理资料作为研究对象，其中男122例，女84例，年龄32-79岁，平均年龄57.6岁。

1.2切片制作方法

组织处理及常规病理切片：手术后标本10%中性福尔马林固定6-12 h后，常规取材、脱水、浸蜡和包埋，切片厚度2 μm，HE(haematoxylin and eosin)染色法制作病理常规切片,然后显微镜下观察进行病理诊断。

Weigert弹力纤维染色法：选择带被膜的可疑癌肺组织，白片脱蜡至水，0.25%高锰酸钾氧化5-10 min，水洗后用2.5%草酸漂白1-3 min，水洗后浸入95%酒精1 min，来复红染液6-12 h，70%酒精洗后水洗，Mayer苏木精染细胞核1-3 min，70%酸酒精分化，0.25%氨水返蓝，梯度酒精脱水后塑胶封片。

1.3统计学方法

采用SPSS19.0对实验数据进行统计学处理，计数资料采用卡方检验，Plt;0.01时结果差异具有统计学意义。

2 结果

2.1弹力纤维呈波浪形分布染成紫蓝色，与细胞核染成的蓝色有鲜明对比。既可以观察弹力纤维的分布、多少、完整性、肿瘤侵犯等情况，又可观察肺癌细胞的分化情况。

2.2NSCLC206例病理诊断结果，见表1。

表1 NSCLC的类型

2.3根据弹力纤维染色分型情况，见表2。

表2 NSCLC的T分期

3 讨论

肺胸膜分为脏层和壁层，脏层胸膜覆在肺表面并深肺叶间隙，HE染色不易辨清，弹力纤维染色时可以分辨脏层胸膜的基底膜上间皮层、间皮下结缔组织层、内外弹力层和结缔组织层等结构。肺癌细胞侵犯胸膜时或位于胸膜下，脏层胸膜会出现弹力层重叠或纤维细胞增生等组织学改变。

本组病例肺癌分类见表1。鳞癌是由支气管上皮化生而来，癌细胞巢状或条索状分布；腺癌具有腺样分化，有分化好的也有分化差的，癌细胞呈管状腺泡状或乳头状结构，弹力纤维染色时仅有零碎的弹力纤维，可能由于肿瘤细胞破坏了间质内的弹力纤维；细支气管肺泡癌沿着原有的肺泡壁生长而不破坏肺泡结构，弹力纤维染色时观察到紫蓝色的弹力纤维增生或皱缩但能显示肺泡结构。

WHO最新定义为细支气管肺泡癌是一种单纯以细支气管肺泡生长方式的腺癌，没有血管和胸膜侵犯的证据[2]，但在中心区或者肺泡崩解的胸膜下弹力纤维会有所增加。所以弹力纤维染色如果显示胸膜侵犯就诊断为腺癌混合细胞细支气管肺泡亚型(乳头或腺泡)，而不是单纯诊断细支气管肺泡癌，即为混合癌。

国际肺癌研究协会(International association for the study of lung cancer,IASLC)第7版提示肺癌脏层胸膜侵犯为肿瘤T1和T2期的临界关键指标，也是T2a向T2b进展的关键指标[3]。肿瘤侵犯超过脏层胸膜弹力层为T1，侵袭脏层胸膜表面为T2,肿瘤细胞侵犯壁层胸膜为T3。当HE不能清楚地区分T1和T2时，我们使用弹力纤维染色。

本组病例弹力纤维染色前后分期百分率进行比较，T1和T2分期具有显著差别(Plt;0.01)；T3和T4期基本没变化。因为T3、T4期主要根据肿瘤大小定分期。而T1和T2分期除看肿瘤大小还要看脏层胸膜的浸润情况，表2说明弹力纤维染色对肺癌的T分期具有重要意义。

弹力纤维染色结合HE染色对非小细胞肺癌的具体诊断相当重要，辅助化疗对非小细胞肺癌术后的特定分期敏感[4]，有文献报道脏层胸膜侵犯导致非小细胞肺癌预后不良[5]。弹力纤维染色可以很好地观察脏层胸膜浸润情况，对患者的诊断及鉴别诊断、治疗及预后具有重要意义。

[1]Stewart B,Wild C.World cancer report 2014[M].Geneva：IARC Nonserial Publication(WHO),2014:490.

[2]Siegel RL,Miller KD,Jemal A.Cancer statistics,2015[J].CA Cancer J Clin,2015,65(1):5.

[3]赵兰香,余科科,邵普晨,等.弹力纤维染色在评估肺癌胸膜侵犯中的意义[J].临床与实验病理学杂志，2014,30(1):22.

[4]徐 薪,纪小龙,尹 彤,等.弹力纤维染色在非细支气管肺泡癌和腺癌诊断中的意义[J].诊断病理学，2004,11(2):78.

[5]Warth A,Muley T,Herpel E,et al.A histochemical approach to the diagnosis of visceral pleural infiltration by non-small cell lung cancer[J].Pathol Oncol Res,2010,16(1):119.

*通讯作者

1007-4287(2017)11-1969-02

2017-08-24)