流式细胞仪淋巴亚群在肿瘤化疗后患者中的应用

汤伟明+彭蘡

【摘要】 目的 对流式细胞仪淋巴亚群在肿瘤化疗后患者中的应用价值进行分析研究。方法 60例肿瘤化疗患者作為观察组（化疗后无缓解29例、化疗后完全缓解31例）， 60例健康体检者作为对照组。采用流式细胞技术分析观察组患者化疗前后的淋巴细胞亚群的变化特征， 并与对照组进行对比。结果 观察组化疗前及化疗后无缓解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+均明显低于对照组， 差异均具有统计学意义（P<0.05）；观察组化疗后无缓解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+与本组化疗前比较差异均无统计学意义（P>0.05）， 但从数据可看出免疫功能有进一步恶化的趋势；观察组化疗后完全缓解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+与本组化疗前及化疗后无缓解比较差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论 肿瘤患者细胞免疫功能衰退， 化疗完全缓解后可改善肿瘤患者机体的免疫功能。

【关键词】 流式细胞技术；淋巴亚群；肿瘤化疗后

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.31.029

流式细胞仪是一种新型高科技仪器， 其中包含了激光、计算机、单克隆抗体、光电测量、细胞荧光化学以及电子物理技术。流式细胞技术在临床医学当中应用非常广泛， 被应用于肿瘤学、免疫学、血液学、微生物检测、器官移植等等[1， 2]。本组研究以本院肿瘤化疗患者为研究对象， 对流式细胞仪淋巴亚群在肿瘤化疗后患者中的应用价值进行分析研究， 现做如下汇报。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 本研究事先获得患者知情同意， 研究开展时间为2015年4月～2016年12月， 抽取本院60肿瘤患者作为观察组， 所有患者均经手术、内窥镜、病理学检查证实， 其中胃癌15例， 原发性肝癌12例， 结肠癌9例， 乳腺癌11例， 肺癌6例， 食管癌5例， 淋巴瘤2例；排除并发免疫性疾病患者， 所有患者接受4个周期以上化疗（化疗后无缓解29例、化疗后完全缓解31例）；其中男23例， 女37例；年龄35～72岁， 平均年龄（58.2±6.5）岁。抽取同期60例健康体检者作为对照组， 排除肿瘤、肝肾及免疫系统疾病患者， 免疫指标均在正常范围内， 其中男25例， 女35例， 年龄25～65岁， 平均年龄（53.2±5.5）岁。两组一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 采用BD FACSCalibur流式细胞分析仪（美国BD公司）， 试剂及耗材都为BD配套产品， 校准品也有BD公司提供， 都按要求保存并在保质期内。抽取受检者清晨静脉血2 ml， 存于EDTA或肝素抗凝BD真空管， 并按规定储存等待检测， 向已编好号的2支BD实验管中分别加入20 μl两种单克隆抗体并每管加入50 μl混匀的抗凝血。混匀避光保存15 min， 经过溶血10 min、洗涤、离心去上清再加生理盐水混匀步骤后上机检测。

1. 3 观察指标 CD3+细胞、CD4+细胞、CD8+细胞、CD19+细胞、NK（CD3-CD16+CD56+）细胞占淋巴细胞百分比。

1. 4 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件对研究数据进行分析处理。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

观察组化疗前及化疗后无缓解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+均明显低于对照组， 差异均具有统计学意义（P<0.05）；观察组化疗后无缓解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+与本组化疗前比较差异均无统计学意义（P>0.05）， 但从数据可看出免疫功能有进一步恶化的趋势；观察组化疗后完全缓解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+与本组化疗前及化疗后无缓解比较差异均具有统计学意义（P<0.05）。见表1。

3 讨论

淋巴细胞亚群可因患者患有免疫缺陷性疾病、自身免疫疾病、变态反应性疾病、恶性肿瘤与病毒感染等而产生异常改变[3]。所以对患者包括CD3+、CD4+与CD8+等外周血淋巴细胞亚群进行检测可在一定程度上掌握患者机体的免疫状态[4-7]。

流式细胞技术具有分析快速、检验客观、结果精确、操作简便等优点， 临床常用来检测淋巴细胞亚群和NK细胞活性， 以此了解机体的免疫状态[8-10]。本组研究中， 抽取60例肿瘤化疗患者作为研究对象（观察组）， 采用流式细胞技术分析患者化疗前后的淋巴细胞亚群的变化特征， 抽取同期60例健康体检者作对照（对照组）。通过表1可以看出， 观察组化疗前及化疗后无缓解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+均明显低于对照组， 差异均具有统计学意义（P<0.05）， 提示机体细胞免疫和体液免疫免疫功能抑制并紊乱。观察组化疗后无缓解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+与本组化疗前比较差异均无统计学意义（P>0.05）， 但从数据可看出免疫功能有进一步恶化的趋势。肿瘤的发生很大程度上是由于免疫功能低下， 杀死肿瘤细胞能力下降导致。化疗不仅破坏肿瘤细胞， 也损伤免疫细胞， 所以无效化疗加重了免疫功能的低下。观察组化疗后完全缓解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+与本组化疗前及化疗后无缓解比较差异均具有统计学意义（P<0.05）， 说明此化疗方案在杀肿瘤细胞的同时对机体免疫活性细胞伤害小， 化疗结束后能改善机体免疫功能， 提高了免疫活性细胞杀肿瘤细胞的能力。由此可见， 测定肿瘤患者淋巴亚群对临床化疗的疗效观察具有一定的意义。由于机体免疫系统十分复杂， 影响因素繁多， 此类问题还需不断探索研究并改进。

参考文献

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