辛伐他汀对肾缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响

荆娇+马海玲+闫文升+张永忠+张玉清+焦宗伟

【摘要】目的 观察辛伐他汀预处理对肾缺血再灌注损伤大鼠远程器官细胞凋亡的影响。方法 采用夹闭双侧肾动静脉45分钟后去夹再灌的方法复制肾缺血再灌注损伤（RI/RI）模型。36只SD大鼠隨机分成3组：（1）假手术组；（2）肾缺血再灌注组；（3）辛伐他汀组，每组12只。取心肌组织测定乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）活性，TUNEL法检测细胞凋亡率，蛋白免疫印迹检测NF-kB蛋白表达。结果 与假手术组比，肾缺血再灌注组LDH、肌CK活性增高，细胞凋亡率升高，NF-kB表达增多，差异有统计学意义（P<0.05）。与肾缺血再灌注组相比辛伐他汀组LDH、CK活性降低，胞凋亡率降低，差异有统计学意义（P<0.05），NF-kB表达降低。结论 辛伐他汀对RIRI大鼠心肌损伤有改善作用，可能与凋亡基因NF-kB表达有关。

【关键词】辛伐他汀；细胞凋亡；NF-kB

【中图分类号】R542.2 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-6681.2017.21..02

他汀类药物是三羟基三甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂，目前普遍用于治疗高脂血症。近年来发现，他汀类药物除降血脂作用外，还有抗炎作用，对肾脏有保护功能等其他非降脂方面的作用，在防治心脏疾病方面也日益重视[1]。但辛伐他汀预处理对远程器官的影响的研究尚不多见。本实验就此进行了初步研究。

1 资料与方法

1.1 一般资料

成年健康雄性SD（河北省实验动物中心）；辛伐他汀（杭州上虞京新药业有限公司）；LDH、CK（南京建成生物制品公司）；NF-kB（Santa cruz biotechnology）。

成年健康雄性SD大鼠36只，体重16～230 g，在20～26℃实验室安静饲养两天后随机分为3组：（1）假手术组；（2）肾缺血再灌注组；（3）辛伐他汀组。每组12只。分组后，辛伐他汀组每日给予辛伐他汀20 mg/kg灌胃，持续2周。假手术组和缺血再灌组每日给予等量的生理盐水灌胃。两周之后复制动物模型。

1.2 方法

10%水合氯醛腹腔麻醉，开腹，暴露双侧肾动、静脉。除假手术组只开腹不夹闭肾动、静脉外，其余各组均需夹闭双侧肾动、静脉45 min，然后除夹再灌。后逐层缝合。取心肌组织测定、LDH、CK、活性，TUNEL法检测细胞凋亡率，蛋白免疫印迹检测NF-kB蛋白表达。各项指标检测方法严格按说明书操作。

1.3 统计学方法

采用SPSS 20.0统计学软件对数据进行分析，计量资料以“x±s”表示，采用t检验；计数资料以百分数（%），例（n）表示，采用x2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 辛伐他汀对心肌组织LDH和CK活性的影响

缺血再灌注组心肌组织LDH和CK活性高于假手术组，与缺血再灌注组相比，辛伐他汀组LDH、CK活性降低，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 辛伐他汀对心肌细胞凋亡率的影响

与假手术组比较，缺血再灌注组凋亡指数升高，而辛伐他汀组凋亡指数低于缺血组。差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.3 辛伐他汀对心肌细胞NF-kB表达的影响

与假手术组比较，缺血再灌注组NF-kB表达升高，而辛伐他汀组NF-kB表达降低。差异有统计学意义（P<0.05）。见图1。

3 讨 论

RI/RI是多因素参与的复杂过程，其主要的损伤因素有自由基损伤、NO等舒张血管物质的减少、内皮素等缩血管物质产生过多等[2]。肾缺血再灌注期间产生的大量的OFR可通过血液循环可造成远隔器官的损伤，戎浩[3] 等的研究也表明肾缺血后远端器官也有不同程度的损伤，核转录因子-kB（NF-kB）是细胞核内重要的转录调节因子，是细胞存活、细胞周期、细胞黏附和迁移的重要调节者，有报道大鼠心肌缺血再灌后NF-kB活化对心肌细胞的凋亡起促进作用[4]。

本实验应用实验室以往的方法[5]复制肾缺血再灌注损伤模型，观察各项指标，结果显示，缺血再灌注后，LDH、CK活性均显著升高，NF-kB表达升高。说明缺血再灌注后心肌受损，心肌细胞凋亡增多。而给予辛伐他汀干预后，LDH、CK活性降低，NF-kB表达降低与缺血再灌注组相比，差异有统计学意义（P<0.05），这说明辛辛伐他汀对RIRI大鼠心肌损伤有改善作用，可能与凋亡基因NF-kB表达有关，但具体机制有待于进一步的探讨研究。

参考文献

[1] 姜 华，尹 微.辛伐他汀对脓毒症大鼠心肌保护作用的研究[J].临床合理用药杂志，2016，9（21）：48-49.

[2] 仝 飞，夏晓红.短暂反复缺血预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究[D].石家庄：河北医科大学，2011.

[3] 戎 浩，夏晓红.褪黑素对肾缺血再灌注损伤大鼠脑组织氧自由基和细胞凋亡的影响[J].中国病理生理杂志，2015，31（10）：1861.

[4] 胡煜辉，冯 云，刘星等.大鼠心肌缺血再灌注损伤中心肌细胞凋亡与NF-kB p65、iNOS的表达[J].细胞与分子免疫学杂志，2010，26（9）：868-871.

[5] 夏晓红，申玉学，石纪才，等.内皮素抗体在大鼠肾缺血/再灌注损伤的作用[J].中国病理生理杂志，1999，15（5）：415-417.endprint