鸡大肠杆菌病的实验室诊断和防治探究

闻思佳

摘 要：鸡大肠杆菌是家禽类常见的多发性疾病。主要的病型有胚胎和幼雏的死亡、败血症、气囊炎、心包炎、输卵管炎等。由于常和霉形体病合并感染，又常继发于其他传染病如禽流感、传染性支气管炎、巴氏杆菌病等，在治疗的过程中会相对困难。目前此病已成为危害养业的重要根源，治疗不及时就会造成巨大的经济损失。

关键词：鸡；大肠杆菌；实验室诊断；防治

鸡大肠杆菌病常家禽养殖业造成严重的经济损失。笔者根据多年的实践经验，介绍鸡大肠杆菌病的实验室诊断过程，本病是危害养鸡业较为严重的疾病之一，也是最常见的急性败血症和卵黄性腹膜炎及呼吸道疾病，通常表现为精神沉郁，食欲下降，消瘦。本文提出了科学的饲养管理和良好的卫生环境是控制本病的必要条件，也为控制鸡大肠杆菌提供理论依据。

一、引发鸡大肠杆菌病的病原

1.鸡舍环境条件差。鸡舍坏境是引发大肠杆菌的主要原因，由于鸡舍环境条件差，潮湿度较低，空气混浊，氨气含量大，鸡只养殖密度高，大肠杆菌很容易大量繁殖并侵害鸡只，引发各种疾病。而且，舍内湿度降低也会使浮尘增多，被鸡只吸入后粘附在呼吸道粘膜上，成为大肠杆菌入侵的载体，引发大肠杆菌疾病。

2.应激因素。鸡的肠道内本身就含有大量的大肠杆菌，加上鸡舍环境的存在，在外界一些应激条件下很容易引发大肠杆菌病。鸡只在受到转群惊吓、突然更换饲料等应激刺激下，机体内环境会随之发生改变，机体免疫能力下降后很容易被大肠杆菌侵染造成病发。此外，一些免疫应激也会刺激该病的发生，如给鸡只接种疫苗时免疫程序设计不当反而会引起鸡只免疫能力下降或导致呼吸道病变，从而使鸡只更容易感染大肠杆菌，大肠杆菌在鸡的消化道中有一定存在，鸡随时都有病发可能没，而大肠杆菌血清型又比较多，制作疫苗时很难全面预防，这就严重限制了疫苗的有效性。

3.饲料营养不均衡。鸡饲料中营养成分的均衡情况对大肠杆菌病的发生也有影响，充足的营养是机体免疫系统的重要保障。一般情况下，维生素A的缺乏会导致鸡呼吸道粘膜鳞状化变性，分泌粘液的杯状细胞被未成熟的细胞取代，为大肠杆菌的入侵提供了条件。维生素E缺少或被破坏，会抑制机体的免疫应答，蛋白质不足会降低细胞增殖，从而影响分泌抗体的浆细胞数量。

二、病理变化

病雞剖检可见皮肤、肌肉淤血，血液凝固不良，呈紫黑色，心包膜混浊、增厚，心包腔中有脓性分泌物，心包膜及外膜上有纤维蛋白附着，呈白色，气囊混浊，壁增厚，不透明，内有黏稠的黄色干酪样分泌物。肝脏肿大，呈紫红色或铜绿色，肝脏表面有一层黄白色的纤维蛋白附着。肝脏变形、质地变硬、表面有许多大小不一的坏死点，严重者渗出的纤维蛋白与胸壁、心脏、胃肠道粘连，脾脏肿大，呈紫红色。心脏体积增大，心肌变薄，心包腔充满大量淡黄色液体，肺脏出血、水肿。

三、实验室诊断

1.细菌培养：取死鸡的肺、鼻腔分泌物、气囊膜、肠管等，进行细菌分离培养。将病料接种于麦康凯琼脂和伊红美蓝琼脂培养基， 37 ℃ 培养 24-48小时。 大肠杆菌疑似菌落在麦康凯琼脂上呈红色，在伊红美蓝培养基上长呈紫黑色，并带金属光泽。

2.革兰染色：制备被检病料抹片， 并对其进行革兰染色。 具体步骤如下：

制备抹片： 将灭菌载玻片置于实验台上，取病料在载玻片上轻轻涂抹一层， 涂布面大小应适当，不宜太大。

固定：使用酒精灯外焰对样本进行固定。 将载玻片的标本端向上，于酒精灯外焰处快速来回通过 2-3 次，同时用手背皮肤感受载玻片背面的加热情况，实感温度不超过 60 ℃ ，待其自然冷却后，即可进行革兰染色。

染色：在制备好的涂片薄膜上滴加草酸铵结晶紫 1-2 滴，使染色液均匀覆盖涂片，染色 1 min，斜置载玻片，用小股水流冲洗，直至涂片上无染色液残留，将碘液滴在涂片薄膜上，使其覆盖涂片，染色 1 min。斜置载玻片，用小股水流冲洗，直至涂片上无染色液残留，斜置载玻片，滴加 95% 乙醇进行脱色，直至乙醇洗脱液不呈现紫色为止，操作时间为 20-30 s。在涂片薄膜上滴加番红染液 1-2 滴，使染色液均匀覆盖涂片，染色 1 min ，斜置载玻片，用小股水流冲洗，直至涂片上无染色液残留。

镜检：用吸水纸吸掉载玻片上的水滴，等待标本片完全晾干后，放置于显微镜下，先用低倍镜观察，发现目标物后，在载玻片上的目标物上加 1滴香柏油， 然后用油镜观察细菌的颜色及形态，可见视野中均为红色、短小杆菌。

生化试验：挑取伊红美蓝琼脂培养基上的紫黑色、 带金属光泽的单个菌落， 进行生化试验。 分离菌株生化试验中的吲哚试验、甲基红试验、 VP 试验及枸橼酸盐利用试验， 结果分别为“ + 、 + 、 - 、 - ”，与典型的大肠杆菌生化特征一致，据此可判定分离菌株为大肠杆菌。

四、防治措施

1.加强饲养管理。首先要注意鸡舍卫生，保持鸡舍干燥通风，及时清除鸡舍内粪便、将地面彻底刷洗干净。 对鸡舍进行定期消毒，营造良好的饲养环境，严格控制饲养密度，注意控制环境温度，严防骤热或骤冷以及其他各种应激因素对鸡群产生不良影响。大肠杆菌存在比较广泛，而且血清类型很多，疫苗防治教困难，常常给养殖户带来较为严重的经济损失，首先，在鸡舍的日常护理中，要经常清扫粪便等污物，经常通风换气但要做好保暖工作，避免气温骤变，并定期做好消毒工作。消毒时，鸡舍墙壁、地面、房顶和所有器具都要严格全面，鸡舍内有鸡只进出变动时对鸡只也要进行消毒。其次，对于鸡只的日常饲养，饲料中营养元素要全面并均衡，鸡饲料和饮水都要妥善保管，被污染后不能再继续使用。最后，在饲料中可以适量添加一些麦芽糖，配合使用双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌等微生态制剂，可以有效加速肠道内有益菌群的生长和繁殖速度，从而抑制大肠杆菌的侵害和繁殖。

2.配合药物防治。针对致病性大肠杆菌引起的鸡急性败血症： ① 肌肉注射速可安或泰灭净，剂量为 0.1-0.2 ML/ （ kg · BW ），初次使用时剂量加倍，同时配合饮水使用，也可使用禽菌灵 750 g 均匀拌入 100 kg 饲料中，让鸡群自由采食，连续饲喂2-3天 。② 中药治疗方法：黄柏 100 g 、黄连 100 g 、大黄50 g 、水 1500 ML ，微火煎至 1000 ML ，分离药液；剩下的药渣重新加水 1500 ML， 继续煎至 1000 ML 。将 2 次药液混合均匀， 10 倍稀释后可供1000 只鸡自由饮用，连用 3 剂，基本可以控制病情。针对致病性大肠杆菌引起的卵黄性腹膜炎和肠炎： 可将卵炎康 1 瓶或肠炎先锋 1 瓶加入 150 kg水中，集中饮水给药，连用 3-5天，同时配合超强肽维素 1 瓶加 1000 kg 水或黄芪维他 1 瓶加 2500 kg水，集中饮水给药，连用 3-5天。

五、结语

鸡大肠杆菌病属于多发性疾病，鸡大肠杆菌病在兽医临床上发病率和死亡率都很高，搞好环境卫生和预防接种能有效控制本病的流行。在治疗大肠杆菌时要投服足够的用药量才能保证治疗效果。

参考文献：

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[2] 侯淑梅.饲养管理上鸡大肠杆菌病发生的诱因及防治措施[J].养殖技术顾问，2015（12）54-55.

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