红豆杉复方健康颗粒皮肤过敏性实验研究

熊伟，吴磊，饶玉喜，史新安，李雄辉

（1.江西省科学院应用化学研究所，江西南昌 330096；2.江西省喜果绿化有限公司，江西上饶 335500）

红豆杉复方健康颗粒皮肤过敏性实验研究

熊伟1，吴磊1，饶玉喜2，史新安2，李雄辉1

（1.江西省科学院应用化学研究所，江西南昌 330096；2.江西省喜果绿化有限公司，江西上饶 335500）

目的：观察红豆杉复方健康颗粒对豚鼠皮肤的过敏性，以评价其在临床上使用的安全性。方法：豚鼠随机分为3组，第一组为空白对照组，第二组为红豆杉复方健康颗粒组，第三组为2,4-二硝基氯苯组，分别进行致敏接触、激发接触，对出现过敏状况评分。结果：豚鼠皮肤无红斑和水肿等现象。结论：红豆杉复方健康颗粒对皮肤无过敏反应，可放心使用。

红豆杉；复方健康颗粒；皮肤；过敏性

红豆杉具有抗氧化、改善睡眠、降血压、保护心血管、增强机体免疫力等功效[1-4]。项目组以红豆杉为主料，辅以浮小麦、葛根、首乌藤、银杏叶、茯神、薰衣草等中药进行配伍，制备了红豆杉复方健康颗粒[5]，以期在临床上具有一定抗氧化、改善睡眠等功效。本实验通过对红豆杉复方健康颗粒的皮肤过敏性进行研究，观察红豆杉复方健康颗粒对机体免疫系统在皮肤上的反应，为其在临床上的安全运用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

豚鼠，250～300g，白色，雌雄各半，由上海生汪实验动物养殖有限公司提供，每组10只，共30只。普通级动物房，温度25～28℃，饮用自来水。

1.2 实验材料

红豆杉复方健康颗粒（由江西省喜果绿化有限公司提供）；致敏试验对照药：2,4-二硝基氯苯（中国医药公司北京分公司）；乙醇（分析纯，天津市大茂化学试剂厂）。

1.3 过敏性实验方法[6-7]

将红豆杉复方健康颗粒碾碎，用蒸馏水稀释成10%浓度，供实验用；采用2,4-二硝基氯苯作为阳性对照品，以95%乙醇配成1%的致敏浓度和0.1%的激发浓度。

采用完整皮肤，通过皮肤给药途径进行实验，实验前24h将豚鼠背部两侧毛剃掉，脱毛面积约为3cm×3cm。

实验共设3组，分别为空白对照组（95%乙醇）、实验组（红豆杉复方健康颗粒10%稀释液）阳性对照组（2，4-二硝基氯苯），并分别进行致敏接触和激发接触，致敏次数为3次（每周1次），激发次数为2次（最后一次致敏后2周）。

1.3.1 致敏接触

取红豆杉复方健康颗粒10%稀释液0.2mL涂在豚鼠左侧脱毛区，用一层油纸及二层纱布覆盖，再以医用胶布封闭、固定，每只豚鼠分笼饲养6h，6h后去掉纱布，第7天和第14天，以同样的方法各重复一次，共计3次。空白对照组和阳性对照组方法同上。

1.3.2 激发接触

于末次给红豆杉复方健康颗粒10%稀释液致敏后14天，将0.2mL红豆杉复方健康颗粒10%稀释液涂在豚鼠右侧脱毛区，空白对照组用0.2mL 4%乙醇，阳性对照组用0.1% 2,4-二硝基氯苯0.2mL，6h后去掉受试物，即可观察，然后于24、48、72h再次观察皮肤过敏反应情况，并记录各时间过敏反应分值。

1.3.3 皮肤过敏评分和评价标准

皮肤过敏反应程度评分标准见表1，皮肤过敏反应性评价标准见表2。皮肤过敏性反应评分按照过敏反应红斑、水肿分值计算平均分值，判断皮肤过敏程度。

表1 皮肤过敏反应程度评分标准

表2 皮肤过敏反应性评价标准

2 结果与讨论

各组豚鼠过敏性反应结果见表3及表4。由实验结果可知，红豆杉复方健康颗粒组及空白对照组豚鼠在第28天接触红豆杉复方健康颗粒组后皮肤无红斑、无水肿，说明未出现皮肤过敏反应；而阳性对照组豚鼠接触2,4-二硝基氯苯后均出现了不同程度的红斑和水肿，有较为明显的皮肤过敏反应。

表3 红豆杉复方健康颗粒接触不同时间红斑水肿形成总分

表4 红豆杉复方健康颗粒接触不同时间致敏发生率（%）

3 结论

实验结果表明，红豆杉复方健康颗粒皮肤给药对豚鼠皮肤重复接触不会引起过敏反应，进一步验证了红豆杉复方健康颗粒外用安全可靠。

[1]王红萍,段红梅.红豆杉的价值与开发利用研究进展[J].北方园艺,2013(12):192-195.

[2]李英,吕晔,林丽萍.红豆杉中抗氧化活性成分的研究进展[J].海峡药学,2013,25(9):13-16.

[3]吴彦,刘庆,胡科,等.我国红豆杉资源现状和紫杉醇产业化对策[J].长江流域资源与环境,2002,11(6):515-520.

[4]李存芳,刘勇,董玫,等.南方红豆杉化学成分的研究进展[J].中草药,2007,38(8):1121-1131.

[5]熊伟,付建平,饶玉喜,史新安,李雄辉.均匀设计法在红豆杉保健枕配方优化中的应用[J].生物化工,2016,2(3):6-9.

[6]国家食品药品监督管理局.中药、天然药物免疫毒性(过敏性、光变态反应)研究技术指导原则[M].2005.

[7]杜庆山.肿痛消洗剂皮肤刺激性和过敏性实验研究[J].山东中医杂志,2012,31(8):596-597.

Study on Skin Hypersensitivity of Taxus chinensis Compound Healthy Particles

Xiong Wei1,Wu Lei1,Rao Yu-xi2,Shi Xin-an2,Li Xiong-hui1
(1.Institute of Applied Chemistry，Jiangxi Academy of Sciences，Jiangxi Nanchang 330096;2.Jiangxi XiGuo greening limited company，Jiangxi Shangrao 335500)

Objective:To observe the skin allergy of guinea pig caused by Taxus chinensis compound healthy particles,and to evaluate the safety in clinical use .Method:Guinea pigs were randomly divided into 3 groups,the first group was blank ,the second group was Taxus chinensis compound healthy particles and the last group was 2,4-dinitrochlorobenzene,the skin allergy was evaluated by the sensitized and stimulate contact.Results:The experiment group did not show any complications such as erythema and edema in the allergy test.Conclusion:Taxus chinensis compound healthy particles has no skin or systemic allergic reactions.

Taxus chinensis;Compound healthy particles;Skin;Hypersensitivity

R285.5

A

2096-0387（2017）05-0026-02

国家自然科学基金（31260400）；江西省科学院杰出青年学者项目（2017-JCQN-02）；江西省科学院产学研合作项目（2014-CXY-04）。

熊伟（1982—），男，江西南昌人，硕士，副研究员，研究方向：天然产物提取分离与分子修饰。