结核感染T细胞检测在结核病诊断中的意义

曹鸥婕

（云南省曲靖市第一人民医院，云南 曲靖 655000）

结核感染T细胞检测在结核病诊断中的意义

曹鸥婕

（云南省曲靖市第一人民医院，云南 曲靖 655000）

目的分析结核病诊断中结核感染T细胞检测的意义。方法选择本院2015年10月至2017年4月接收的经影像学检查及组织病理学检查确诊的结核病患者117例，分别应用结核感染T细胞检测、涂片抗酸染色与聚合酶链式反应（PCR）荧光探针检测，对比三种方法诊断准确率。结果结核感染T细胞检测诊断准确率高于涂片抗酸染色及PCR荧光探针，且PCR荧光探针检测诊断准确率高于涂片抗酸染色，均具有统计学差异（P＜0.05）。结论结核病诊断中，结核感染T细胞检测可进一步提升检出率及诊断准确率，具有较高的临床应用价值。

结核感染T细胞检测；结核病；诊断；意义

0 引言

在全球范围内，成年人传染性疾病死亡原因中，首要的即为结核病。结核病主要的引发原因为结核分歧杆菌感染，治疗该疾病时，快速、准确的诊断具有十分重要的作用。现阶段，临床诊断结核病时，金标准为细菌学检查及病理学检查，但细菌学检查法需要较长的时间，而且高要求实验室，不适合作为常规检验方法[1]。研究表明，结核病诊断中应用结核感染T细胞检测方法后，可提升诊断准确率。本院以经病理组织学检查确诊的结核病患者为研究对象，分析结核感染T细胞检测的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择本院2015年10月至2017年4月接收的经影像学检查及组织病理学检查确诊的结核病患者117例，男61例，女56例；年龄32-76岁，平均（48.6±2.8）岁；继发型肺结核70例，结核性胸膜炎21例，淋巴结核10例，肾结核8例，结核性腹膜炎4例，结核性脑膜炎4例。纳入标准[2]：（1）符合结核病的诊断标准；（2）经影像学检查、组织病理学检查确诊；（3）症状表现均具有典型性，如咳嗽、咯血、乏力等；（4）患者及家属均对本研究知情。排除标准：（1）肝肾伴有严重损害；（2）近期使用免疫抑制剂；（3）人类免疫缺陷病毒抗毒检测结果显示为阳性。

1.2 方法

所有患者均接受结核感染T细胞检测、涂片抗酸染色与PCR荧光探针检测，具体方法如下：

表1 三种检测方法诊断准确率比较[n（%）]

（1）结核感染T细胞检测。采集患者静脉血时，利用绿色真空采血管，血量至少4 ml。采集后2 h内，向本底对照培养管、测试培养管、阳性对照培养管中分别加入全血，于37℃恒温箱中放置，给予培养，完成后离心10 min，速度3000-5000 r/min，接着开展酶联免疫吸附试验。检测吸光度时，采用酶标仪，标准曲线确定后，线性回归方程计算出来，计算出血浆γ-干扰素含量。分析结核感染T细胞检测结果时，以淋巴细胞培养分别与干扰素（刺激水平T）、干扰素（基础水平N）的和、两个和的差值为依据。

（2）涂片抗酸染色检测。清晨时，采集患者浓痰样本，或胸腹腔积液、尿液等非呼吸道样本。如采集浓痰标本，应先让患者理应清水漱口，之后指导患者用力咳嗽，以将呼吸道深部痰液咳出1-2口，收集后放置在收集器中，加盖，立即送到检验科中。若采集的为非呼吸道样本，需离心处理10 min，速度3000 r/min，于两根试管中分装标本，其中一管上清液全部取出，蒸馏水加入其中后，充分摇匀，另外一根沉淀图涂片直接进行。

（3）PCR荧光探针检测。选择荧光双标记探针与PCR引物一对，与引物扩增区域中间的一段DNA模板特异性结合。收集标本时，包含痰液、脑脊液、胸腹水。以试剂盒要求为参照，对标准进行相应的处理，向标本中加入DNA提取液，离心10 min，速度 3000-5000 r/min，2μl上清液加入PCR反应液中，循环处理利用PCR仪进行。

1.3 观察指标

观察三种检测方法结果的阳性情况，即结核分歧杆菌感染情况。（1）结核感染T细胞检测：N低于8 IU/ml，T-N在0.35 IU/ml之上且比25%N大时，检测结果为阳性，否则为阴性；（2）涂片抗酸染色检测：油镜下，若抗酸杆菌可以被观察到，检测结果为阳性，观察不到结果为阴性；（3）PCR荧光探针检测：样本CT=37时，检测结果为阳性，样本CT＞37时给予复检，复检CT＜40结果为阳性，＞40为阴性[3-5]。

1.4 统计学分析

采用SPSS 18.0统计分析，数（n）和率（%）表示计数资料，利用 检验，P＜0.05表明差异具有统计学意义。

2 结果

结核感染T细胞检测诊断准确率高于涂片抗酸染色及PCR荧光探针，且PCR荧光探针检测诊断准确率高于涂片抗酸染色，均具有统计学差异（P＜0.05），具体见表 1。

3 讨论

近年来，我国明显的提升结核病的发病率，对居民身体健康及生活质量均产生严重影响。及早发现结核病患者及潜伏感染患者后，有利于对结核病传染源有效控制，使其传播途径被切断[6]。目前，临床诊断结核病时，常用方法包含细菌培养、痰菌涂片抗酸染色法等，痰菌涂片抗酸染色法不需要较高的技术及特殊的仪器设备，但漏检较易发生，而且镜检需连续多次进行，同时，此种方法的敏感性过低，对死菌及活菌无法区分，即使抗酸杆菌未能发现，并不能说明结核感染一定不存在；鉴定结核分枝杆菌时，细菌培养方法的准确率比较高，可对菌种进一步的鉴定，并开展药敏试验，但检测需要长时间的进行，不利于早期诊断[7]。另外，PCR荧光探针检测也为比较常用的方法，尽管提高了阳性检出率，但假阳性率较高，影响诊断结果的准确性[8]。由于上述方法的检测结果均不理想，国内外一直致力于寻找更为可靠的检测方法，以提升结核病的诊断准确率。经研究，学者提出，结核病诊断时，结核感染T细胞检测具有良好的诊断结果[9]。结核分歧杆菌感染后，特异性T淋巴细胞会在人体中形成，存在于外周血中，与结合抗原再次接触后，其被激活，并将γ-干扰素分泌出来，而结核感染T细胞检测时，即是利用上述变化[10]。结核感染T细胞检测过程中，使用结核分歧杆菌特异抗原作为试剂盒，对待测全血产生刺激，经培养后，特异性T细胞免疫应答产生，如果感染并不是结核分歧杆菌引起，可将其排除，同时，对干扰素释放水平定量分析后，可对结核分歧杆菌感染情况作出判断，提升诊断的准确性[11]。本研究结果显示，结核感染T细胞检测的阳性率明显高于另外两种检测方法。

综上所述，临床诊断结核病时，结核感染T细胞检测具有较高的诊断准确率，可尽早的发现结核病，及时做出控制，避免结核病传播感染，临床应用价值较大，应广泛的推广于临床当中。

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Significance of Tuberculosis Infected T-cells Detection in Tuberculosis Diagnosis

CAO Ou-jie
(Qujing City the First People's Hospital of Yunnan, Qujing, Yunnan, 655000)

ObjectiveTo analyze significance of tuberculosis infected T cells detection in tuberculosis diagnosis.MethodsChoose 117 cases tuberculosis patients diagnosed by imaging and histological examination

in our hospital from October 2015 to April 2017, carry on tuberculosis infected T cells detection, smear acid-fast staining and polymerase chain reaction (PCR) fluorescent probe detection, compare accuracy of three diagnosis methods.ResultsAccuracy of tuberculosis infected T cells detection was higher than smear acid-fast staining and PCR fluorescent probe,and diagnostic accuracy of PCR fluorescent probe was higher than smear acid fast staining, difference showed statistical significance(P＜0.05).ConclusionTuberculosis infected T cells detection can improve detection rate and diagnostic accuracy further of tuberculosis diagnosis, which has high clinical value.

T cell detection of tuberculosis infection; Tuberculosis; Diagnosis; Significance

10.19335/j.cnki.2096-1219.2017.15.005

曹鸥婕，女，云南省昆明人，毕业于昆明医学院，主治医师，本科，研究方向：传染病。