窄谱中波紫外线对寻常性银屑病患者外周血纤溶酶及CC趋化因子配体20水平的影响

黄英梅 毕健平 张洪英 李军 曲才杰 王庆毅 黄勇 姜玉暇

266011青岛大学附属青岛市市立医院皮肤科

窄谱中波紫外线对寻常性银屑病患者外周血纤溶酶及CC趋化因子配体20水平的影响

黄英梅 毕健平 张洪英 李军 曲才杰 王庆毅 黄勇 姜玉暇

266011青岛大学附属青岛市市立医院皮肤科

目的研究窄谱中波紫外线（NB⁃UVB）治疗对寻常性银屑病患者外周血中纤溶酶及CC趋化因子配体20（CCL20）水平的影响。方法60例进行期寻常性银屑病患者均采用NB⁃UVB照射治疗，每周3次，共治疗8周。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测银屑病患者NB⁃UVB照射前后及50例健康体检者（对照组）外周血血浆中纤溶酶和CCL20水平。结果60例患者治疗后银屑病皮损面积和严重程度指数（PASI）评分（2.54±1.64）显著低于治疗前（10.26±3.14），差异有统计学意义（t=17.40，P＜0.05），且NB⁃UVB治疗的有效率达87%（52/60）。治疗前，银屑病患者外周血中纤溶酶［（180.07±40.62）μg/L］及CCL20水平［（422.41±129.87）pg/L］均显著高于对照组［（76.30±26.92）μg/L，t=15.45；（205.33± 49.89）pg/L，t=11.15；均P＜0.05］。治疗后银屑病患者外周血纤溶酶［（148.22±40.05）μg/L］及CCL20的表达量［（329.67±100.73）pg/L］均显著低于治疗前（t=4.97、6.44，均P＜0.05），但仍显著高于对照组（t=10.82、7.95，均P＜0.05）。治疗前，银屑病患者外周血纤溶酶与CCL20水平呈正相关（r=0.57，P＜ 0.05），纤溶酶、CCL20水平均与PASI评分呈正相关（r=0.49、0.62，均P＜0.05）。结论NB⁃UVB照射可能通过降低银屑病患者外周血纤溶酶及CCL20的水平发挥治疗作用。

银屑病；紫外线疗法；纤维蛋白溶酶；趋化因子CCL20

银屑病真皮乳头部的血管内皮损伤及活化可引起凝血及抗凝血功能异常，使机体处于高凝状态，从而继发纤溶系统亢进如纤溶酶水平升高，预防血栓形成。纤溶酶除了纤溶功能，还是一个潜在的炎症细胞激活剂，具有促炎症作用［1］。CC趋化因子配体20（CCL20）被认为是T细胞及树突细胞强有力的趋化物［2］，而这些细胞在银屑病的炎症机制中发挥重要作用。窄谱中波紫外线（NB⁃UVB）近年来被广泛应用于治疗银屑病，疗效较好，不良反应少，患者依从性较强。我们用NB⁃UVB治疗进行期寻常性银屑病患者，并对患者治疗前后血浆中纤溶酶和CCL20水平进行检测，探讨纤溶酶和CCL20在银屑病发病机制中的作用。

一、对象与方法

1.对象：收集2015年11月至2016年5月在青岛市市立医院皮肤科就诊的进行期寻常性银屑病患者，纳入标准：①符合进行期寻常性银屑病的诊断标准［3］，皮损泛发，总面积超过体表面积的50%；②无其他系统性疾病或皮肤疾病。排除标准：①妊娠期、哺乳期妇女及年龄＜16岁的青少年；②患者有光敏性疾病或既往有紫外线过敏史；③最近2周曾外用糖皮质激素类、维A酸制剂及免疫抑制剂者，近4周内曾系统应用治疗银屑病的药物、光敏性药物或接受过光疗者；④有高血压、冠心病、凝血功能异常或血液病者；⑤不能配合复诊的患者。

银屑病患者60例，其中男34例，女26例，年龄21～64（41.95±12.26）岁；病程6个月至40年，其中位数（P25～P75）为11（3～20）年。银屑病患者的皮损面积和严重程度指数（PASI）评分为4.9～ 18.6（10.26± 3.14）分。健康对照组为50例同期健康体检者，两组性别和年龄差异无统计学意义。本研究通过青岛市市立医院医学伦理委员会批准，患者均签署知情同意书。

2.主要试剂和仪器：采用SS⁃06紫外线光疗仪（上海希格玛高技术公司）全身照射NB⁃UVB，波长311～313 nm。纤溶酶和CCL20酶联免疫吸附试验（ELISA）检测试剂盒为武汉优尔生科技股份有限公司产品。

3.治疗方法：患者均采用NB⁃UVB照射治疗，首次剂量根据患者的皮损而定，一般为0.4～0.6 J/cm2，以后每次增加0.1 J/cm2，剂量上限为2.5 J/cm2。照射过程中若出现红斑（+），皮色呈淡粉或淡棕色，无水肿及压痛为最理想反应，若出现红斑（++）、水疱、压痛，应停止治疗，临床上按日光性灼伤处理。待症状消失后，应用原剂量的80%照射，每次增加0.05 J/cm2，每周照射3次，共治疗8周。

4.疗效判断：根据银屑病患者治疗前后PASI评分评估病情改善程度，病情改善率（%）=（治疗前PASI评分－治疗后PASI评分）/治疗前PASI评分×100%。按治愈、显效、好转、无效4级标准评价疗效：改善率＞90%为治愈，60%～90%为显效，20%～59%为好转，＜20%为无效，有效率=（治愈例数+显效例数）/总例数×100%。

5.外周血血浆中纤溶酶和CCL20水平测定：采集受检者抗凝静脉血2 ml，室温下3 000 r/min（离心半径15 cm）离心10 min，提取血浆，分装入冻存管中，置于-80℃冰箱中保存备用。采用ELISA法检测外周血血浆中纤溶酶和CCL20水平，具体操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。用酶标仪在450 nm波长处测定吸光度（A值），绘制标准曲线，计算样品浓度。

6.统计学处理：采用SPSS17.0统计软件，计量资料以±s表示，病例组治疗前后PASI评分比较采用配对t检验；两组间比较采用两独立样本t检验，病例组治疗前后PASI评分值比较采用重复测量方差分析，相关分析采用Pearson相关性分析，检验水准α=0.05。

二、结果

1.临床疗效及不良反应：见表1。60例银屑病患者均完成24次光疗，平均累计剂量（30.5±4.7）J/cm2。随着光疗次数增加，皮损PASI评分逐渐下降，治疗前后差异有统计学意义（F=238.85，P＜0.05），且光疗24次后PASI评分显著低于光疗前（t=17.40，P＜ 0.05）。光疗24次时，治愈24例，显效28例，好转8例，有效率87%。光疗中无1例终止治疗，未出现光毒反应。患者均有不同程度皮肤干燥，外用润肤剂可缓解，并有不同程度皮肤色素沉着；出现皮肤灼热、红斑者5例，给予减量或暂停治疗后即可恢复，不影响治疗。

2.外周血中纤溶酶及CCL20表达：治疗前，患者组纤溶酶及CCL20表达量均显著高于对照组（t=15.45、11.15，均P＜0.05）；治疗后均显著低于治疗前（t=4.97、6.44，均P＜0.05），但仍高于对照组（t=10.82、7.95，均P＜ 0.05），见表2。

3.相关性分析：治疗前银屑病患者外周血纤溶酶与CCL20水平呈正相关（r=0.57，P＜ 0.05），纤溶酶、CCL20水平与PASI评分均呈正相关（r=0.49、0.62，均P＜ 0.05）。

三、讨论

寻常性银屑病真皮乳头部血管增生、迂曲扩张，管壁轻度增厚［3］。血管新生与血管内皮损伤活化有关，后者可引起一系列凝血及抗凝血功能异常。本研究显示，寻常性银屑病患者治疗前外周血血浆中纤溶酶水平显著高于对照组。Li等［4］对健康小鼠耳部皮肤注射纤溶酶，28 d后注射部位皮肤产生明显的银屑病样皮损，且CCL20、白细胞介素（IL）⁃17、IL⁃23、干扰素γ、肿瘤坏死因子α、IL⁃6、IL⁃1和IL⁃22等炎症因子较正常小鼠耳部皮肤显著增加，表明纤溶酶可能在银屑病发病过程中起促炎症作用。

研究发现［5］，纤溶酶与其受体膜联蛋白Ⅱ结合后，在核因子κB信号通路的调节下刺激树突细胞产生CCL20。王爱民等［6］发现，银屑病患者皮损区和非皮损区中核因子κBp65、CCL20表达明显高于正常对照皮肤。本研究也显示，寻常性银屑病患者治疗前外周血中CCL20表达水平显著高于对照组，且治疗前纤溶酶与CCL20水平也呈正相关。趋化因子CCL20是人体循环免疫中 Th17细胞的化学激活剂［7⁃8］，而Th17细胞及相关因子与银屑病的发生发展密切相关。同时，CCL20通过与其唯一配体CCR6结合，形成CCL20/CCR6轴，对T细胞及树突细胞产生特异的趋化作用［2］，而这些细胞在银屑病炎症机制中发挥重要作用。本研究显示，银屑病患者经NB⁃UVB照射治疗后，纤溶酶和CCL20表达水平均显著降低，且明显低于治疗前水平，但仍显著高于对照组。推测纤溶酶和CCL20在银屑病的发病机制中可能发挥一定的促炎症作用。

表1 窄谱中波紫外线治疗60例寻常性银屑病患者的临床疗效及PASI评分

表2 窄谱中波紫外线治疗寻常性银屑病患者前后血浆纤溶酶和CC趋化因子配体20（CCL20）水平变化（±s）

表2 窄谱中波紫外线治疗寻常性银屑病患者前后血浆纤溶酶和CC趋化因子配体20（CCL20）水平变化（±s）

注：a：与治疗前比较，P ＜ 0.05；b：治疗前后比较，P ＜ 0.05；c：与健康对照组比较，P＜0.05

组别健康对照组银屑病患者组治疗前治疗后例数50纤溶酶（μg/L）76.30±26.92a CCL20（pg/L）205.33±49.89a 60 60 180.07±40.62b 148.22±40.05c 422.41±129.87b 329.67±100.73c

本研究显示，NB⁃UVB照射治疗寻常性银屑病取得较好疗效，有效率为87%。研究表明［9］，NB⁃UVB照射可有效抑制表皮角质形成细胞过度增殖，减轻炎症细胞浸润程度；还可降低银屑病患者血清中Th1型细胞因子的水平，使Th1/Th2细胞因子趋向于正常状态。此外，NB⁃UVB还有抗微血管增生的作用［10］。Metwally等［11］研究发现，NB⁃UVB照射可以降低银屑病患者皮损中纤溶酶水平，本研究也证实NB⁃UVB照射可以降低银屑病患者外周血中纤溶酶及CCL20水平。

总之，纤溶酶和CCL20可能在银屑病的发病机制中起一定的促炎症作用，而NB⁃UVB照射可能通过降低银屑病患者外周血中纤溶酶及CCL20的水平发挥治疗作用。

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Effects of narrow⁃band ultraviolet B on levels of plasmin and CC chemokine ligand 20 in peripheral blood of patients with psoriasis vulgaris

Huang Yingmei,Bi Jianping,Zhang Hongying,Li Jun,Qu Caijie,Wang Qingyi,Huang Yong,Jiang Yuxia
Department of Dermatology,Qingdao Municipal Hospital,Qingdao University,Qingdao 266011,China

Zhang Hongying,Email:zhhy1023@163.com

ObjectiveTo investigate the effects of narrow⁃band ultraviolet B（NB⁃UVB）therapy on the levels of plasmin and CC chemokine ligand 20（CCL20）in peripheral blood of patients with psoriasis vulgaris.MethodsA total of 60 patients with psoriasis vulgaris in progressive stage were treated with NB⁃UVB radiation thrice a week for 8 weeks.Enzyme⁃linked immunosorbent assay（ELISA）was performed to detect the levels of plasmin and CCL20 in the peripheral blood of the patients before and after the treatment,as well as in the peripheral blood of 50 healthy controls.ResultsAfter the treatment,psoriasis area and severity index（PASI）scores in patients were significantly decreased compared with those before the treatment（2.54±1.64vs.10.26±3.14,t=17.40,P＜0.05）,and the response rate was up to 87%（52/60）.Before the treatment,levels of plasmin and CCL20 were both significantly higher in the patient group than in the control group（plasmin:180.07 ± 40.62 μg/Lvs.76.30 ± 26.92 μg/L,t=15.45,P＜0.05;CCL20:422.41±129.87 pg/Lvs.205.33±49.89 pg/L,t=11.15,P＜0.05）.After the treatment,levels of plasmin（148.22 ± 40.05 μg/L）and CCL20（329.67 ± 100.73 pg/L）in patients were significantly decreased compared with those before the treatment（t=4.97,6.44,P＜ 0.05）,but still significantly higher than those in controls（t=10.82,7.95,P＜ 0.05）.Before the treatment,the level of plasmin was positively correlated with the level of CCL20 in peripheral blood of the patients（r=0.57,P＜ 0.05）,and the levels of plasmin and CCL20 were both positively correlated with the PASI score（r=0.49,0.62,respectively,bothP＜ 0.05）.ConclusionNB⁃UVB radiation may exert a therapeutic effect on psoriasis vulgaris by reducing levels of plasmin and CCL20 in peripheral blood of patients.

Psoriasis;Ultraviolet therapy;Fibrinolysin;Chemokine CCL20

张洪英，Email：zhhy1023@163.com

10.3760/cma.j.issn.0412⁃4030.2017.08.011

2016⁃08⁃01）

（本文编辑：周良佳 颜艳）