临床微生物检验和细菌耐药性监测探析

河南省濮阳市安阳地区医院（455000）李艳红

在临床疾病的治疗当中，抗生素药物发挥着十分重要的作用，能够有效杀灭致病菌株，进而治愈疾病。但是在长期的应用过程中，部分致病细菌对于药物产生一定的耐药性，药物的作用效果被极大削弱，导致治疗效果不佳[1]。抗生素药物的不合理应用，往往会诱发耐药菌株的大量繁殖，增加疾病的治疗难度。为了提升抗生素药物使用的合理性和有效性，需要加强对细菌耐药性的监测和分析。本研究通过临床微生物检验和细菌耐药性监测，分析其检测结果，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本研究以我院各科室2014年7月～2015年12月期间采集的1308份检测标本作为样本。标本类型：血液405份，尿液363份，痰液327例及各种分泌物213例。科室：外科267份：内科507份、ICU243份以及儿科291份。以上检测标本取样方式、送检时间、检测方式基本一致，检测人员的操作水平接近，其一般资料对照相仿（P＞0.05），可进行对比分析。

1.2 方法 对以上检测标本进行临床微生物检验和细菌耐药性监测，首先进行菌株鉴定。通过细菌和微生物培养，获得其纯种培养物，在显微镜下观察其个体形态，分析其营养要求，观察其生理和生化反应，分析其代谢产物。然后鉴定其生长温度、氧需及宿主种类，综合分析，进而鉴定其菌种。根据细菌的形态特征和理化特性仍无法准确鉴定其菌种时，则需要提取该细菌基因组DNA，经PCR扩增16s rDNA片段，使用DNAMAN序列分析软件，进而确定菌种[2]。由梅里埃公司生产的药物敏感度纸片（革兰阴性杆菌药敏板条GN13、GN09、阳性球菌药敏板条P535），对于血、尿以及痰液中培养的细菌和微生物进行药敏试验。

然后使用营养琼脂培养基（沪食药监械(准)字2012第1400203号 梅里埃(上海)生物制品有限公司），采用肉汤稀释法和E-test法，接着检测抗生素药物的MIC值。应用青霉素G、头孢唑啉、氧氟沙星、环丙沙星以及头孢他啶等抗生素药物。根据CLSI标准，鉴定细菌的耐药性。同时行琼脂稀释法和纸片扩散法，进一步测定其测定药物抑菌或杀菌能力，观察耐药菌株的检出结果。

附表 检出菌株的耐药情况

1.3 统计学处理 以SPSS19.0统计学软件进行数据的处理和分析，计数资料以n或 %表示，采用χ2检验，计量资料以（±s）表示，采用t 检验，统计结果P ＜0.05代表差异有统计学意义。

2 结果

2.1 检出结果 在1308份检测标本当中，检出多重耐药菌株（M D R）2 9 7 份，检出率为2 2.7%，其中外科5 4 例，检出率为20.2%；内科117例，检出率为23.1%；ICU科室81份，检出率为33.3%；儿科45份，检出率为15.5%。在297份耐药菌株当中，其中凝固酶阴性葡萄球菌117例（39.4%）、金黄色葡萄球菌81例（27.3%），铜绿假单胞菌45例（15.2%），大肠埃希菌27例（9.1%）以及肠球菌27例（9.1%）。

2.2 检出菌株的耐药情况 通过药敏试验，凝固酶阴性葡萄球菌对于青霉素G的耐药性最高，头孢他啶其次，对于其他三种抗生素药物的耐药性相对不高；金黄色葡萄球菌对于青霉素G的耐药性较高；铜绿假单胞菌对于头孢唑啉和青霉素G的耐药性较高；大肠埃希菌对于青霉素G的耐药性较高；而肠球菌对于头孢他啶的耐药性较高。不同菌株的耐药性存在着显著的差异（P＜0.05）。与其他菌株相比，凝固酶阴性葡萄球菌的耐药性最为显著，其对于多种抗生素药物均具有较高的耐药性。而青霉素G在凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌以及大肠埃希菌均存在较高的耐药性。在27株肠球菌中，耐青霉素肠球菌9株，其中粪肠球菌1株，屎肠球菌8株，其对于青霉素G的耐药性分别为11.4%和72.1%，对比差异显著（P ＜0.05）详见附表。

3 讨论

细菌的耐药性在很大程度上影响着抗生素药物的疗效，这与抗生素药物的长期使用或不合理用药有关。目前，广谱抗生素药物得到广泛的开发和应用，但是随之而来的是对药物的滥用。在细菌性疾病治疗中，过分依赖抗生素药物，导致耐药性菌株种类明显增加，给临床疾病的治疗带来了一定的困扰。经研究表明，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）对于β-内酰胺类和头孢类抗生素具有较强的耐药作用，其具有广谱耐药性。而大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌中易生产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs），ESBLs菌株对于青霉素类、第三代头孢菌素具有水解灭活的作用，其耐药性较强。即使在同类型菌株当中，不同细菌对于相同药物的耐药性也存在着较大的差异，粪肠球菌对于青霉素G的耐药性明显低于屎肠球菌，耐青霉素肠球菌株以屎肠球菌为主。

鉴于细菌耐药性的普遍存在，为了保证合理、安全的应用抗生素药物，需要通过严格的监测与鉴定，判断不同类型抗生素药物是否适用于临床治疗当中。不同菌株对于抗生素药物的耐药性不同，需要根据临床微生物检验和细菌耐药性监测结果，准确予以筛查和鉴别，为临床治疗提供可靠的参考依据，提高临床用药的合理性，降低用药风险。

综上所述，通过临床微生物检验和细菌耐药性监测，了解菌株对于抗生素药物的耐药性，以此为参考，合理使用药物，以提高药物治疗效果，具有重要的临床意义和价值。