Th17/Treg在预测多发性骨髓瘤首次化疗后感染中的价值

沈 健，郑 瑞

(台州医院，浙江 临海 317000)

·基础与临床研究·

Th17/Treg在预测多发性骨髓瘤首次化疗后感染中的价值

沈 健，郑 瑞

(台州医院，浙江 临海 317000)

目的：探讨多发性骨髓瘤(MM))患者首次化疗后感染的影响因素及Th17/Treg在预测首次化疗后感染的价值。方法根据是否发生首次化疗后感染，将MM患者分为感染组49例和非感染组45例，采用Logistic回归分析探讨首次化疗后感染的影响因素。采用流式细胞仪检测Th17和Treg，比较2组的差异，采用受试者工作特征曲线分析Th17/Treg预测MM患者感染的敏感度与特异度。结果MM患者首次化疗后感染发生率为52.13%；感染组Th17细胞、Th17/Treg比值显著高于非感染组，感染组Treg细胞显著低于非感染组，差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线下面积=0.818，通过ROC曲线确定cutoff值为1.84，敏感度为0.813，特异度为0.789。Logistic回归分析提示，Th17/Treg、住院时间、血肌酐、白蛋白、年龄均为MM患者感染的影响因素。结论Th17/Treg是MM患者发生首次化疗后感染的影响因素，测定Th17/Treg可以监测MM患者的免疫状态，预测其首次化疗后感染风险。

多发性骨髓瘤；Th17；Treg；感染；化疗

Abstract: [Objective] To explore the value of peripheral blood Th17 and Treg cells in predicting the infection after primary chemotherapy in patients with multiple myeloma(MM). [Method] The patients with MM were divided into infection group and non- infection group according to whether the occurrence of infection after primary chemotherapy. The Logistic regression analysis was used to explore the risk factors of infection. The peripheral blood Th17 and Treg cells were measured by flow cytometry and were compared between the two groups. The receiver operating characteristic curve (ROC) was used to analyze the sensitivity and specificity of Th17/Treg in predicting the infection of MM. [Result] The incidence of infection in patients with MM was 52.13%. The Th17 and Th17/Treg cells in infection group were significantly higher than that in the non infection group (P<0.05), and the Treg cell in infection group was significantly lower than that in non infection group(P<0.05). The area under the ROC curve, the cutoff value, the sensitivity and the specificity was 0.818, 1.84, 0.813 and 0.789, respectively. Logistic regression analysis showed that the Th17/Treg, hospitalization time, serum creatinine, albumin, age were the influence factors of infection after primary chemotherapy in MM patients. [Conclusions] TH17/TREG is an infection factor for MM after primary chemotherapy. Determination of Th17/Treg level can monitor immune status and predicted the risk of infection.

Keywords: Multiple myeloma; Th17; Treg; infection; chemotherapy

Treg细胞与Th17细胞比例失衡在很多自身免疫性疾病的发生和发展中具有重要作用[1]。近年来研究[2]发现，多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)患者也存在Treg细胞与Th17细胞比例失衡，而且在初发、平台期、复发/难治患者中具有显著差异，提示该免疫失衡在MM发生和发展过程具有重要作用。本研究以MM患者为研究对象，探讨Th17/Treg在预测MM首次化疗后感染中的价值，为预防MM患者感染提供帮助。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2010年2月至2015年2月我院收治的94例MM患者为研究对象。纳入标准：(1)初发病例，未经过治疗；(2)入院前、入院48h内及化疗前均无感染表现；(3)签署知情同意书。排除标准：(1)合并自身免疫性疾病、艾滋病、梅毒及其他肿瘤；(2)不配合治疗，擅自停药者；(3)年龄<18岁。

1.2 方法

1.2.1 感染诊断 参照第12版《实用内科学》[3]：(1)呼吸道感染。根据临床症状(咳嗽)、体征和实验室检查(肺CT)；(2)胃肠道感染。根据腹泻、腹痛症状及实验室检查(大便常规白细胞阳性、培养找到病原微生物)；(3)泌尿系感染。根据症状(尿频、尿急、尿痛、腰疼、发热)和实验室检查(尿常规提示尿白细胞阳性，中段尿培养培养到微生物)；(4)败血症。体温高于38℃，伴有寒战，血培养阳性，但无特别侵入途径。

1.2.2 观察指标 (1) 患者一般资料。在患者本次入院时收集一般资料，包括性别、年龄、疾病分期、M蛋白免疫学分型、化疗方案、住院时间等；(2)实验室指标。包括血肌酐、白蛋白、血红蛋白、Th17细胞、Treg细胞。所有化验检查均采用入院次日清晨空腹血检测。其中血肌酐、白蛋白、血红蛋白采用日本OLYMPUS-5400全自动生化分析仪检测。Treg细胞和Th17细胞，均采用FACSCalibur流式细胞仪检测，采用CellQuest Pro软件分析数据，具体步骤参照说明书。

1.3 统计学处理

采用SPSS18.0软件进行数据处理。组间比较采用t检验和χ2检验，采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Th17/Treg预测MM患者感染的敏感度与特异度，采用Logistic回归分析MM患者首次化疗后感染的影响因素。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 MM患者感染发生率

94例MM患者中，49例发生感染，占52.13%。其中呼吸道感染30例(61.22%)；泌尿道感染6例(12.24%)；胃肠道感染5例(10.20%)；败血症3例(6.12%)，混合感染5例(10.20%)。

2.2 感染组和非感染组Th17/Treg的比较

感染组Th17细胞、Th17/Treg比值显著高于非感染组，感染组Treg细胞显著低于非感染组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 感染组和非感染组Th17/Treg的比较

2.3 ROC曲线分析

以感染组Th17/Treg为观察组，以非感染组Th17/Treg为对照组，绘制ROC曲线。曲线下面积=0.818，P=0.024，见图1。通过ROC的移动诊断界点(Coordinats of the Curve)确定cutoff值为1.84，敏感度为0.813，特异度为0.789。

图1 ROC曲线

2.4 MM患者首次化疗后感染影响因素的单因素分析

感染组和非感染组年龄、血肌酐、白蛋白和住院时间比较，差异有统计学意义(P<0.05)；2组性别、D-S分期、ISS分期、M蛋白免疫学分型、浆细胞比例、血红蛋白和化疗方案比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。

表2 MM患者首次化疗后感染影响因素的单因素分析

注：D-S分期：Durie-Salmon分期；ISS分期：国际分期；VAD：长春新碱、阿霉素、地塞米松；PAD：硼替佐米、阿霉素、地塞米松；MPT：马法兰、泼尼松、沙利度胺。年龄、浆细胞比例、血肌酐、白蛋白、血红蛋白和住院时间的界值参照既往文献[1, 5]得出的多发性骨髓瘤患者化疗后感染的危险因素。

2.5 MM患者感染影响因素的Logistic回归分析

以是否发生感染为因变量(否=0，是=1)，以单因素分析有统计学意义变量为自变量[(年龄：<65岁=0，≥65=1)、血肌酐(≤176μmol/L =0，>176μmol/L =1)、(白蛋白：<37g/L=0, ≥37g/L=1)、(住院时间：<4周=0，≥4周=1)、Th17/Treg：<1.84=0，≥1.84=1)，进行Logistic回归分析，结果提示Th17/Treg、住院时间、血肌酐、年龄均为MM患者感染的危险因素， 其中Th17/Treg是主要危险因素，白蛋白为MM患者感染的保护因素，见表3。

表3 MM患者感染影响因素的Logistic回归分析

3 讨论

研究[4]发现，MM患者感染的影响因素包括住院时间、血肌酐、白蛋白、年龄，本研究与其结果相似，再次证实这些因素为MM患者感染的影响因素。本研究发现，Th17/Treg为MM患者首次化疗后感染的影响因素。Treg细胞不仅能通过细胞间直接接触抑制效应性T细胞功能，还能通过分泌细胞因子等多种方式发挥抑制作用，故具有免疫无能和免疫抑制两大特性，近年来发现具有抗炎作用[5]。Prabhala等[6]研究发现，在MM患者中CD4+、CD25+细胞数量增加，而表达Foxp3的调节T细胞的数量明显减少，且这些细胞有功能缺陷。本研究发现，感染组MM患者外周血中Treg细胞低于非感染组，提示感染组MM患者抗炎作用减弱。Th17细胞通过其分泌的细胞因子来促进中性粒细胞的动员、募集和活化，介导促炎症反应[7]。本研究发现，感染组患者外周血Th17细胞显著高于非感染组，提示感染组MM患者外周血Th17细胞比例增多，促炎作用增强。目前很多研究都发现Th17/Treg比例失衡在MM发病过程中起重要作用，本研究发现，感染组患者Th17/Treg比值显著高于非感染组，提示感染组的免疫失衡明显重于非感染组，这可能为其发生感染的重要原因。最近白如雪等[8]对重症急性胰腺炎患者进行研究发现，继发感染组Th17/Treg比值显著高于非感染组，提示Th17/Treg和重症急性胰腺炎感染相关，但未探讨两者的因果关系。本研究采用Logistic回归分析，证实了Th17/Treg为MM患者并发感染的影响因素，并采用ROC曲线找出了感染的cutoff值，提示临床医生，对于Th17/Treg≥1.84的MM患者感染风险可能增加，应采用合理的预防措施。

综上所述，并发感染的MM患者Th17/Treg失衡更严重，Th17/Treg为MM并发感染的影响因素，纠正Th17/Treg失衡可能为降低MM患者感染的新思路。但本研究Th17/Treg诊断分界点ROC曲线下面积小于0.9，且灵敏度和特异度并不高，还需进一步扩大样本加以确定。

[1]Rafiee M, Gharagozloo M, Ghahiri A, et al. Altered Th17/Treg Ratio in Recurrent Miscarriage after Treatment with Paternal Lymphocytes and Vitamin D3: a Double-Blind Placebo-Controlled Study[J]. Iran J Immunol, 2015,12(4):252-262.

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[3]陈灏珠.实用内科学[M].第12版.北京:人民卫生出版社,2005.

[4]陈文婷,姚红霞,吴巨峰,等.多发性骨髓瘤患者化疗后感染的研究[J].中华医院感染学杂志,2014,24(23):5849-5850.

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[6]Prabhala RH, Neff P, Bae JE, et al．Dysfunctional T regulatory cells in multiple myeloma[J]. Blood, 2006, 107(1): 301-304．

[7]Prabhala RH, Pelluru D, Fulciniti M, et al．Elevated IL-17 produced by Th17 cells promotes myeloma cell growth and inhibits immune function in multiple myeloma[J]. Blood, 2010, 115(26):5385-5392.

[8]白如雪,杜时雨,段军,等. Th17/Treg免疫平衡在老年人重症急性胰腺炎继发性感染中的变化及意义[J].中华老年医学杂志,2015,34(6):630-634.

ThevalueofperipheralbloodTh17andTregcellsinpredictingtheinfectionafterprimarychemotherapyinpatientswithmultiplemyeloma

SHENJian,ZHENGRui

(Taizhou Hospital, Zhejiang 317000, China)

沈 健(1980-)，男，浙江临海人，硕士，主治医师。研究方向：多发性骨髓瘤发病机制

R551.3

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1672-0024(2017)01-0035-04