养胃颗粒对大鼠慢性萎缩性胃炎的药效学研究

刘建

江苏省如东县第四人民医院 江苏 如东 226400

养胃颗粒对大鼠慢性萎缩性胃炎的药效学研究

刘建

江苏省如东县第四人民医院 江苏 如东 226400

目的：探讨养胃颗粒对慢性萎缩性胃炎(CAG)胃液pH值和胃壁厚度及大鼠白细胞介素-β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响及机制。方法：将健康Wistar大鼠随机分为6组，即正常组，CAG组，养颗粒低、中、高剂量组，酶维素组。MNNG灌胃综合法建CAG模型，正常组予蒸馏水灌胃。造模成功后开始给予药物治疗，养胃颗粒按1.5、3.0、4.5g/kg的剂量连续60天灌服，取材后检测胃液pH值和胃壁厚度，采用放射免疫法测定血清IL-1β和TNF-α的含量。结果：与正常组比较，CAG组胃液pH值升高(P＜0.01)，胃壁厚度明显减少(P＜0.01)、IL-1β和TNF-α水平显著升高(P＜0.0l)；与CAG组比较，养胃颗粒(高剂量)组胃液pH值显著降低(P＜0.01)，养胃颗粒(高、中剂量)组胃壁厚度明显增厚(P＜0.01)，(高、中剂量)组IL-1β和TNF-α水平显著降低（P＜0.01）；与酶维素组比较，养胃颗粒高剂量组均有显著性差异（P＜0.01）。结论：养胃颗粒对CAG模型有较好的治疗作用，促进胃酸分泌，提高胃酸水平，保护胃粘膜并使病变明显改善、抑制IL-1β和TNF-α等细胞因子可能是其部分作用机制。

慢性萎缩性胃炎 养胃颗粒 胃液pH值 胃壁厚度 白细胞介素-β 肿瘤坏死因子-α

慢性萎缩性胃炎(CAG)是以胃粘膜局灶性或广泛性上皮和固有腺体萎缩，粘膜变薄，粘膜肌层增厚，伴有肠上皮化生和异型增生为特征的慢性疾病，阻止和逆转慢性萎缩性胃炎向胃癌发展，对减少胃癌发生率有重要意义，现代医学对CAG缺乏有效治疗手段，中医药对其治疗显示出优越性[1]。笔者根据CAG的发病特点，观察养胃颗粒对大鼠慢性萎缩性胃炎模型的治疗作用，以期探讨其防治CAG的可能作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物：健康Wistar大鼠78只，重量180～230g，由浙江中医药大学实验动物中心提供，按清洁级要求饲养［实验动物许可证号SYXK(浙2008-0115）］。

1.2 实验药物：N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG) (日本TCI公司)；75%无水乙醇(北京化工厂)；盐酸雷尼替丁胶囊(石家庄中诺药业有限公司)；养胃颗粒［正大青春宝药业有限公司，批号：1605007，每袋装5g(无糖型)，临床用量3次/天，1次1袋］，维酶素片(新乡恒久远药业有限公司，批号：20150814)，上述药物临用时以蒸馏水配成所需浓度混悬液。IL-1β和TNF-α试剂盒，由北京华英生物技术研究所提供。

1.3 仪器：高速离心机HHR21型，北京医用离心机厂；电热恒温水浴箱HWS-20型，江苏太仓市实验设备厂；SN-682型放射免疫γ计数器，上海核福光电仪器有限公司生产；美国BS-200S分析天平，北京赛多利斯天平有限公司。

1.4 方法：分述如下。

1.4.1 动物模型的建立：空白组的大鼠自由饮食饮水，同时每天灌胃去离子水10ml/kg；模型组采用以MNNG为主的综合造模方法，具体如下：用去离子水配制成浓度为lg/L的母液，存放于4℃冰箱备用，每周制备1次，使用时将其稀释成150μg/ml的溶液，置于黑色饮水瓶中，自由饮用，每天更换，同时每日灌胃雷尼替丁溶液(0.03g/kg)，期间不予其他食物，配以饥饱失常的方式，即双日饱食，单日禁食，单日禁食时，大鼠给予45%的乙醇(1ml/只)灌胃，连续造模l6周。注意MNNG溶液饮用时置入黑胶布包裹的避光饮水瓶内供大鼠饮用。

1.4.2 分组和给药：Wistar大鼠78只，随机分为两组，正常对照（空白）组14只。模型组64只，按上述方法进行造模，实验第12、16周末各组随机抽检2只大鼠，检查造模情况，第16周末单纯造CAG模成功，将60只模型组大鼠随机分为空白模型组，养胃颗粒低、中、高剂量组，酶维素组，每组12只，在继续造模的基础上分别给予养胃颗粒低、中、高剂量组给药剂量分别为1.5、3.0、4.5g/ kg体重，维酶素组按0.5g/kg给药，蒸馏水每日1次，给药体积为l0ml/kg体重，连续给药60天。

1.4.3 检测指标[2]：大鼠腹腔注射350mg/kg(10ml/kg)水合氯醛麻醉，经腹主静脉采血，3500r/min离心10min，分离血清于-70℃下保存。按试剂盒说明书操作，采用放射免疫法测定血清IL-1β和TNF-α的含量。大鼠仰卧位固定于手术板上，沿腹正中线剪开，结扎贲门和幽门，在贲门标记上方和幽门标记下方剪开分离胃组织，沿大弯侧剪开胃组织，放入30ml去离子水中冲洗，将冲洗液放入50ml离心管中用1500r/min离心10min，用pH仪测量胃液pH值。收集胃酸后用去离子水将胃组织冲洗干净，每个胃随机选取5个点以游标卡尺测量厚度，取平均值作为其胃壁厚度。

1.4.4 统计学处理：用SPSS17.0统计软件进行分析。数据均采用±s表示,组间比较方差齐采用单因素方差分析以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组胃酸值pH及胃壁平均膜厚度比较：见表1。

表1 各组大鼠胃酸ph值、胃壁平均厚度的比较（±s）

表1 各组大鼠胃酸ph值、胃壁平均厚度的比较（±s）

注：与正常组比较，**P＜0.01；与CAG组比较，##P＜0.01；#P＜0.05；与酶维素组比较，&&P＜0.01。

pH值4.56±0.89 6.78±0.56**6.23±0.81 5.67±0.5##4.83±0.74##&&5.88±0.63#组别正常组CAG组养胃颗粒低剂量组养胃颗粒中剂量组养胃颗粒高剂量组酶维素组例数10 10 11 11 12 11胃壁平均厚度（μm）670±28 417±22**470±33 513±42##594±26##&&467±32

2.2 各组大鼠血清IL-1β和TNF-α：见表2。

表2 各组大鼠血清IL-1β和TNF-α含量比较(±s)

表2 各组大鼠血清IL-1β和TNF-α含量比较(±s)

注：与正常组比较，&&P＜0.01；与CAG组比较，**P＜0.01，*P＜0.05；与酶维素组比较，##P＜0.01。

组别正常组CAG组养胃颗粒低剂量组养胃颗粒中剂量组养胃颗粒高剂量组酶维素组TNF-α(μg/L) 27.89±7.83 52.47±9.75&&42.25±8.77**36.33±6.54**##30.67±9.34**##40.27±9.28**例数10 10 11 11 12 11 IL-1β(μg/L) 63.39±16.87 105.81±17.94&&97.66±18.12*79.43±17.79**##68.81±17.94**##95.03±16.89*

3 讨论

CAG可归属于中医学“胃脘痛”“痞满”等范畴。养胃颗粒由黄芪、党参、白芍、山药、乌梅、陈皮、香附和甘草8味药材组成，具有养胃健脾、理气止痛及和中生津之功效，用于胃脘胀满、气滞作痛、食欲不振、消化不良等症，对临床上急慢性胃炎、萎缩性胃炎均有较好的疗效。现代药理研究证实[3]，养胃颗粒对冰醋酸所致大鼠溃疡具有明显的治疗作用，能显著减小溃疡面积，提高溃疡愈合百分率；其作用机制可能与其升高血清SOD活性，降低血清MDA含量，从而提高机体抵抗脂质过氧化反应的能力有关。同时养胃颗粒还能够明显促进CAG大鼠血清GAS、SS以及PGE的分泌,从而增强胃粘膜的防御机能。

CAG的发生发展是由多种因素诱发，其中胃酸的分泌水平，尤其是壁细胞的泌酸功能在萎缩性胃炎发生、发展中发挥重要的作用[4]。IL-1β是一种前炎症因子炎性活细胞素，主要由单核细胞、巨噬细胞等在摄取抗原抗体复合物或抗原递呈过程中产生。在正常生理条件下，IL-1β可以调节全部类型的胃粘膜上皮细胞的功能，抑制胃酸分泌，由于其抑制作用强烈，故可导致胃粘膜萎缩，甚至发生胃癌[5]，TNF-α主要由T细胞单核细胞分泌，TNF-a在胃粘膜组织炎症的发生发展中起着重要的作用，可能是胃粘膜炎症形成初始阶段重要细胞因子之一[6]。因此，本研究采用长期饮用MNNG复制大鼠慢性萎缩性胃炎模型，观察养胃颗粒对慢性萎缩性胃炎的治疗作用。

本实验结果表明，CAG大鼠胃酸pH值较正常组明显增高，且胃壁平均厚度较正常大鼠胃壁厚度明显变薄(P＜0.01)；养胃颗粒的治疗作用较模型组和霉维素组有显著性差异（P＜0.01），提示养胃颗粒可明显提高CAG的胃酸分平，降低胃酸pH值，进而保护胃粘膜并使病变逐渐改善。同时，CAG模型大鼠血清IL-1β和TNF-a水平显著升高（P＜0.01）。而养胃颗粒组尤其是高剂量组大鼠血清IL-1β和TNF-α的含量明显降低，提示养胃颗粒治疗CAG的机制可能与其抑制IL-1β、TNF-α等细胞因子活性有关。

综上所述，养胃颗粒对慢性萎缩性胃炎大鼠有明显的治疗作用，明显促进胃液分泌，对胃泌素分泌具有调节作用，切断炎症因素对胃粘膜的损伤，为临床用药提供实验数据和理论依据。

[1]朱永苹，朱燕华，张学宁，等.中医治疗慢性萎缩性胃炎研究进展[J].实用中医药杂志，2014，30(2)：168-169.

[2]徐叔云，卞如濂.药理实验方法学[M].北京：人民卫生出版社，2003：13.

[3]周学俭,王香花.养胃颗粒对慢性萎缩性胃炎大鼠胃泌素、生长抑素和前列腺素E2的影响[J].浙江中医杂志，2013，48（5）：213-215.

[4]周平，李和全，永田博司.丹参提取物F对胃黏膜主细胞的保护作用[J].中国病理生理杂志，1999，15(3)：931-933.

[5]EL-Omar M.The importance of interleukin 1B in Helicobacter pyloriassociated disease[J].Gut,2001,48 (6)：743-747.

[6]RadR,DossumbekovaA,NeuB，eta1.Cytokinegene polymorphisms influence mucosal cytokine expression, gastric inflammation,and host specific colonisation during Helicobacter pylori infection[J].Gut，2004，53 (8)：1082-1089.

2017-03-20