金银花注射液抗菌药理作用研究

张燕

江苏省中医院 江苏南京 210029

金银花注射液抗菌药理作用研究

张燕

江苏省中医院 江苏南京 210029

目的：考察金银花注射液的体内抗菌药理作用。方法：通过给金黄色葡萄球菌感染小鼠、肺炎双球菌感染小鼠静脉注射、灌胃不同浓度金银花注射液，考察其体内抑菌作用。结果：金银花注射液能降低金黄色葡萄球菌感染小鼠、肺炎双球菌感染小鼠的死亡率，延长存活天数，同剂量组静脉注射作用强于灌胃给药。结论：金银花注射液具有体内抗菌作用。

金银花注射液；金黄色葡萄球菌；肺炎双球菌；小鼠；药理作用

金银花为忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.的干燥花蕾或带初开的花；具有清热解毒，疏散风热的作用。用于痈肿疔疮，喉痹，丹毒，热毒血痢，风热感冒，温病发热[1]；含挥发油类、黄酮类、有机酸类和三萜皂苷类物质，其抗茵有效成分为绿原酸类化合物。[2]金银花注射液为金银花经提取纯化而成，绿原酸含量高，本文通过体内抗菌试验，考察其抗菌作用。

1.材料与方法

1.1 材料

金银花注射液，10ml/瓶，相当于生药材10g，自制；双黄连注射液，河南淅川制药集团有限公司；盐酸林可霉素，南京第三制药厂。

营养肉汤，上海中科昆虫生物技术开发有限公司；营养琼脂，江苏省病症控制中心微生物试剂厂；胃膜素，由江苏省中医院药理室提供。

临床分离金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌，由江苏省人民医院微生物室鉴定提供。

清洁级ICR小鼠，由南京医科大学提供。

孵箱，上海分析仪器厂；DKB-8A型电热恒温水槽，上海精宏实验设备有限公司。

1.2 方法[3-5]

1.2.1 对金黄色葡萄球菌感染小鼠的保护作用

1.2.1.1 菌液制备

取临床分离金黄色葡萄球菌接种于营养肉汤培养基中，置37 ℃孵箱培养18h。取出，划线于血平板上（10%羊红细胞营养琼脂平板），37℃孵箱培养20h。取出，用6ml 5%的胃膜素（PH 7.2）洗脱菌落，并用4ml生理盐水溶液将血平板冲洗干净，合并后吹打，使菌落分散并分别用生理盐水配成 0.33ml/ml、0.20ml/ml、0.11ml/ml、0.06ml/ml浓度菌液备用。

1.2.1.2 选择合适的菌液浓度

取清洁级ICR小鼠40只，雌雄各半，体重18～22g。随机为4组，每组1个浓度，腹腔注射金黄色葡萄球菌菌液，每鼠0.5ml，观察 24、48、72h感染小鼠死亡数。结果 4组感染小鼠死亡率分别为100%、90%、80%、30%。故实验选用0.11ml/ml浓度菌液。

1.2.1.3 对金黄色葡萄球菌感染小鼠的保护作用试验

取18～22g 清洁级ICR小鼠190只，随机分组，每组19只，雌雄兼用。（1）正常对照组：等量生理盐水（NS）10ml/kg；（2）模型组：等量 NS 10ml/kg；（3）双黄连注射液组：10ml/kg；（4）盐酸林可霉素组：0.3g/kg；（5）金银花注射液Ⅰ组：6.6 g/kg（生药量）；（6）金银花注射液Ⅱ组：13.2 g/kg（生药量）；（7）金银花注射液Ⅲ组：26.4 g/kg（生药量）；（8）金银花注射液Ⅳ组：6.6g/kg（生药量）；（9）金银花注射液Ⅴ组：13.2g/kg（生药量）；（10）金银花注射液Ⅵ组：26.4g/kg（生药量）。以上（1）～（7）组小鼠均静脉注射给药，（8）～（10）组小鼠均灌胃给药，给药容量10ml/kg。各组每日给药1次，连续给药5日。第3日给药后1h，除空白对照组以外，其余各组均腹腔注射金黄色葡萄球菌培养液0.5ml/鼠（菌液浓度0.11ml/ml）。然后继续给药2日。观察各组动物7日内死亡情况。

1.2.2 对肺炎双球菌感染小鼠的保护作用

1.2.2.1 菌液制备

取临床分离肺炎双球菌接种入营养肉汤培养基中，置37 ℃孵箱培养18h。取出，划线于血平板上（1%羊红细胞营养琼脂平板），37℃孵箱培养24h，取出。用6ml 5%的胃膜素（PH 7.2）洗脱菌落，并用4ml生理盐水溶液将血平板冲洗干净，合并后吹打，使菌落分散。用生理盐水配成 1ml/ml、0.5ml/ml、0.33ml/ml、0.25ml/ml浓度菌液备用。

1.2.2.2 选择合适的菌液浓度

取清洁级ICR小鼠40只，雌雄各半，体重18～22g随机分组，每组1个浓度，腹腔注射肺炎双球菌菌液0.5ml/鼠，观察感染小鼠死亡数。结果感染小鼠死亡率分别为100.0%，100.0%，60.0%，30.0%。故实验选用0.45ml/ml浓度菌液（小鼠死亡率估计80～90%之间）。

1.2.2.3 对肺炎双球菌感染小鼠死亡的保护作用试验

取18～22g 清洁级ICR小鼠190只随机分组，每组19只，雌雄兼用。（1）正常对照组：等量 NS 10ml/kg；（2）模型组：等量 NS 10ml/kg；（3）双黄连注射液组：10ml/kg；（4）林可霉素组：0.3g/kg；（5）金银花注射液Ⅰ组：6.6g/kg（生药量）；（6）金银花注射液Ⅱ组：13.2g/kg（生药量）；（7）金银花注射液Ⅲ组：26.4g/kg（生药量）；（8）金银花注射液Ⅳ组：6.6g/kg（生药量）；（9）金银花注射液Ⅴ组：13.2g/kg（生药量）；（10）金银花注射液Ⅵ组：26.4g/kg（生药量）。以上（1）～（7）组小鼠均静脉注射给药，（8）～（10）组小鼠均灌胃给药，给药容量10ml/kg。各组每日给药1次，连续给药5日。第3日给药1小时后，除正常对照组外，其余各组均腹腔注射肺炎双球菌培养液0.5ml/鼠（菌液浓度0.45ml/ml）。然后继续给药2日。观察各组动物7日内死亡情况。

2.结果

2.1 对金黄色葡萄球菌感染小鼠的保护作用

实验结果显示：金银花注射液三个剂量组静脉注射给药对金黄色葡萄球菌感染小鼠可降低其死亡率，13.2g/kg和26.4g/kg组可延长感染小鼠的存活天数，与模型组比较具有显著性差异（P＜0.05，0.01），效果优于同剂量灌胃给药P＜0.05）。表明金银花注射液对金黄色葡萄球菌感染小鼠具有明显的保护作用。见表1。

表1 金银花注射液对金黄色葡萄球菌感染小数死亡的保护作用（按生药量计算）

2.2 对肺炎双球菌感染小鼠的保护作用

实验结果显示：金银花注射液三个剂量组静脉注射给药对肺炎双球菌感染小鼠均可降低其死亡率，延长存活天数，与模型组比较有显著差异（P＜0.05，0.01）。作用优于同剂量灌胃给药组（P＜0.05）。表明金银花注射液对肺炎双球菌感染小鼠具有一定的保护作用。见表2。

表2 金银花注射液对肺炎双球菌感染小鼠死亡的保护作用（按生药量计算）

**P＜0.01 与模型组比较；△P＜0.05，金银花注射液静脉注射给药与灌胃给药同剂量组比较

3.讨论

体内抗菌试验结果显示：金银花注射液 6.6、13.2、26.4 g/kg（生药量）三个剂量组静脉注射及灌胃给药，以静脉注射效果较好，可降低金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌感染小鼠的死亡率，延长感染小鼠的存活天数。表明金银花注射液体内给药具有较好的抗金黄色葡萄球菌和肺炎双球菌的作用。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典2015年版（一部）[s].北京：中国医药科技出版社，2015：221.

[2]赵琰玲，尹莲.金银花化学成分与有效成分提取研究进展[J].医药导报，2007：26（5）：521-523.

[3]陈奇主编.中药药理研究方法学[M].人民卫生出版社，2000：239，278，251，298，300，302，305，378.

[4]徐叔云，卞如濂，陈修主编.药理实验方法学[M].人民卫生出版社，2002：1649，1690，1739，1723；1991：719，1233，1226，1230.

[5]中华人民共和国卫生部药政局.新药（西药）临床前研究指导原则汇编[M].1993：51.

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