胃腺癌组织微管解聚蛋白1和突变型P53的表达及意义

王 芳 赵 珺 杨生森 马臻奇 张洪芳 绽永华 郜 茜

(青海大学附属医院消化内科，青海 西宁 810001)

胃腺癌组织微管解聚蛋白1和突变型P53的表达及意义

王 芳 赵 珺1杨生森 马臻奇 张洪芳 绽永华 郜 茜

(青海大学附属医院消化内科，青海 西宁 810001)

目的应用免疫组化方法检测胃腺癌中微管解聚蛋白(Stathmin)1和突变型P53(TP53)的表达，分析二者的关系及意义。方法确诊为胃腺癌的患者共72例为A组，经病理学确诊为胃黏膜高级别上皮内瘤变的术后组织32例为B组，经病理学确诊为胃黏膜低级别上皮内瘤变的内镜咬检组织32例为C组，距肿瘤边缘>5 cm的非肿瘤性胃黏膜组织15例为D组，均留取蜡块组织，应用免疫组化SP法检测4组Stathmin1和TP53的表达。结果4组Stathmin1和TP53表达的阳性率差异均有统计学意义(P<0.01)。A组Stathmin1和TP53的表达与肿瘤最大径、增殖指数密切相关；Stathmin1的表达与肿瘤脉管侵犯密切相关，二者均与肿瘤的淋巴结转移和神经侵犯无相关性。相关分析显示A组Stathmin1和TP53呈正相关。结论胃腺癌中Stathmin1和TP53高表达对肿瘤形成和进展有重要作用。Stathmin1和TP53有明显的正向协同作用。

胃腺癌；微管解聚蛋白(Stathmin)1；突变型(T)P53；免疫组化

胃腺癌是上皮源性肿瘤，与胃黏膜上皮细胞的不典型增生和上皮内瘤变的程度有关〔1〕。病变进展中可以观察到多种基因和蛋白的表达失调。微管解聚蛋白(Stathmin)1是一种细胞蛋白质，作为一种细胞信号调节因子，在微管的不稳定性中扮演着十分重要的角色〔2，3〕。研究显示Stathmin1在恶性肿瘤中的表达升高，可能参与多种生物学作用〔4〕。本文关注胃腺癌组织Stathmin1的表达特征及其与突变型(T)P53的关系，分析其临床意义。

1 资料与方法

1.1一般资料 2014年1月至2016年2月青海大学附属医院确诊为胃腺癌的患者共72例为A组，均行手术根治，并经病理医师确诊，符合世界卫生组织(WHO)的诊断标准。男39例，女33例，年龄58～78(平均63.4)岁，其中高分化15例，中分化17例，低分化40例。经病理学确诊为胃黏膜高级别上皮内瘤变术后组织32例为B组，其中男17例，女15例，年龄56～74(平均65.5)岁。经病理学确诊为胃黏膜低级别上皮内瘤变的咬检组织32例作为C组，其中男18例，女14例，年龄55～70(平均62.4)岁。排除标准：①近3个月有严重感染；②有先天性疾病；③合并其他器官恶性肿瘤的患者。距肿瘤边缘>5 cm的非肿瘤性胃黏膜组织15例为D组，其中男7例，女8例，年龄59～75(平均65.9)岁。4组一般临床资料无明显差异，具有可比性。

1.2Stathmin1和TP53表达检测方法 留取的组织均应用中性甲醛溶液固定超过24 h，经取材后，常规脱水，石蜡包埋，切取4 μm切片置于胶片上，应用免疫组化SP法检测Stathmin1和TP53的表达，二氨基联苯胺(DAB)显色。操作均由病理科技师完成，按说明书进行，做好质控，减少误差。

1.3Stathmin1和TP53结果的判读 Stathmin1的阳性部位是细胞质，TP53阳性部位是细胞核，以出现棕黄色颗粒为阳性。先在100倍镜下选择上皮细胞集中的区域进行观察，然后在400倍镜下选择5个视野计数，取平均值。以阳性率<10%定为阴性，≥10%定为阳性。

1.4统计学方法 采用SAS6.12统计软件进行χ2检验和线性相关性分析。

2 结 果

2.14组Stathmin1和TP53阳性率的比较 A、B、C、D组中Stathmin1和TP53的表达有显著降低趋势(P<0.01)。见表1。

2.2A组不同临床病理特征中Stathmin1和TP53表达阳性率比较 Stathmin1和TP53的表达与肿瘤最大径、增殖指数密切相关，Stathmin1的表达与肿瘤的脉管侵犯密切相关，二者均与肿瘤淋巴结转移和神经侵犯无相关性。见表2。

2.3A组Stathmin1和TP53表达相关性 Stathmin1和TP53呈正相关(r=0.49，P=0.044 0)。

表1 4组Stathmin1和TP53阳性率的比较〔n(%)〕

表2 A组不同临床病理特征中Stathmin1和TP53表达阳性率的比较〔n(%)〕

3 讨 论

胃腺癌形成过程受P53调节通路调控〔5〕。P53是最早发现的肿瘤相关基因之一，有 “分子警察 ”之称〔6〕。其有两种类型，一种是野生型，一种是T。野生型P53基因是一种抑癌基因，但是在正常机体很难检测到〔7，8〕。TP53是一种肿瘤促进基因，不仅可以消除正常的P53功能，还可以调节多种基因的表达〔9，10〕。孔守芳等〔11〕通过检测宫颈上皮内瘤变组织中Stathmin1和P53的表达，发现二者在复发组中的表达明显升高，认为二者联合检测可以作为宫颈上皮内瘤变术后预后判断的生物学指标。Stathmin1是由149个氨基酸组成的蛋白，分子量为19 kD，其结构包括3部分：N端的结构调节域、中心区和C端的蛋白〔12〕。Stathmin1蛋白在细胞周期的各期中对微管解聚活性均有一定作用。研究认为在有丝分裂的间期，Stathmin1以非磷酸化的形式存在，可以加速微管解聚，促使纺锤体形成〔13〕。在早期，Stathmin1经过磷酸化的作用使其活性消失，在晚期去磷酸化而重新激活，纺锤体解体，Stathmin1可以对细胞的增殖有影响〔14〕。有学者通过研究Stathmin1对转移的作用，发现其高表达时可以促进肿瘤细胞迁移。而下调Stathmin1表达能减少转移的频率〔15〕。

本研究提示Stathmin1和TP53高表达是正常上皮-低级别上皮内瘤变-高级别上皮内瘤变-腺癌的重要调节因素，即二者可以促进肿瘤性病变的形成过程。Stathmin1和TP53高表达可以促进肿瘤的生长繁殖和细胞数量的增加，细胞异型性明显，分化程度低，肿瘤的体积增大。本文结果提示Stathmin1高表达可以促进脉管侵犯。本实验提示Stathmin1对脉管的作用可能具有直接侵袭性，或者是对血管的侵袭作用，而对淋巴结播散无明显的作用。本文提示Stathmin1和TP53二者呈现正向协同作用，Stathmin1可能对激活TP53起重要的促进作用〔16〕。有观点显示紫杉类化疗药主要作用于细胞的G2晚期和M期末，可以抑制微管的裂解，引起微管排列异常，使纺锤体失去正常功能而促进细胞凋亡〔17〕。Stathmin1和TP53均与紫杉醇类化疗药物的效果相关，间接提示二者的相关性〔18，19〕。但是Stathmin1和TP53之间调节的具体机制有待后续研究证实。

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〔2017-04-19修回〕

(编辑 苑云杰)

郜 茜(1975-)，女，副主任医师，主要从事消化系统疾病研究。

王 芳(1982-)，女，主治医师，主要从事消化系统疾病研究。

R73

A

1005-9202(2017)17-4299-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.17.062

1 青海大学医学院基础医学部病原生物教研室