生物药物分析方法的质量控制

刘雪松

摘 要：目的：讨论应用于药代动力学和生物利用度研究的生物药物分析方法的质量控制。方法：分析近年来国际学术会议资料，基于此基础系统地介绍分析质量研究方法的主要指标：精密度、准确度、检测限、定量限、标准曲线、方法选择性和稳定性等。结果：生物药物分析方法的质量控制是药代动力学和生物利用度研究中必不可少的重要手段。结论：本文对生物药物分析方法的质量控制可供评价和控制分析方法参考用。

关键词：生物药物；分析方法

1 生物药物的分析

生物药物的分析在实际生产中是十分必要的，通过药物分析手段来测定原料和制剂中药物及有关杂质的含量，控制药物生产至临床应用前药物的质量，生物药物分析是药物体内研究和临床应用期间测定生物材料中药物的含量的主要依据。生物药物分析的目的是保证用药的安全有效，鉴于分析方法本身质量的重要性，近年对药物分析方法质量控制的研究相当普及。

1.1生物药物分析的应用范围

生物药物分析主要应用于：？治疗药物监测，血药浓度测定数据是否准确将直接影响药物疗效和毒副作用；？药代动力学和生物利用度研究已列入卫生部《新药审批办法》中，规定中有关于申报内容、数据的可靠性、获得的参数等要求。如同药物分析一样，生物药物分析方法的质量控制也是必要的。

1.2生物药物分析的研究进展

国内外研究者应用于药代动力学和生物利用度的分析方法的质量控制已经很成熟。其中有文献对生物药物分析方法给予了“评价”[1]，还有一些研究从法定角度出发应进行“认证”[2]。另外，国内学者测定药代动力学参数和生物利用度的新药非常规检验药物，得到了普遍认可[3]。近年见诸国内杂志的生物药物分析方法研究论文，虽然都进行了一些方法学评价，但缺乏系统研究，明显滞后于生物药物分析目前已在新药体内研究中广泛应用的现况。

2须考核的方法和内容

新药申报资料应用的分析方法，都应当考核[4]，包括：①仪器分析法；②生物学方法：免疫分析法和微生物测定法。考核内容应包括：①书面详细报告测定方法：包括样品采集、处理和贮存，测定时样品预处理方法、测定操作、仪器及其参数，数据处理与结果计算等；②提供方法建立时对方法质量全面考核结果与数据；③提供方法应用阶段的质控数据。

3考核的指标

3.1精密度和准确度

同药物分析一样，精密度和准确度也是生物药物分析方法考核的重要指标，但考核的内容和方法有其特殊性。分析方法建立时的考核[5]：①准确度和精密度测定可同时进行；②分析方法应用中的考核，测定样品时，加入质控样品作随行分析，可照标准曲线各浓度配制法；③样品测定次数与重复测定，一般只需作单样分析，只有少数不稳定样品或免疫分析方法才作双样分析，并应在方法考核中说明。

3.2检测限和定量限

近年有药物分析文献详细介绍检测限和定量限的定义和测定方法，生物药物分析也使用LOD和LOQ表示方法的灵敏度，但因生物样品量少，不能以增加取样量方式提高灵敏度，因此更强调LOQ，它反映了标准曲线低濃度端的可靠性，测定时记录各浓度每次测定得到的药物信号强度S与噪音强度N。

3.3标准曲线

所有生物药物分析方法都必须作标准曲线。浓度与响应值的函数关系可作成坐标图或用回归方程表示。考核标准曲线可以使用以下方法：①每次测定样品应同时作标准曲线，作法与考核时应完全一致；②标准浓度点5-8个，每个浓度测定1次或2次；③浓度上限为样品最高浓度的120%，下限为最低浓度的80%；④线性度r=0.9900，截距与最高浓度响应值之比应略高。

3.4选择性

选择性又称专属性，目前很多文献均列为考核指标，但考核的内容和方法尚未统一，下面为目前公认的应考核内容：生物基质的影响：可取3个以上不同个体的空白样品，考察正常生理情况下样品中生物基质的影响。药物代谢物和配伍用药物的影响：应针对可能存在的药物代谢物和合并用药，可将代谢物标准品和药物标准品加入空白样品以及加入供分析样品后再测定，观察是否有干扰。

3.5稳定性与萃取回收率

考核药物标准品溶液的稳定性，即在贮存条件下可稳定的时间。包括：①在室温中的稳定性；②冷冻条件下的稳定性；③此外还应考察加入稳定剂，考察样品提取物的稳定性。萃取回收率指预处理能够将生物样品内含药物多少比例分离出来供分析，它与分析方法的LOQ密切相关，可指导样品预处理。

3.6免疫分析、药物代谢分析与立体异构分析

免疫分析应着重考察结构相近化合物的交叉免疫干扰，并尽可能用色谱法核对结果。药物代谢物的分析应根据文献要求，对于测定代谢物或同时测定药物和代谢物的分析方法，应按照前述相同要求考核。药物立体异构体的分析，由于具立体异构的药物，其左、右旋体在体内的处置和生理活性都可能存在差异，分析生物样品中不同的药物立体异构体。

4 讨论

目前国内、外生物药物分析方法取得了很大的进展，本文目的在于讨论应用于药代动力学和生物利用度研究的生物药物分析方法的质量控制。采用分析近年来国际学术会议资料，基于此基础系统地介绍分析质量研究方法的主要指标：精密度、准确度、检测限、定量限、标准曲线、方法选择性和稳定性等方法，结果表明生物药物分析方法的质量控制是药代动力学和生物利用度研究中必不可少的重要手段。希望本文可以为质量控制和分析方法提供参考。

参考文献：

[1]刘晓志，赵伟，常亮，等.生物药物分析方法验证体系的研究[J].中国药事， 2015（3）：273-276.

[2]张怡轩.生物药物分析[M]. 中国医药科技出版社， 2015（6）：123-125.

[3]李美玲，徐铭凯.生物药物的研究发展及其分析方法的质量控制[J].工程技术：引文版， 2016（9）：00298-00298.

[4]李淑贤.药物分析中的共性问题及分析方法探究[M]. 中国纺织出版社， 2015（10）：256-258.

[5]刘国圣.微生物制药及微生物药物分析[J]. 南方农业， 2016， 10（3）：156-157.endprint