固相萃取——气相色谱法测定地表水中甲拌磷

周守安，毕思远,2*，李晓娜，王炳志，付辉，朱海

（1.深圳市通量检测科技有限公司，广东深圳518102；2.哈尔滨体育学院滑雪教学训练基地博士后科研工作站，黑龙江哈尔滨150008；3.深圳市易瑞生物技术有限公司，广东 深圳518101）

固相萃取
——气相色谱法测定地表水中甲拌磷

周守安1，毕思远1,2*，李晓娜1，王炳志3，付辉3，朱海3

（1.深圳市通量检测科技有限公司，广东深圳518102；2.哈尔滨体育学院滑雪教学训练基地博士后科研工作站，黑龙江哈尔滨150008；3.深圳市易瑞生物技术有限公司，广东 深圳518101）

本文建立固相萃取柱富集，采取气相色谱法测定地表水中甲拌磷。本方法操作简便，萃取时间短，富集效率高，检出限低，精密度和加标回收率符合分析测试要求，有机试剂用量少，适用于地表水中甲拌磷的测定。

固相萃取；气相色谱法；地表水；甲拌磷

甲拌磷是透明的、有轻微臭味的油状液体，是一种高效高毒的有机磷杀虫剂，主要用途是内吸杀虫、杀螨剂，具胃毒、触杀和熏蒸作用。人体吸入、食入、经皮吸收甲拌磷，会抑制胆碱酯酶活性，造成神经生理功能紊乱及肺、肝、肾等损伤，对人体健康造成严重危害。由于甲拌磷在农业方面使用较多，极易污染水体，对环境危害较大，因此准确可靠测定水中甲拌磷的含量是有必要的。测定水中甲拌磷常采用气相色谱法，但分析前需要对水样进行富集预处理[1]。目前，水中有机物前处理方法有液液萃取法、固相萃取法、顶空进样法和吹扫捕集法等，其中固相萃取法具有操作简单、省时省力、有机试剂用量少、易于自动化和价格低等优点，广泛应用于有机物的富集预处理中[2-4]。通过试验研究，采用Waters Oasis HLB固相萃取小柱对地表水样品进行富集前处理，选用乙酸乙酯作为洗脱剂，以气相色谱法测定地表水中的甲拌磷，这个方法能够满足水中痕量甲拌磷的检测要求。

1 实验部分

1.1 主要试验仪器和试剂

安捷伦7890N气相色谱仪及化学工作站，配火焰光度检测器（FPD）；美国睿科Auto SPE-06C型全自动固相萃取仪；N-EVAP112型氮吹浓缩仪；Milli-Q A10型超纯水机；Waters Oasis HLB固相萃取小柱。

甲醇、乙酸乙酯均为色谱纯；盐酸、氢氧化钠和氯化钠均为分析纯；无水硫酸钠，优级纯，于400℃下烘烤4小时以去除干扰物；100ug/ml甲拌磷标准溶液，农业部环境保护科学研究所。

1.2 气相色谱条件

色谱柱：DB-1毛细管色谱柱（30m×0．25mm，250μm）；载气为高纯氮气（纯度≥99．999%），载气流速为2．0mL/min，尾吹流量20mL/min；进样方式为分流进样，分流比为10∶1，进样量为1μL；进样口温度200℃；FPD检测器温度250℃；柱温140℃，保持10分钟。

1.3 水样采集及处理

将地表水样沿玻璃采样瓶壁缓缓倒入瓶中，水样充满后液面上不留有空间，塞紧瓶口使水样处于密封状态。水样采集后最好当天分析，如不能及时分析，应将水样放置在4℃冰箱中避光保存[5]。

将HLB固相萃取小柱安装在全自动固相萃取仪上，依次用5毫升乙酸乙酯、5毫升甲醇和5毫升超纯水进行淋洗、活化萃取柱。取200毫升经0．45μm微孔滤膜过滤后的地表水样品，用盐酸或氢氧化钠调节pH值近中性，开启全自动固相萃取仪真空泵，将水样在真空作用下以4．0毫升/分钟的流速通过活化后的HLB固相萃取小柱。水样过完后继续真空抽干萃取柱，去除柱中残留的水分，用5毫升乙酸乙酯作为洗脱剂反相洗脱固相萃取柱。洗脱液收集后经无水硫酸钠脱水后，放置于氮吹浓缩仪氮气吹扫近干，用乙酸乙酯定容至1．0毫升后，供测定用[6]。

1.4 标准曲线的配制

准确移取100μL浓度为100ug/L甲拌磷标准溶液至10毫升容量瓶中，用乙酸乙酯定容至标线，配制浓度为1000μg/L甲拌磷标准中间液。用微量注射器准确吸取1μL、4μL、10μL、20μL、30μL甲拌磷标准中间液到1毫升乙酸乙酯溶液中，配制浓度为 1．00μg/L、4．00μg/L、10．0 μg/L、20．0μg/L、30．0μg/L的甲拌磷标准系列。

2 结果与讨论

2.1 线性回归方程和方法检出限

取甲拌磷标准系列按照1．2气相色谱条件由低浓度到高浓度依次进样分析，测定相应的峰面积。以甲拌磷峰面积为纵坐标，其质量浓度为横坐标绘制标准曲线，实验结果表明，甲拌磷在1．00～30．0μg/L浓度范围内有较好的线性关系，回归方程为Y=2343X+28．67，相关系数r=0．9994。

在上述气相色谱条件下对浓度为1．00g/L的甲拌磷溶液平行测定7次，计算其标准偏差S分别为0．0319μg/L。检出限按MDL=S·t（n-1,0．99）计算，式中 t（n-1,0．99）为置信度为99%、自由度为n-1时t值，n为重复次数，当n=7时，t值取3．143，计算出地表水中甲拌磷的检出限为0．10μg/L[7]。

2.2 洗脱剂的选择

洗脱液的选择直接影响到甲拌磷测定结果的回收率，本文对浓度为10μg/L甲拌磷水样按上述步骤进行固相萃取后，分别选用正已烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、丙酮作为洗脱液，对萃取柱进行洗脱后分析。实验结果表明，由以上4种洗脱液对相同体积、相同浓度和相同萃取条件下测得甲拌磷的回收率，乙酸乙酯对HLB固相萃取小柱的洗脱效果最好，甲拌磷测定结果的回收率在90%。因此，本文选用乙酸乙酯作为洗脱液。

2.3 水样流速的选择

本文试验了浓度为 10μg/L甲拌磷水样以 2mL/min、4mL/min、6mL/min、8mL/min流速通过活化后的HLB固相萃取小柱，考察甲拌磷在萃取柱上的富集效果。实验结果表明，水样在流速为2mL/min、4mL/min时甲拌磷回收率较高，但考虑到流速过低会影响样品处理时间，因此本文选择流速为4mL/min较合适。

2.4 色谱图

本文选用DB-1型毛细管色谱柱对浓度为20μg/L的甲拌磷标准样品进行色谱分析，根据色谱峰保留时间定性。在上述色谱条件下，甲拌磷出峰较快，峰形较好且灵敏度最高，见图1。

图1 甲拌磷标准样品色谱图

2.5 方法精密度试验

在上述色谱条件下对浓度为10．0μg/L甲拌磷溶液平行分析7次，计算其测定结果的相对标准偏差为1．47%，说明本方法具有良好的重现性，见表1。

2.6 样品加标回收率试验

用上述方法对5份地表水样品进行测定，结果每份水样中均未检出甲拌磷成分。在上述5份水样中分别加入一定浓度的甲拌磷标准溶液，按样品的前处理方法制成待测溶液，在上述气相色谱条件下进行测定与分析，考察方法的加标回收率（见表2）。甲拌磷的加标回收率在93．6%～104．8%间，表明本方法满足分析测试要求。

3 结论

本文建立了固相萃取——气相色谱法测定地表水中甲拌磷的方法，实际操作表明，甲拌磷在1．00～30．0μg/L浓度范围内有较好的线性关系，加标回收率为93．6%～104．8%，7组水样重复性RSD低于2%，测定结果令人满意。本方法操作简单，富集效率高，检出限低，精密度和加标回收率符合分析测试要求，有机试剂用量少，适用于地表水中甲拌磷的测定。

[1]陆华．液液萃取——气相色谱法测定地表水中17种有机氯农药研究[J]．环境科学与管理,2014,39(02):94-96．

[2]肖红,马莉,韩艳艳．液——液萃取气相色谱法测定地表水中痕量苯酚[J]．化学分析计量,2016,25(04):84-86．

[3]王荟,李娟,章勇．吹扫捕集——气相色谱/质谱联用法测定地表水中氯丁二烯[J]．环境监测管理与技术,2010,22(01): 41-43．

[4]张晓晖．固相萃取气相色谱法测定水中六六六和滴滴涕[J]．海峡预防医学杂志,2004,10(06):38-39．

[5]国家环境保护总局：《水和废水监测分析方法》编委会．水和废水监测分析方法[M]．第4版．北京：中国环境科学出版社．

[6]张丰,戴晓莹．固相萃取——气相色谱法测定水中硝基苯,硝基甲苯和四氯苯[J]．城镇供水,2015(03):49-51．

[7]中华人民共和国环境保护部．HJ168-2010环境监测分析方法标准制修订技术导则[S]．2010．

表1 精密度试验

表2 加标回收率试验

中国博士后科学基金资助项目（No.2017M611382）；深圳市技术攻关项目（项目名称：重20160117：水产品药物残留快速检测关键技术研发，No.JSGG20160429184803117）

O657.7

A

10.14025/j.cnki.jlny.2017.15.010

周守安，大专学历，研究方向：食品安全检测。

毕思远，博士，副研究员，硕士生导师，研究方向：食品安全检测。